低氧微环境下内质网应激及其相关疾病

内质网应激是细胞应激的重要组成部分,是真核细胞的一种保护性反应。氧分压改变（如低氧）是重要的应激条件,显著影响细胞的生物学表型及细胞行为（生存、迁移及侵袭等）。细胞通过内质网应激降低胞内未折叠蛋白的浓度,抑制未折叠蛋白凝集的发生。近来发现内质网应激与肿瘤、糖尿病及炎症等多种疾病的发生、发展密切相关,组织局部的低氧微环境是这些疾病的特征之一。因此对低氧导致的内质网应激的发生及其机制的研究,对肿瘤、心血管疾病及糖尿病等疾病治疗新策略的发展具有重要意义。     

AIDS病毒及其病因和致病的研究进展

获得性免疫缺陷综合征(Aquired Immunodeficient Syndrom, AIDS)被视为是20世纪80年代流行最广的瘟疫。该病发病率、死亡率均相当高。据统计,     

肾囊内胰岛移植治疗Ⅰ型糖尿病

我们报道了肾囊内胰岛移植治疗Ⅰ型糖尿病患者６例，其中２例停用胰岛素治疗，２例中１例停用胰岛素至今已３６个月。另４例每日胰岛素用量也大为减少。全部６例患空腹历浆Ｃ－肽水平由移植前的０．１８４±０．０６ｐｍｏｌ／ｍｌ升至移植后的１．０９４±０．１３ｐｍｏｌ／ｍｌ。     

应用“801”除氧剂培养厌氧菌

厌氧培养法种类很多,其中应用最广的方法之一是厌氧罐法。1916年 Mclntosh 和Fildes 首先创用厌氧罐法,以后又出现真空除氧法,氢或磷的燃烧去氧法,氮驱氧法,以及生物耗氧法等,但因这些方法程序繁锁而未被广泛采用。目前较多应用的是焦性没食子酸吸氧法。近来,我们试用化学除氧剂“801”进行厌氧培养,取得良好效果,而     

海龙蛤蚧精对小鼠免疫功能的影响

正常小鼠肌肉注射环磷酰胺(CTX)或醋酸氢化泼尼松(HPA)造成免疫低下模型。通过巨噬细胞(Mφ)吞噬功能试验、淋巴器管重量测定、外周血淋巴细胞α-醋酸萘酯酶染色、溶血素测定及PFC试验,观察海龙蛤蚧精对小鼠免疫系统的影响。结果表明:海龙蛤蚧精能完全或部分对抗免疫抑制剂的免疫抑制作用,对细胞及体液免疫功能均有一定保护和促进作用。     

基因芯片技术检测肝细胞癌前C区/BCP区基因突变

目的应用基因芯片技术探讨HBV慢性感染并发肝细胞癌(HCC)前C区/BCP区基因突变的临床意义。方法应用基因芯片杂交技术检测46例HBV慢性感染并发肝细胞癌前C区A1896、A1899及BCP区nt1762、nt1764四位点突变,比较各位点突变的发生率;据乙肝血清学标志熏将研究对象分为HBeAg阳性组、HBeAg阴性组两组,比较前C区/BCP区变异与HBeAg分泌障碍的关系,分析前C区/BCP区基因突变与血清HBVDNA定量的关系。结果①用基因芯片法测定46例患者,阳性率91.3%(42/46),A1896突变率52.4%,A1899突变率19%熏nt1762/nt1764联合突变率66.7%。②HBeAg阴性组与HBeAg阳性组比较,A1896突变率、nt1762nt1764联合突变率及多位点突变率明显为高,P<0.05。前C区/BCP区变异组与非变异组比较,HBVDNA定量无显著性差异。结论应用基因芯片法可一次同时检测乙型肝炎病毒多个突变位点熏HBV持续慢性感染并发的HCC前C区/BCP区变异的发生率较高,该变异与HBeAg分泌障碍有关,但与HBVDNA复制水平并无明显相关性。     

细胞外信号调节激酶信号通路对蛋白酶体抑制剂MG262诱导卵巢上皮性癌细胞凋亡的调控作用

目的 探讨细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路对蛋白酶体抑制剂MG262诱导卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞凋亡的调控作用.方法 不同浓度(1、10、20、40、60、80 nmol/L)的MG262分别处理卵巢癌细胞株SKOV3细胞24、48 h后,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测SKOV3细胞的存活率.MG262及ERK抑制剂PD98059分别及联合处理24 h后,流式细胞仪检测SKOV3细胞及胚肾上皮细胞株293T细胞的凋亡率;酶联免疫吸附试验(ELISA)及蛋白印迹法分别检测SKOV3细胞培养上清液中血管内皮生长因子(VEGF)的浓度及细胞内VEGF蛋白的表达.MG262处理不同时间(3、6,9、12 h)后,蛋白印迹法检测SKOV3细胞内磷酸化ERK(p-ERK)及野生型p53蛋白的表达.以上实验以未加药物者为对照.结果 MTT比色法检测发现,随着MG262浓度的增加,SKOV3细胞的存活率明显下降(P＜0.05).流式细胞仪检测发现,MG262、PD98059分别或联合处理SKOV3细胞后,其细胞凋亡率分别为(30.7±4.3)%、(26.8±8.6)%、(50.3±10.6)%,与对照细胞的(7.9±1.9)%比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);两药单独处理者分别与联合处理者比较,差异也均有统计学意义(P＜0.01).而两药分别或联合处理293T细胞后,其细胞凋亡率分别为(14.5±5.3)%、(16.2±7.5)%、(10.8±7.3)%,与对照细胞的(12.2±6.3)%比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).ELISA及蛋白印迹法检测显示,MG262处理后SKOV3细胞培养上清液中VEGF的浓度及细胞内VEGF蛋白的表达水平均明显下降(P＜0.05).MG262处理不同时间后,SKOV3细胞内p-ERK蛋白的表达水平明显下降(P＜0.05);但SKOV3细胞内野生型p53蛋白在MG262处理前、后均无表达.结论 MG262可通过ERK信号通路诱导卵巢癌细胞凋亡,抑制卵巢癌细胞的增殖及血管生成.     

雌激素代谢基因CYP17和COMT单核苷酸多态与子宫内膜腺癌风险的关系

目的：研究参与雌激素合成的细胞色素P450c17(CYP17)和雌激素代谢解毒的儿茶酚-O-甲基转移酶(catechol-O-methyltransferase, COMT)基因多态与子宫内膜腺癌发生的关系。方法：以病例-对照研究，采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析（PCR-RFLP）法检测80例子宫内膜腺癌患者和84例对照者的CYP17基因转录起始点上游34bp处的T／C多态及COMT基因第四外显子第158位密码子Val/Met多态。结果：A1/A1、 A1/A2、 A2/A2 三种多态基因型在对照组和子宫内膜腺癌组中的分布差异有统计学意义（P<0.05）,其中A1/A1和A1/A2基因型在子宫内膜腺癌组中的分布频率明显高于对照组。子宫内膜腺癌组A1等位基因的分布频率较对照组高，差异有统计学意义（P<0.05）。与A2/A2基因型相比，A1/A1基因型个体和A1/A2基因型个体发生子宫内膜腺癌的相对危险度（OR）分别是3.152和2.693，其差异均有统计学意义（P<0.05）。COMT基因型频率在对照组和子宫内膜腺癌组中的分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论：CYP17基因MspAI1位点的A1/A1和A1/A2基因型及A1等位基因与子宫内膜腺癌的发生有关，可作为子宫内膜腺癌易感人群筛查的重要指标,而COMT基因多态性与子宫内膜腺癌风险无相关性。     

Ki-67、PCNA及HPV在宫颈癌和宫颈上皮内瘤变的表达及意义

目的:研究Ki-67,增殖细胞核抗原(PCNA)在早期宫颈癌(IA~IIA期高分化)、宫颈上皮内瘤变(CINI、CINII、CINIII)及慢性宫颈炎中的表达,及其与HPV感染的关系,探究3者联合应用的诊断价值。方法:应用免疫组织化学S-P法检测宫颈病变中Ki-67、PCNA抗原的表达,PCR反应检测HPV感染,结合临床病理特点分析。结果:慢性宫颈炎、CIN、宫颈鳞癌中Ki-67阳性表达率分别为33.33%、89.19%、100%。PCNA阳性表达率分别为66.67%、97.30%、100%。HPV阳性率分别是13.33%、54.05%、1000%。CINI和CINII/III中Ki-67阳性表达率分别为85.00%、94.12%;PCNA阳性表达率分别为95.00%、100.00%。HPV阳性率分别是30%、82.35%。CIN和宫颈癌中的Ki7、PCNA及HPV的阳性表达与宫颈炎相比,差异均有显著性(P<0.05)。Ki-67及PCNA过表达率在CINII/III组与CINI组间差异显著(P<0.05)。HPV阳性率在CINII/III与CINI之间差异显著(P<0.01)。Ki-67及PCNA表达与HPV感染有相关性(P<0.05)。结论:Ki-67、PCNA抗原过表达与CINII/III和早期宫颈癌显著相关。Ki-67、PCNA表达与HPV感染率相关,联合检测宫颈组织中Ki-67、PCNA的过表达及HPV感染,有助于判断细胞的增殖活性,可作为诊断早期宫颈癌和CINII/III的标记物。