CCK-8法和MTT法评价医用抗菌不锈钢细胞毒性的比较研究

[摘要] 目的 通过MTT法和CCK-8法对医用抗菌不锈钢的细胞毒性进行比较研究,为其临床应用提供生物学证据。方法 将各组材料制备成15 mm×10 mm×3 mm的长方体试件,按样品表面积:溶液体积3 cm~2/ml的比例制备浸提液,通过倒置相差显微镜观察共培养24、48、72 h的细胞形态,并通过MTT比色法和CCK-8法得出细胞在培养24、48、72 h的吸光度(A)值,进而计算其RGR评价抗菌不锈钢的细胞毒性。结果 ①培养48 h后,随着作用时间的延长,阳性对照组细胞表现出明显的中毒形态,其余各组细胞生长旺盛,医用不锈钢及抗菌不锈钢组开始出现少量细胞核固缩。②MTT实验中,阴性对照组、不锈钢试件组及阳性对照组的A值呈递减趋势,但抗菌不锈钢和普通医用不锈钢的A值无显著差异。③CCK-8实验结果显示,各组A值按阴性对照组、抗菌不锈钢试件组、普通医用不锈钢对照组、阳性对照组的顺序呈递减趋势,差异有显著性。④实验中各组试件的细胞毒性均为0级。结论 ①抗菌不锈钢毒性等级与医用不锈钢相同,符合口腔正畸材料的临床应用要求。②CCK-8法较MTT法具有更高的灵敏度和可重复性,值得推广应用。     

镍钛基形状记忆合金体外生物相容性研究进展

近等原子比的镍钛形状记忆合金(NiTi-SMA)因具有特殊的形状记忆效应以及超弹性,多年来一直作为口腔正畸矫治弓丝材料应用于临床。由于镍钛基合金材料含有大量镍元素,在口腔环境中可能会由于金属腐蚀作用析出镍离子,对局部组织有致敏甚至致癌的危害。本文回顾NiTi-SMA生物相容性相关历史文献,总结该合金的表面腐蚀、细胞毒性、基因毒性等方面的研究进展,并指出NiTi-SMA表面处理的必要性。     

电阻应变花测量法研究2种不同材料对全冠的力学性能影响

目的探讨两种不同合金对固定义齿刚性及粘结层破坏负荷的影响。方法制作带有悬臂梁的轴面厚度为1.0mm的铸造钴铬合金及金合金冠试件各5个,采用电阻应变花测量法分别检测冠在试戴和玻璃离子水门汀粘结状态下、咬合面中央和悬臂梁末端加载时的应力-应变情况及粘结层的破坏负荷。结果粘结状态下悬臂梁末端负荷时冠的应变较试戴时显著减小,在悬臂梁正下方应变最大。两种不同合金冠的应变及粘结层的破坏负荷无显著性差异。结论固定义齿粘结后其刚性增强;悬臂梁末端受力更易造成冠的变形和粘结层的破坏。     

新生儿脐带应用消毒剂对脐带细菌繁殖和感染的抑制作用

在发展中国家 ,脐带感染是引起新生儿发病率和病死率增加的主要原因 ,在发达国家 ,这种现象也普遍存在 ,可通过给孕妇注射破伤风类毒素、保持新生儿脐带的清洁以及减少对脐带不利的操作来预防脐带感染。洗必泰对革兰阴性和阳性菌具有广谱杀菌效力 ,可以清洁皮肤 ,毒力低 ,是抗菌治疗的首选药物。     

162例高血压脑出血手术治疗临床分析

我院1996年6月至2009年7月手术治疗高血压脑出血162例,取得满意效果,现做如下分析. 1 临床资料 (1)一般资料:本组162例中男98例,女64例.年龄41～74岁,平均55.4岁;其中＞60岁67例.所有病例均有高血压病史.(2)出血部位及出血量;出血位于基底节区、内囊115例(其中破入脑室30例),皮质下、外囊31例,脑室出血或丘脑出血破入脑室9例;小脑半球7例.依据多田氏公式计算出血量,幕上出血30～40ml22例,40～60ml93例,60～80ml27例,80～120ml13例;小脑半球出血7例,分别为15～20ml3例、21～25ml4例.(3)术前意识状况:术前清醒16例,浅昏迷79例,中度昏迷52例,深昏迷15例,一侧瞳孔散大58例,双侧散大11例.(4)手术方式:均气管插管全麻,血肿清除去骨瓣减压87例,单纯血肿清除68例,后颅窝开颅7例.(5)手术时机:发病后7 h内手术78例,8～48 h手术56例,2～8 d手术28例.     

RP-HPLC法同时测定洋金花中东莨菪碱和阿托品的含量

目的建立RP-HPLC同时测定洋金花中东莨菪碱与阿托品含量的方法。方法采用CAPCELL PAK C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以0.05 mol.L-1磷酸二氢钾溶液(内含0.002 5 mol/L庚烷磺酸钠)-乙腈(84∶16)(调节pH至5.0)为流动相,流速为1.0 ml.min-1,柱温35℃,检测波长为215nm。结果东莨菪碱和阿托品的线性范围分别为1.17～11.66μg和0.29～2.86μg,平均回收收率分别为99.68%和99.41%,RSD分别为1.16%和0.77%(n=9)。结论该方法简单、快速,组分分离良好,可用于洋金花药材的质量控制。     

取向性丝素蛋白仿生软骨支架的制备及其生物相容性评估

目的 利用定向结晶技术制备具有仿生取向微孔结构的丝素蛋白支架,探讨其作为软骨支架的可行性。方法 以丝素蛋白为原料,采用定向结晶技术制成具有仿生取向微孔结构的支架,扫描电镜观察支架结构,测量支架的孔径、孔隙率和力学性能。从兔颈背部分离出脂肪干细胞,培养后获取第3 代细胞,接种到支架上。CCK 8 检测支架上细胞增殖情况;HE染色和扫描电镜观察细胞在支架上的黏附能力;LIVE/DEAD染色观察支架上的细胞活性。结果 扫描电镜显示,支架纵切面可见平行排列的微管样结构,具有较为统一的方向性,横切面可见椭圆或圆形孔隙结构,横截面微孔结构的平均孔径为（112.43± 12.65）μ m ,孔隙率高达（90.25± 2.05）% ,支架压缩弹性模量为（52.48± 5.78）kPa;复合脂肪干细胞培养,HE染色和扫描电镜可见细胞均匀黏附在支架表面及孔隙内,分泌大量沿微 孔结构取向分布的细胞外基质;CCK 8 检测结果显示细胞在支架上增殖良好;LIVE/DEAD染色显示细胞保持良好的活性,未见死细胞。结论 取向性丝素蛋白支架具有均匀的仿生取向微孔结构,具有合适的孔径、孔隙率和生物相容性,力学强度良好,可作为软骨组织工程的支架载体。     

高原地区静脉输液配药技巧

静脉输液配药是临床常用护理操作之一.青海玉树地区平均海拔4493 m,大气压为460 mmHg,其特殊的地理环境使静脉输液配药难度增大.结合2010年玉树抗震救灾一线临床实践,我们对静脉输液配药进行反复操作,总结了高原地区静脉输液配药技巧,现报告如下.     

MT1-MMP对人肝癌细胞株HepG2生物学行为的影响

目的 观察膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)对人肝癌细胞株HepG2生物学行为的影响.方法 将稳定表达MT1-MMP基因转染至HepG2细胞中,应用RT-PCR、Ⅰ型胶原黏附和Matrigel侵袭小室实验,检测细胞MT1-MMP mRNA水平,体外黏附、侵袭和迁移能力的变化.结果 重组质粒转染株MT1-MMP mRNA表达水平明显高于空质粒组和对照组(P<0.01).MT1-MMP明显提高细胞Ⅰ型胶原黏附、迁移和Matrigel侵袭能力(P<0.01).结论 MT1-MMP过表达可促进HepG2细胞体外侵袭和转移,提示其可作为人肝癌抗侵袭治疗的分子靶点.     

下颌管定位与下颌支矢状骨劈开术后感觉神经障碍相关性的临床观察

目的 用CT扫描来确定下颌前突患者下颌支部下颌管的定位,并评价下颌管与颊侧骨皮质之间骨髓腔宽度与术后感觉神经障碍(NSD)之间的关系。方法 把通过下颌管最先形成的平面作为基础平面1,紧邻下颌第二磨牙远中与平面1相垂直作为平面5,二者角分线为平面3,平面1和3,3和5的角分线分别为平面2和4,共5个平面,在每一平面测量颊侧骨髓腔的宽度。以问卷的形式描述术后下牙槽神经分布区域的感觉改变。测量结果 采用SPSS13.0软件包进行统计学分析。用卡方检验评价骨髓腔宽度和术后NSD之间的关系。结果 颊侧骨髓腔宽度左右两侧无显著性差异(t=-0.871,P=0.384),其宽度的总体变化没有规律,在3、4层面距离最小,各层之间差异有显著性(F=2.795,P=0.017)。颊侧骨髓腔缺如(接触和融合型),在3和4层面出现几率较高。颊侧骨髓腔宽度为0的27侧100%发生术后NSD。未接触组63侧有14.3%发生术后NSD,两组间差异有显著性(χ2=25.941,P<0.05)。结论 颊侧骨髓腔的宽度是术后NSD的风险因子,当下颌管和颊侧骨皮质之间的骨髓腔宽度是0.9mm或更小时,NSD更容易发生,当颊侧骨髓腔缺失时,从外侧骨皮质中分离下牙槽神经十分困难。