内毒素的量效和时效对人脐带间充质干细胞增殖的影响

  目的  探讨内毒素（Endotoxin),又称为脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）的量效和时效对人脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs）增殖的影响。  方法  用含不同浓度LPS（0.098、0.195、0.39、0.78、1.56、3.12、6.25、12.5、25和50 EU/mL）的干细胞培养基培养hUC-MSCs,采用CCK-8增殖实验检测24h、48h和72 h的细胞增殖情况。确定促进hUC-MSCs增殖的低浓度（0.098 EU/mL）、中浓度（1.56 EU/mL）和高浓度（25 EU/mL）LPS,选择作用时间72 h,进一步用流式细胞术明确LPS对hUC-MSCs增殖的影响。  结果  CCK-8检测结果提示,作用24 h、48 h时,表现为抑制hUC-MSCs的增殖。作用72 h时,表现为促进细胞增殖,且低浓度区域促进作用最显著,浓度增加其促增殖作用相对减弱。流式细胞术结果提示低浓度LPS组G0/G1期的占比降低,S期和G2/M期占比增高。  结论  LPS的量效和时效对hUC-MSCs的增殖表现出不同的效应,适宜的LPS浓度及作用时间有利于hUC-MSCs的增殖。     

胰腺癌细胞株中Elastase 3B基因启动子异常甲基化研究

目的探讨Elastase 3B（ELA3B）基因在胰腺癌中低表达的分子机制。方法应用RT-PCR方法检测2例正常胰腺组织和BxPC、CFPAC、PaTu8988、PANC1、SW1990 5株胰腺癌细胞株ELA3B基因表达。利用去甲基化试剂5-氮-2′-脱氧胞嘧啶（DAC）处理细胞株,再检测ELA3B基因表达,并用甲基化特异性PCR检测和测序进行验证。结果ELA3B在正常胰腺组织中表达,而在BxPC、CFPAC、PaTu8988、PANC1和SW1990 5株胰腺癌细胞株中均无表达。DAC处理后,BxPC、PaTu8988、PANC1和SW1990 4株胰腺癌细胞株表达ELA3B,而CFPAC仍不表达。正常胰腺组织和PANC1 ELA3B基因部分甲基化,而其他4株胰腺癌细胞株则高甲基化。结论ELA3B基因启动子的高甲基化是导致该基因在胰腺癌中表达下降的主要原因之一。     

尼古丁抑制小鼠睾丸间质细胞睾酮生成中的线粒体损伤作用

目的探讨尼古丁抑制小鼠睾丸间质细胞株(TM3)睾酮生成中对线粒体的损伤作用。方法尼古丁染毒处理TM3细胞24 h,采用CCK-8法检测细胞活性,流式细胞仪检测细胞凋亡,ELISA检测培养液睾酮水平,NAO探针染色检测线粒体质量,荧光酶标仪检测ATP水平,QPCR方法检测线粒体DNA拷贝数,western blot分析线粒体相关蛋白及睾酮合成关键酶蛋白的表达。结果 TM3细胞活性随尼古丁染毒剂量增加而降低;与对照组细胞相比,尼古丁在1～10μM剂量范围内对细胞凋亡率无明显影响,但诱导细胞睾酮水平显著降低(P=0.022,P=0.009和P=0.007);同时细胞线粒体质量(P=0.038,P=0.008和P=0.007)、线粒体DNA拷贝数(P=0.045,P=0.032和P=0.008)以及细胞ATP水平(P=0.037,P=0.007和P=0.005)也随尼古丁染毒浓度的增加而呈降低趋势。线粒体生物合成相关蛋白PGC1-α(P=0.007、P=0.003和P=0.002)、SIRT1(P=0.043,P=0.009和P=0.004)、COX I(P=0.036和P=0.008)以及线粒体睾酮合成酶蛋白St AR(P=0.009,P=0.007和P=0.005)和CYP11A1(P=0.007和P=0.006和P=0.001)的表达均随染毒剂量的升高而降低。结论尼古丁可抑制睾丸间质细胞TM3的睾酮生成,其机制可能与诱导细胞线粒体损伤及线粒体睾酮合成酶的表达降低有关。     

镉接触对749名工人健康影响的随访观察

目的 分析镉镍电池生产企业工人尿镉水平升高的危险因素,了解镉接触对他们健康的影响。
方法 选取2011年新乡市某电池生产企业参加体检的749人为研究对象,对他们进行问卷调查,检测其尿镉水平。分析不同尿镉水平与血常规、肺功能、尿常规、血压、肝功能等指标的关系。并在2014年对270位工人进行随访。
结果 2011年749名工人尿镉水平为（8.89±4.00）μg/g Cr,尿镉超标率（尿镉≥ 5 μg/g Cr）为64.0%（479/749）。女性作业工人尿镉水平为（9.35±4.00）μg/g Cr,高于男性的（8.36±3.94）μg/g Cr,差异有统计学意义（P < 0.01）。随着尿镉水平升高,工人肺功能、血压、肝功能、B超、胸片异常率亦随之升高（P < 0.05）。经多元线性回归分析,性别（β_女vs.男=0.680,P < 0.01）、年龄（β=0.048,P < 0.05）、工龄（β=0.114,P < 0.01）、接触水平（β_中vs.低=3.030,β_高vs.低=4.661,P < 0.01）是尿镉水平升高的影响因素,所得回归方程的R2=0.242,整体的F=47.519（P < 0.01）。2014年随访发现,270名工人尿镉超标率为70.0%,其中β₂-微球蛋白、血常规、血压和胸片检查的异常率均高于2011年（P < 0.05）。
结论 长时间镉接触可对职业工人血压、肝功能、肺功能等健康指标产生一定影响,须重点关注。
     

汶川大地震后理县食品安全保障的措施及经验

目的 确保理县居民和救灾人员地震灾害后的食品卫生安全.方法 调查、评估理县灾后的食品卫生状况,全面开展卫生监督、食品理化、微生物快速检验和食品卫生知识宣传教育,并针对存在食品安全隐患的重点单位、重点环节和重点食品加强监管.结果 理县在地震灾后未发生任何食品安全事件,当地居民的卫生观念和食品安全意识明显增强.结论 组织有力、重点突出、多方协作是灾后食品安全防疫工作的重要手段.     

HPLC法测定昆明山海棠中雷公藤酯甲含量

目的建立高效液相色谱法测定昆明山海棠药材中雷公藤酯甲含量的方法.方法采用反相C18柱,以乙腈-水（80：20）为流动相,205nm为检测波长,测定雷公藤酯甲的含量.结果雷公藤酯甲在0.42～10.5μg/mL范围内线性良好,r=0.9995,平均回收率94.3%,RSD为2.87%.结论本方法灵敏、准确、重现性好.     

苯并(a)芘对大鼠睾丸胰岛素样因子3基因表达的影响

目的 观察青春期大鼠苯并(a)芘(BaP)亚慢性染毒对睾丸间质细胞功能标志物胰岛素样因子3(Ins13)mRNA表达水平的影响.方法 72只青春期健康雄性SD大鼠随机分为溶剂对照组(玉米油)、1、5mg/kgBaP染毒组,每组24只.隔日染毒,等体积灌胃,连续染毒90d.分别于染毒后30、60和90 d,每组各随机选取8只大鼠处死.取睾丸、附睾、心、肝、脾、肾称重并计算脏器系数,放免法检测血清睾酮含量,实时荧光定量PCR法检测睾丸Ins13 mRNA表达差异.结果 60dBaP各染毒组以及90 d5 mg/kg组附睾系数显著低于对照组(P＜0.05);染毒30 d5 mg/kg组肝脏系数显著大于对照组(P＜0.05),90d时显著小于对照组(P＜0.05);血清睾酮水平30 d和60 d 5 mg/kg染毒组明显高于对照组(P＜0.05),90 d 5 mg/kg组明显低于1 mg/kg组(P＜0.05);BaP处理组睾丸Ins13 mRNA表达水平各时相点比对照组显著下调(P＜0.01),染毒60 d比30 d显著下调(P＜0.05),尤其是5mg/kg组(P＜0.01).结论 青春期大鼠BaP亚慢性暴露可以干扰血清睾酮及睾丸Ins13基因表达水平,对附睾、肝脏可能有潜在毒性.     

丙烯酰胺对人白血病细胞HPRT位点的影响

目的：为了研究丙烯酰胺（ＡＡ）对人白血病ＨＬ－６０细胞ＨＰＲＴ位点的影响作用。方法：本研究采用ＡＡ水溶液对ＨＬ－６０细胞进行浓度梯要毒，不同时间点进行单细胞向孔接种，在含６－ＴＧ培养基中筛选突变细胞，计数阳性克隆，测定接种存活率、克隆效率和突变频率。     

流式细胞术对小鼠外周血红细胞微核自动化检测的研究

本文报道双激光流式术对小鼠外周血嗜多染红细胞（ＰＣＥ）和成熟红细胞（ＮＣＥ）微核（ＭＮ）的自动化检测新方法。用噻唑橙染ＲＮＡ以区分ＰＣＥ和ＮＣＥ，用Ｈｏｅｃｈｓｔ３３３４２染ＤＮＡ以检测红细胞内ＭＮ。在用ＭＭＣ和ＣＯＬ进行的ＭＮ量效和时效关系研究中，其机检们和镜检结果吻合很好（ｒ＞０．９５），流式仪分选验证，证实其ＭＮ真实性在９５％以上，而检测速度比人工提高４０倍以上。本方法具有高速、精确、客观和完全自动化的特点，标志着流式仪对ＭＮ的自动化检测已达到实用化程度。     

微核形态用于区分非整倍体毒剂和染色体断裂剂的研究①

目的:通过比较非整倍体毒剂和染色体断裂剂诱导的各种微核形态类别的差异,探讨以微核形态指标区分两类诱变剂的可能性.方法:对6种标准诱变剂(非整倍体毒剂:秋水仙碱,长春新碱;染色体断裂剂:环磷酰胺,丝裂霉素C,乙基磺酸甲酯,7射线)诱导的小鼠骨髓红细胞微核,进行形态学分类分析.结果:①非整倍体毒剂诱导的环形微核率显著高于染色体断裂剂(分别为33.8±2.8,17.4±8.3;P=0.003),而圆形微核率显著低于后者(分别为51.6±6.5,72.3±9.1;P＜0.0001),肾形微核率有高于染色体断裂剂诱导的微核的趋势,但差别无显著性(分别为14.6±6.7,10.2±6.3,P=0.07);两类诱变剂诱导的3种类别的微核95%可信区间差异很大,其中圆形微核率和环形微核率完全分离;②得到通过微核形态区分两类诱变剂的判别方程.结论:微核的圆形、环形和肾形的发生率可用于区分非整倍体毒剂与染色体断裂剂的参考.