乳糖化人血清白蛋白单磷酸阿糖腺苷抗病毒导向治疗的实验研究

对病毒性肝炎的抗病毒导向治疗具有靶向性较强、特异性较好的特点。交联物的结构纯度在99％以上,结构清楚,水溶性强,稳定性好,以平板滤膜超滤除热原获得成功,建立了超滤法分离纯化的工艺,快速方便,分离纯度高,回收率好,适合批量生产。交联物所用原料为人血清白蛋白及抗病毒药单磷酸阿糖腺苷,已广为     

端粒和端粒酶与肝细胞的永生化

目的:端粒是位于真核细胞染色体末端的蛋白-DNA复合体,保护染色体完整性和稳定性。端粒酶是一种特殊的细胞核蛋白反转录酶,能以自身的RNA为模板,反转录合成端粒DNA序列,添加到染色体末端。端粒酶介导的端粒延长作为细胞中端粒缩短的主要补偿机制,对正常细胞以及肿瘤细胞延长分裂代数起着重要作用。分化良好并具有肝脏正常合成代谢功能的永生化肝细胞在生物医学研究,尤其是肝细胞移植、生物人工肝支持治疗以及药理学和毒理学研究方面具有广泛的应用前景。资料来源:应用计算机检索Pubmed数据库1990-01/2005-12有关端粒、端粒酶和肝细胞永生化的文章,检索词“telomere,telomerase,hepatocyte,immortalization”,限定文章语言种类为English。同时计算机检索中国期刊全文数据库、万方数据库1994-01/2005-12期间的相关文章,检索词“端粒、端粒酶、永生化、肝细胞”,限定文章语言种类为中文。资料选择:纳入标准:①有关端粒和端粒酶结构和功能的研究文献。②有关端粒、端粒酶与肝细胞永生化相关性的文献。排除标准:重复研究。资料提炼:共收集到32篇有关端粒、端粒酶与肝细胞永生化相关性的文献,查找全文,从中选取14篇作为主要参考文献。资料综合:将所选文献资料按照以下顺序归纳总结:①端粒的结构和功能:端粒是指位于真核细胞染色体末端的一种特殊结构,由富含G的DNA重复序列与端粒结合蛋白所构成的一种蛋白-DNA复合体,它既可保护染色体不受核酸酶的破坏,又避免了因DNA粘性末端的裸露而发生的染色体融合。②端粒酶的结构和功能:端粒酶是一种RNA依赖的DNA聚合酶,能以自身的RNA为模板,反转录合成端粒DNA序列,添加到染色体末端,以补偿细胞分裂时端粒DNA缩短,使细胞克服危机期,成为永生化细胞。③端粒、端粒酶在肝细胞永生化:将端粒酶基因转染正常的人体细胞能使一部分细胞的寿命延长,这一技术目前已成功用于延缓组织工程细胞的衰老。结论:端粒酶的活化和端粒长度的维持与肝细胞永生化密切相关,端粒酶介导的永生化肝细胞为生物人工肝脏、肝细胞移植等临床治疗提供了细胞学基础。     

1993-2005年霍城县结核病控制项目涂阳病人化疗效果

新疆霍城县自1993年启动世界银行贷款中国结核病控制项目（即卫V项目）和2002年利用世界银行贷款英国增款中国结核病控制项目以来,严格按照卫V项目工作手册规定的要求,全面落实现代结核病控制（DOTS）策略,制定和实施严格的涂阳病人管理措施,积极建立健全推行三级防痨网的管理模式,对发现的涂阳肺结核病人进行免费治疗,全程督导管理,取得了明显的化疗效果,[第一段]     

肺结核患者健康教育效果观察

目的：探讨健康教育对肺结核患者增强自我保健意识的效果。方法：将60例患者随机分为观察组与对照组。观察组采取举办肺结核知识讲座、一对一口头教育等形式进行宣教，对照组给予常规指导。结果：有关肺结核知识掌握程度、对医疗护理满意率观察组显著高于对照组（P〈0.01）；平均住院日观察组较对照组明显缩短。结论：健康教育可提高患者对肺结核的认知水平。     

NF-κB/p65特异的RNAi腺病毒载体的构建及其对p65表达的抑制效应

目的构建NF-κB p65亚基特异的RNA干扰（RNAi）腺病毒表达载体，并验证其对p65亚基的基因沉默效应。方法设计合成三对针对p65 mRNA不同位点的短发夹RNA（shRNA）编码序列，克隆到穿梭载体中，通过体外同源重组将短干扰RNA（siRNA）表达盒转移到腺病毒骨架质粒，构建RNAi腺病毒表达载体；在HEK293A细胞中包装并扩增病毒、空斑实验法进行病毒滴度测定；腺病毒感染人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞，Western印迹法和免疫细胞化学法验证构建的RNAi腺病毒对p65蛋白表达的抑制效应。结果成功构建了NF-κB p65亚基特异的RNAi腺病毒表达载体，获得高滴度的腺病毒液；RNAi腺病毒感染ECV304细胞后可以高效抑制p65蛋白的表达，且对p65蛋白表达的抑制作用可持续6d以上。结论应用RNAi腺病毒表达载体能有效阻断目的基因的表达。     

成人麻疹基础研究进展

麻疹是由麻疹病毒引起的呼吸道传染病,在20世纪50年代以前,每隔2!3年会有1次麻疹大流行,人群中易感者超过40%即可引起大流行。自1963年世界各国开始推广使用麻疹疫苗,麻疹的流行情况一度得到了控制,在21世纪最初10年中地球上全面消灭麻疹已成为世界各国奋斗的目标。但     

1例多药耐药慢性乙型肝炎患者乙型肝炎病毒基因突变的5年动态分析

目的 动态检测乙型肝炎患者HBV逆转录酶基因和前C及基本核心启动子(BCP)区基因突变,分析基因突变与核苷(酸)类似物耐药、HBeAg阴转的关系.方法 收集1例在我院14次住院治疗患者血清18份,提取DNA,采用巢式PCR法扩增HBV靶基因片段,对PCR产物进行DNA双向测序,NTI软件对比分析结果,分析逆转录酶基因12个耐药位点和前C/BCP区6个位点上的突变情况,结合临床资料解析突变意义.结果 先后检测到了引起拉米夫定耐药的M204I/V共生突变、L180M+M204V突变,引起恩替卡韦耐药的S202G突变,以及引起HBeAg阴转的G1896A突变,检测结果与临床病情发展情况符合.结论 采用DNA序列测定方法可以全面了解HBV基因突变,有助于临床监测病情发展,合理进行抗病毒治疗.     

突变型HBV前C-C基因疫苗的构建及真核细胞表达

目的采用点突变技术对HBV前C—C基因中的蛋白酶切位点进行4处点突变,构建突变型HBV前C—C／ENHⅡ重组基因疫苗,转染HepG2细胞,研究其存真核细胞内的表达情况。方法采用单引物二次PCR法对质粒VEC依次进行基因点突变,得到151＋154（VE2）、151＋154＋164＋167点突变（VE4）2种突变型疫苗,转染HepG2细胞,通过细胞免疫化学、酶联免疫分析、免疫印迹等方法检测其在HepG2细胞内的表达情况及表达产物的分子量。结果VEC、VE2、VE4转染HepG2细胞均胞浆表达目的蛋白,产物分子量分别为18、20、22kD,细胞裂解液的HBeAg含量VE4、VE2高于VEC,上清中则反之。结诊安蛮刭HRV前C—C基因疫苗VE2、VE4构建成功并表达预期病毒前C蛋白前体。     

人博卡病毒感染的流行病学和诊断研究

人博卡病毒属于细小病毒科（Parvoviridae）博卡病毒属（Bocavirus）。2005年,瑞典学者Allande首次从患急性呼吸道感染的婴幼儿中分离得到该病毒。全球已有人博卡病毒感染的报道,但对该病毒仍然知之甚少。本文对人博卡病毒感染的流行病学特点和诊断作一综述。     

1株新型肠道病毒的生物学特性鉴定

目的从1例急性肝炎患儿粪便标本中分离到1株新型肠道病毒,鉴定其生物学特性。方法采用细胞培养、动物试验、中和试验、电子显微镜观察和分子生物学等技术进行鉴定。结果该病毒对乙醚不敏感,在pH3．0及37℃ 60min条件下稳定,56℃30min可以被灭活;能在A549和RD细胞中稳定传代,并致细胞病变;不能被已有肠道病毒免疫血清中和;小白鼠乳鼠对该病毒不敏感;电子显徽镜下可见27-30nm的肠道病毒样颗粒;部分核苷酸序列分析表明,病毒VPI区核苷酸序列与肠道病毒89型的同源性为87％。与其他病毒无有意义的同源性。结论该病毒的生物学特性与肠道病毒相似,但其抗原性和核苷酸序列等与已知肠道病毒有较大差异,可能属于肠道病毒89型的1个新亚型。