尖锐湿疣患者HPV感染类型与细胞免疫功能关系的研究

目的　探讨尖锐湿疣 (CA)患者组织中HPV感染的类型与细胞免疫功能的关系。方法　采用PCR技术检测组织中HPVDNA ,流式细胞仪检测外周血T细胞亚群 ,ELISA法检测血清中细胞因子。结果　CA患者组织中HPV阳性率为 96 2 0 % ,假性湿疣 (PCV)患者组织中HPV阳性率为 5 0 0 %。CA组外周血CD3+ T细胞、CD4 +T细胞、CD4 + /CD8+ T细胞分别为 (5 1 2 3± 5 5 1) %、(2 3 5 2± 4 90 ) %、0 90± 0 84均低于PCV组 (6 0 31±9 4 6 ) %、(35 13± 5 94 ) %、1 5 5± 0 77和正常体检对照组 (6 1 0 1± 9 2 1) %、(36 4 6± 6 0 4 ) %、1 5 9± 0 78(均P<0 0 1) ;CA组外周血CD8+ T细胞为 (2 5 98± 5 78) %均高于PCV组 (2 2 6 7± 2 94 ) %和正常体检对照组 (2 2 86± 3 0 1) % (均P <0 0 5 ) ;CA组血清中IL - 12产生水平为 (6 1 38± 5 38) %均低于PCV组 (82 0 3± 9 0 1) %和正常体检对照组 (81 75± 10 18) % (均P <0 0 5 ) ;不同型别HPV感染的CA患者之间外周血CD3+ 、CD4 + 、CD8+ 、CD4 + /CD8+ 和血清中IL - 12产生水平无差异 (P >0 0 5 )。结论　CA患者存在细胞免疫缺陷 ,不同型别HPV感染的CA患者之间细胞免疫功能无差异     

复发性口腔溃疡患者血清中微量元素含量及细胞免疫功能的研究

目的 :探讨复发性口腔溃疡 (RAU)患者血清中微量元素含量及细胞免疫功能状态。方法 :采用原子吸收分光光度计检测血清中微量元素的含量 ,流式细胞仪检测外周血 T细胞亚群和 NK细胞百分比 ,ELISA法检测血清中细胞因子。结果 :RAU组血清中锌和硒的含量均明显低于对照组 (均 P<0 .0 1 ) ,而镁、铁、铜的含量与对照组之间的差别无显著性的意义 (均P>0 .0 5 ) ;RAU组外周血中 CD3 + 、CD4 + 、CD4 + /CD8+ 和 CD5 6 + 细胞 (NK细胞 )的比例均明显低于对照组 (均 P<0 .0 1 ) ,RAU组血清中 IL- 1 2产生水平明显低于对照组 (P<0 .0 1 ) ,而 IL- 1 0产生水平明显高于对照组 (P<0 .0 1 )。结论 :RAU患者存在细胞免疫功能缺陷 ,临床治疗须提高 RAU患者的细胞免疫功能 ,合理补锌和补硒对于防治 RAU有重要意义     

雏凤精对小鼠免疫功能的影响

正常小鼠肌肉注射环磷酰胺(CTX)或醋酸氢化泼尼松(HPA)造成免疫低下模型,通过巨噬细胞(Mφ)吞噬功能试验,淋巴器官重量测定,外周血淋巴细胞α-醋酸萘酯酶染色,溶血素测定及PFC试验,观察雏凤精对小鼠免疫系统的影响。结果表明:雏凤精能完全或部分对抗免疫抑制剂的免疫抑制作用,对细胞及体液免疫功能均有一定保护和促进作用。     

人1igatin样基因HCA56的克隆及其生物信息学分析

目的 利用SEREX方法筛选人肝细胞癌(HCC)cDNA表达文库，克隆能引起机体体液免疫应答的抗原编码基因，并对其进行生物信息学分析，以指导对新克隆基因功能的研究。方法采用ZAP—cDNA Gigapack Ⅲ Gold Cloning试剂盒构建人HCC cDNA表达文库，用患者自体血清进行筛选，对筛选得到的阳性克隆进行序列测定。通过生物信息学对筛选得到的阳性克隆HCA56进行染色体定位、基因结构分析、蛋白序列预测以及相似性搜索和功能分析。逆转录多聚酶链反应(RT—PCR)检测HCA56的组织表达谱。结果 通过对一个cDNA表达文库的筛选，获得了一个血清反应阳性克隆HCA56，全长2021bp，编码584个氨基酸，定位于染色体1q31～q32。数据库搜寻表明它与人ligatin编码基因片段有95％的相似性。RT—PCR显示HCA56广泛分布于各种正常组织。结论 HCA56很可能是ligatin的全长编码基因，生物信息学与分子生物学相互结合是进行新基因研究的有效方法。     

妊娠早期CD56brightCD16- NK细胞CD49d和CD11b的表达分析

目的  探讨早期妊娠和稽留流产患者外周血CD56brightCD16- NK细胞及蜕膜组织子宫自然杀伤(uNK)细胞中整合素α4（CD49d）和αm (CD11b)的表达。方法  采集18例早期妊娠妇女外周血（其中14例另取蜕膜组织）和9例稽留流产妇女外周血,Ficoll密度梯度离心法分离单个核细胞悬液,流式细胞术检测样本CD56brightCD16- NK细胞中CD49d和CD11b表达。结果  CD49d和CD11b在早期妊娠蜕膜CD56brightCD16- NK细胞表达显著低于早期妊娠妇女外周血CD56brightCD16-NK细胞(P＜0.01);稽留流产患者外周血CD56brightCD16- NK细胞的表达较早期妊娠妇女显著降低(P＜0.05)。结论  CD49d和CD11b可能在妊娠早期uNK细胞的募集中起重要作用,同时也可能参与了正常妊娠的维持。     

瘦素对HTR8-SVneo细胞增殖的影响及调控机制

目的研究瘦素(Leptin)对HTR8-SVneo滋养细胞系增殖的影响及对DNA结合和分化抑制剂(ID)分子表达水平的影响,探讨Leptin对HTR8-SVneo细胞增殖作用的调节机制。方法体外培养HTR8-SVneo滋养细胞,MTT法检测Leptin不同质量浓度(0、10、50、100、250、500 ng/mL)刺激后细胞增殖情况。HTR8-SVneo细胞培养体系中加入Leptin(0、100、500 ng/mL),RT-PCR检测瘦素受体(Leptin R)各亚型表达,实时定量PCR检测ID分子表达,Western Blot检测ID2表达。SiRNA干扰ID2分子后,分为Leptin(0 ng/mL)、Leptin(100 ng/mL)、Leptin(500 ng/mL)、Leptin(0 ng/mL)+ID2-siRNA、Leptin(100 ng/mL)+ID2-siRNA、Leptin(500 ng/mL)+ID2-siRNA,MTT检测Leptin对HTR8-SVneo滋养细胞增殖的影响。结果与Leptin(0 ng/mL)比较,高质量浓度Leptin(100、250、500 ng/mL)促进HTR8-SVneo细胞增殖(P<0.05);HTR8-SVneo细胞表达除HuB219.2外的全部受体亚型;Leptin以剂量依赖方式促进HTR8-SVneo细胞ID2分子及OB-RL表达(P<0.05);ID2-siRNA抑制ID2表达并逆转Leptin对滋养细胞增殖的促进作用。结论 Leptin可能通过Leptin R-ID2途径促进HTR8-SVneo细胞增殖,为阐明滋养细胞增殖调控机制提供了新的基础数据。     

去甲肾上腺素对胶质母细胞瘤侵袭迁移能力的影响及机制研究

目的   研究应激激素去甲肾上腺素(NE)对胶质母细胞瘤侵袭迁移能力的影响及机制,并探讨β受体阻断剂普萘洛尔(propranolol)抗应激所致肿瘤侵袭转移的可行性。方法   培养胶质母细胞瘤细胞系T98G、U251及U87,采用RT-PCR检测胶质瘤细胞系β肾上腺素能受体表达,Transwell评价NE对胶质瘤细胞侵袭迁移的影响,明胶酶谱法检测NE对胶质瘤细胞系MMP 2分泌水平影响。结果   随NE浓度增加(0.1~10μmol/L),胶质瘤细胞侵袭力逐渐增强(P>0.05),普萘洛尔(1nmol/L)可抑制此效应;随NE浓度增加(0.1~10μmol/L),胶质瘤细胞基质金属蛋白酶 2(MMP-2)分泌显著增多,普萘洛尔(1nmol/L)可抑制NE诱导的MMP 2分泌。结论   应激激素去甲肾上腺素可以促进胶质母细胞瘤MMP-2分泌酶活性从而增强其迁移能力,普萘洛尔可以抑制NE诱导的胶质瘤侵袭增强。     

罗勒多糖抗卵巢癌侵袭转移的体外实验研究

目的： 探讨罗勒多糖抗卵巢癌侵袭转移的作用机制及其肿瘤乏氧微环境对其效应的影响,为临床应用研究提供依据。方法：罗勒多糖分别在常氧（21%O2、5%CO2）和乏氧（1%O2、5%CO2和94%N2）环境中作用于人卵巢癌SKOV3细胞,形态学观察不同氧环境下各组细胞形态差异;Transwell小室实验检测各组细胞的侵袭运动能力;明胶酶谱法分析各组细胞分泌的基质金属蛋白酶-2（MMP-2）活性差异;RT-PCR技术检测骨桥蛋白（OPN）mRNA表达水平;免疫细胞化学法观察各组细胞胞内OPN表达情况。结果：与对照组相比,罗勒多糖在常氧和乏氧环境下都能够降低SKOV3细胞的侵袭运动能力,抑制细胞中MMP-2的分泌,抑制人卵巢癌SKOV3细胞中OPN的表达（转录水平、蛋白水平）,且乏氧环境下罗勒多糖的上述作用更为显著。结论：低氧显著增强人卵巢癌SKOV3细胞的迁移能力,罗勒多糖可能通过下调骨桥蛋白表达及基质金属蛋白酶-2的分泌,抑制其侵袭运动能力。     

C-myc及C-Ha-ras-1癌基因在宫颈炎组织中的存在及相互关系

应用斑点分子杂交技术检测了87例慢性宫颈炎活检标本中C-myc和C-Ha-ras-l癌基因,结果发现7％的标本中C-ras-l癌基因阳性,13％的标本中C-myc癌基因阳性;并且在6例C-Ha-ras-l阳性的标本中有一半(3例)同时C-myc癌基因也阳性。结果提示,慢性宫颈炎中存在C-myc和C-Ha-ras-l癌基因的激活和扩增,C-myc和C-Ha-ras-l癌基因可能协同作用引起宫颈癌的发生。     

反复性呼吸道感染患儿头发中微量元素含量及淋巴细胞亚群的检测

目的：了解反复性呼吸道感染（RRI）患儿头发中微量元素含量及外周血淋巴细胞亚群状况。方法：采用原子吸收分光光度法检测头发中微量元素的含量，流式细胞仪检测外周血淋巴细胞亚群。结果：RRI患儿头发中钙和锌元素的含量明显低于对照组，两组之间的差别均具有显著性的意义（均P＜0．05），RRI组镁、铁、铜、钠、锰、钾和铅的含量与对照组之间的判别无显著性的意义（均P＞0．05）；RRI组外周血中CD3^ 、CD4^ 、CD4^ ／CD8^ 、CD16^ CD56^ 的比例均明显低于对照组（均P＜0．05），RRI患者外周血中CD3^ CD8^ 和CD3－CD19^ 细胞的比例与对照组之间的差别无显著性的意义（均P＞0．05）。结论：RRI患者头发中钙和锌的含量降低，患儿外周血淋巴细胞亚群的失调，临床治疗须提高RRI患者的免疫功能，合理补钙和补锌对于防治RRI有重要意义。