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101.
102.
目的探讨Elastase 3B(ELA3B)基因在胰腺癌中低表达的分子机制。方法应用RT-PCR方法检测2例正常胰腺组织和BxPC、CFPAC、PaTu8988、PANC1、SW1990 5株胰腺癌细胞株ELA3B基因表达。利用去甲基化试剂5-氮-2′-脱氧胞嘧啶(DAC)处理细胞株,再检测ELA3B基因表达,并用甲基化特异性PCR检测和测序进行验证。结果ELA3B在正常胰腺组织中表达,而在BxPC、CFPAC、PaTu8988、PANC1和SW1990 5株胰腺癌细胞株中均无表达。DAC处理后,BxPC、PaTu8988、PANC1和SW1990 4株胰腺癌细胞株表达ELA3B,而CFPAC仍不表达。正常胰腺组织和PANC1 ELA3B基因部分甲基化,而其他4株胰腺癌细胞株则高甲基化。结论ELA3B基因启动子的高甲基化是导致该基因在胰腺癌中表达下降的主要原因之一。 相似文献
103.
目的探讨尼古丁抑制小鼠睾丸间质细胞株(TM3)睾酮生成中对线粒体的损伤作用。方法尼古丁染毒处理TM3细胞24 h,采用CCK-8法检测细胞活性,流式细胞仪检测细胞凋亡,ELISA检测培养液睾酮水平,NAO探针染色检测线粒体质量,荧光酶标仪检测ATP水平,QPCR方法检测线粒体DNA拷贝数,western blot分析线粒体相关蛋白及睾酮合成关键酶蛋白的表达。结果 TM3细胞活性随尼古丁染毒剂量增加而降低;与对照组细胞相比,尼古丁在1~10μM剂量范围内对细胞凋亡率无明显影响,但诱导细胞睾酮水平显著降低(P=0.022,P=0.009和P=0.007);同时细胞线粒体质量(P=0.038,P=0.008和P=0.007)、线粒体DNA拷贝数(P=0.045,P=0.032和P=0.008)以及细胞ATP水平(P=0.037,P=0.007和P=0.005)也随尼古丁染毒浓度的增加而呈降低趋势。线粒体生物合成相关蛋白PGC1-α(P=0.007、P=0.003和P=0.002)、SIRT1(P=0.043,P=0.009和P=0.004)、COX I(P=0.036和P=0.008)以及线粒体睾酮合成酶蛋白St AR(P=0.009,P=0.007和P=0.005)和CYP11A1(P=0.007和P=0.006和P=0.001)的表达均随染毒剂量的升高而降低。结论尼古丁可抑制睾丸间质细胞TM3的睾酮生成,其机制可能与诱导细胞线粒体损伤及线粒体睾酮合成酶的表达降低有关。 相似文献
104.
105.
106.
107.
目的 观察青春期大鼠苯并(a)芘(BaP)亚慢性染毒对睾丸间质细胞功能标志物胰岛素样因子3(Ins13)mRNA表达水平的影响.方法 72只青春期健康雄性SD大鼠随机分为溶剂对照组(玉米油)、1、5mg/kgBaP染毒组,每组24只.隔日染毒,等体积灌胃,连续染毒90d.分别于染毒后30、60和90 d,每组各随机选取8只大鼠处死.取睾丸、附睾、心、肝、脾、肾称重并计算脏器系数,放免法检测血清睾酮含量,实时荧光定量PCR法检测睾丸Ins13 mRNA表达差异.结果 60dBaP各染毒组以及90 d5 mg/kg组附睾系数显著低于对照组(P<0.05);染毒30 d5 mg/kg组肝脏系数显著大于对照组(P<0.05),90d时显著小于对照组(P<0.05);血清睾酮水平30 d和60 d 5 mg/kg染毒组明显高于对照组(P<0.05),90 d 5 mg/kg组明显低于1 mg/kg组(P<0.05);BaP处理组睾丸Ins13 mRNA表达水平各时相点比对照组显著下调(P<0.01),染毒60 d比30 d显著下调(P<0.05),尤其是5mg/kg组(P<0.01).结论 青春期大鼠BaP亚慢性暴露可以干扰血清睾酮及睾丸Ins13基因表达水平,对附睾、肝脏可能有潜在毒性. 相似文献
108.
丙烯酰胺对人白血病细胞HPRT位点的影响 总被引:4,自引:0,他引:4
目的:为了研究丙烯酰胺(AA)对人白血病HL-60细胞HPRT位点的影响作用。方法:本研究采用AA水溶液对HL-60细胞进行浓度梯要毒,不同时间点进行单细胞向孔接种,在含6-TG培养基中筛选突变细胞,计数阳性克隆,测定接种存活率、克隆效率和突变频率。 相似文献
109.
流式细胞术对小鼠外周血红细胞微核自动化检测的研究 总被引:1,自引:1,他引:1
本文报道双激光流式术对小鼠外周血嗜多染红细胞(PCE)和成熟红细胞(NCE)微核(MN)的自动化检测新方法。用噻唑橙染RNA以区分PCE和NCE,用Hoechst33342染DNA以检测红细胞内MN。在用MMC和COL进行的MN量效和时效关系研究中,其机检们和镜检结果吻合很好(r>0.95),流式仪分选验证,证实其MN真实性在95%以上,而检测速度比人工提高40倍以上。本方法具有高速、精确、客观和完全自动化的特点,标志着流式仪对MN的自动化检测已达到实用化程度。 相似文献
110.
目的:通过比较非整倍体毒剂和染色体断裂剂诱导的各种微核形态类别的差异,探讨以微核形态指标区分两类诱变剂的可能性.方法:对6种标准诱变剂(非整倍体毒剂:秋水仙碱,长春新碱;染色体断裂剂:环磷酰胺,丝裂霉素C,乙基磺酸甲酯,7射线)诱导的小鼠骨髓红细胞微核,进行形态学分类分析.结果:①非整倍体毒剂诱导的环形微核率显著高于染色体断裂剂(分别为33.8±2.8,17.4±8.3;P=0.003),而圆形微核率显著低于后者(分别为51.6±6.5,72.3±9.1;P<0.0001),肾形微核率有高于染色体断裂剂诱导的微核的趋势,但差别无显著性(分别为14.6±6.7,10.2±6.3,P=0.07);两类诱变剂诱导的3种类别的微核95%可信区间差异很大,其中圆形微核率和环形微核率完全分离;②得到通过微核形态区分两类诱变剂的判别方程.结论:微核的圆形、环形和肾形的发生率可用于区分非整倍体毒剂与染色体断裂剂的参考. 相似文献