沉默mGluR5对卵巢癌SKOV3细胞生物学特性的影响及其机制研究

目的 探讨小干扰RNA（siRNA）靶向代谢型谷氨酸受体5（mGluR5）对卵巢癌SKOV3细胞增殖、凋亡和迁移能力的影响及可能的机制。方法 采用靶向mGluR5表达的特异siRNA 转染卵巢癌SKOV3细胞（转染组）,同时设置转染无义序列的阴性对照组。转染48 h,采用实时荧光定量PCR（QPCR）检测siRNA对mGluR5的沉默效果;采用CCK-8法、EdU细胞荧光染色实验、Hoechst 33342细胞染色实验、划痕实验检测沉默mGluR5表达后SKOV3细胞的活性、增殖、凋亡和迁移情况;采用Western blotting检测PTEN／Akt信号通路相关蛋白的表达情况。结果 QPCR检测显示,转染组中mGluR5 mRNA的表达水平降至（18.3±2.3）％,显著低于阴性对照组（P＜0.05）。CCK-8法检测显示,转染72 h阴性对照组的吸光值为4.1±0.2,高于转染组的2.4±0.3（P＜0.05）。EdU免疫荧光染色实验显示,转染48 h阴性对照组的细胞增殖率为（22.4±2.3）％,高于转染组的（9.2±1.2）％（P＜0.05）。Hoechst 33342细胞染色实验显示,转染48 h阴性对照组的细胞凋亡率为（6.2±1.3）％,低于转染组的（28.2±2.2）％（P＜0.05）。划痕实验显示,阴性对照组的相对划痕愈合比例为（100.0±2.1）％,显著高于转染组的（48.6±4.3）％（P＜0.05）。Western blotting检测显示,转染组PTEN蛋白的表达增加,p-Akt蛋白的表达降低（P＜0.05）;而Akt蛋白无明显变化（P＞0.05）。结论 沉默mGluR5表达能显著抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖,促进凋亡,降低细胞迁移能力,该过程可能与激活PTEN／Akt信号通路有关。     

反应性P(St-BA-VBT)/染料复合纳米球的制备

用活性红195对聚（苯乙烯(St)-丙烯酸丁酯(BA)-对乙烯基苄基三甲基氯化铵(VBT)）纳米球进行染色,制得具有反应性的P(St-BA-VBT)/染料复合纳米球。通过扫描电镜（SEM）、纳米粒度和Zeta电位分析仪等对纳米球进行表征,并探索了染料用量、染色温度、染色时间、染液pH对纳米球上染料吸附量的影响。结果表明,P(St-BA-VBT)/染料复合纳米球表面光滑、粒径均一,与未染色纳米球相比,粒径增加了12.8 nm;Zeta电位由56.7 mV降低至-38.6 mV。随着染料用量的增加、染色温度的升高、染色时间的延长、染液pH的降低,纳米球上的染料吸附量增加;当染料质量为纳米球质量的5.25%,染色温度为65 °C,染色时间为90 min时,纳米球上染料吸附量达到饱和。     

B细胞非霍奇金淋巴瘤TCR基因重排及CDR3谱型分析

 目的　分析B细胞淋巴瘤穿刺标本中T细胞受体（TCR）β链克隆性基因重排及互补决定区3（CDR3）谱型。方法　应用RT-PCR扩增TCR Vβ24个亚家族的CDR3区基因,并经基因扫描确定T细胞克隆性,对提示单克隆或寡克隆增生亚家族的PCR产物进行测序。结果　3例淋巴瘤患者TCR存在限制性取用,仅表达2～5个Vβ亚家族。所有患者均存在克隆性增生T细胞,增生形式包括寡克隆及寡克隆增生趋势。CDR3区序列分析证实增生的T细胞克隆具有不同的氨基酸序列。结论　B细胞淋巴瘤患者存在T细胞克隆性增生,其TCR Vβ呈限制性取用,不同克隆T细胞的CDR3序列不同。     

乳腺癌患者T细胞受体基因重排及CDR3区序列分析

 目的　分析乳腺癌转移淋巴结穿刺标本中T细胞受体（TCR）β链克隆性基因重排及互补决定区3（CDR3）区序列。方法　应用RT-PCR扩增2例反应性增生淋巴结及3例乳腺癌转移淋巴结T细胞24个TCR Vβ亚家族的CDR3基因,并经基因扫描确定T细胞克隆性,对提示单克隆或寡克隆增生亚家族的PCR产物进行测序。结果　乳腺癌转移淋巴结T细胞中TCR存在限制性取用,仅表达3～5个Vβ亚家族。增生的T细胞存在克隆性特点,增生形式包括寡克隆及多克隆。CDR3区序列分析证实增生的T细胞克隆具有不同的氨基酸序列。结论　乳腺癌转移淋巴结中存在T细胞克隆性增生,其TCR Vβ呈限制性取用,不同T细胞克隆的CDR3序列不同。     

MDM2 Bcl-2 AR的表达与脑膜瘤病理类型的关系

目的探讨MDM2、Bcl-2、雄激素受体(AR)的表达与脑膜瘤病理类型的关系,为脑膜瘤临床诊疗提供参考依据。方法选取郑州大学附属肿瘤医院病理科2012-02—2014-06收治的90例已经证实的脑膜瘤患者标本作为研究对象,将90例蜡块每份作3张切片,通过免疫组化染色法检测MDM2、Bcl-2、AR的表达。结果 MDM2的表达呈现一定的梯度效果,其中Ⅲ级脑膜瘤、Ⅱ级脑膜瘤、Ⅰ级脑膜瘤阳性表达率分别为10.0%、54.5%、56.9%,对比差异无统计学意义(P0.05);Bcl-2的表达也呈现一定的梯度,Ⅲ级脑膜瘤、Ⅱ级脑膜瘤、Ⅰ级脑膜瘤阳性表达率分别为40.0%、45.5%、51.7%,对比差异无统计学意义(P0.05);AR的表达在不同病理类型脑膜瘤中的阳性表达率梯度最为明显,Ⅲ级脑膜瘤、Ⅱ级脑膜瘤、Ⅰ级脑膜瘤阳性表达率分别为70.0%、54.5%、29.3%,经Chi-Square检验分析其对比差异具有统计学意义(P0.05)。结论 AR表达与脑膜瘤的病理级别分型明显相关,临床实践中要意识到其对瘤细胞增殖作用的重要性,可将其作为预后效果评估指标。     

乳腺癌淋巴结微转移患者克隆性T细胞TCRα链CDR3谱型分析

目的 分析乳腺癌微转移淋巴结T细胞克隆性增生及TCR α链谱型偏移情况,了解抗肿瘤T细胞克隆的分子特征。方法 利用RT-PCR扩增10例乳腺癌微转移淋巴结T细胞32个TCR可变区（AV）亚家族的基因,基因扫描检测T细胞克隆性及TCR AV亚家族取用情况,对单克隆家族行PCR扩增TCR α链全长序列,构建重组质粒后测序,分析互补决定区（CDR3）序列。结果 乳腺癌淋巴结微转移患者T细胞呈单、寡克隆、寡克隆趋势和多克隆增生,不同患者表达1～4个TCR AV亚家族。克隆性T细胞的CDR3氨基酸序列不同,但是病例4和病例8含有相同的CDR3氨基酸基序：AM和DDKII。结论 乳腺癌TCR AV基因表达具有多样性特点,TCR AV家族的取用可能与乳腺癌肿瘤抗原的多样性和不同个体的免疫应答反应有关。相同CDR3氨基酸基序的发现可能对乳腺癌的T细胞介导免疫治疗提供帮助。     

放射性~(125)I粒子对家兔正常门静脉早期放射性损伤的实验研究

目的研究不同剂量放射性125I粒子植入不同时间对家兔正常门静脉的早期放射性损伤。方法将48只家兔随机分为对照组和实验组,实验组正常门静脉表面分别植入80、120、160Gy125I粒子,对照组正常门静脉表面植入空源粒子。于粒子植入30、60d观察家兔的一般情况、白细胞计数、大体、光镜及电镜的变化。结果实验组无溃疡、穿孔、出血、死亡等严重并发症。光镜下实验各组粒子植入后血管壁损伤主要为内皮改变及肌层水肿,损伤程度根据schmidt标准改进评分,实验组各组间粒子植入后30d和60d损伤程度评分差异有统计学意义(F=192.67,P=0.000;F=294.19,P=0.000);粒子植入后30d和60d实验组各组内Schmidt评分差异有统计学意义(P0.05)。电镜结果 :损伤主要表现为内膜层线粒体、粗面内质网及吞饮小泡改变,且随剂量的增加和时间的延长加重。粒子植入前后不同时间对照组和实验组白细胞计数差异均无统计学意义(P0.05)。结论 125I粒子植入门静脉,在剂量为80～160Gy门静脉损伤轻微,主要在内皮层和肌层,且随时间的延长和剂量的增加损伤程度加重,但损伤深度未见增加。     

125I粒子平面布源剂量学研究

目的 探讨同活度、同数量125I粒子单平面不同排列的剂量学效应.方法 利用计算机三维治疗计划系统（3D-TPS）模拟9颗2.035×107Bq125I粒子的9种分布模式：按粒子排列间距（以x轴、y轴方向计,单位为cm）分x0.5、y0.5,x0.5、y1.0,x0.5、y1.5,x1.0、y1.0,x1.0、y1.5,x1.5、y1.5,x0.5、y0.5（2）1.0（即第1,3列粒子y向间距0.5 cm,第2列粒子间距y向1.0 cm）,x0.5、y1.0（2）0.5（即第1,3列粒子y向间距1.0cm,第2列粒子y向间距0.5 cm）,x1.0、y1.0（2）0.5（即第1,3列粒子y向间距1.0 cm,第2列粒子y向间距0.5 cm）.用专业图像分析软件计算出40,80,130,145和200 Gy剂量分布曲线及曲线包含的面积、长径、短径,再用公式计算：单位面积的医疗费用=（单颗粒子价格＋单颗粒子手术费）×粒子数/等剂量曲线包含面积.结果 粒子不同分布时相同等剂量曲线包含的面积、长径、短径和单位面积的医疗费用存在差异.40,80,130,145和200 Gy等剂量曲线内面积最大的粒子排列分别为：x1.5、y1.5,x1.0、y1.0,x1.0、y1.0,x0.5、y1.0,x0.5、y1.0,对应的面积分别为：1672.31,849.08,524.50,481.20和350.92 mm2.结论 同活度、同数量125I粒子的不同分布模式直接影响周边剂量.     

microRNA-92a的表达及其与胃癌病理特征的关联

目的 探讨microRNA-92a(miRNA-92a)在胃癌中的表达及其与患者临床病理特征的关系.方法 选取胃癌患者80例,取胃癌组织及距离癌边缘5 cm的正常黏膜组织(癌旁正常组织),qRT-PCR检测miRNA-92a在不同组织中的表达,分析miRNA-92a与胃癌患者临床病理特征的关系.结果 胃癌组织中miRNA-92a相对表达量为(0.72±0.11),明显高于癌旁正常组织的(0.36±0.07)(P﹤0.01).miRNA-92a的相对表达与胃癌患者的肿瘤分化程度、淋巴结转移情况及TNM分期有关(P﹤0.05).miRNA-92a高表达组患者的中位生存期为(18.55±11.39)个月,低于低表达组患者的(23.62±10.60)个月(P﹤0.05).结论 miRNA-92a在胃癌患者中呈高表达,与胃癌患者的淋巴结转移、TNM分期、肿瘤分化程度及临床预后有关.     

补肾逐瘀方治疗子宫肌瘤的机理探讨

目的:补肾逐瘀方治疗子宫肌瘤。方法:采用口服自拟中药补肾逐瘀方(熟地、山药、山萸肉、寄生、川断、柴胡、怀牛膝、菟丝子、当归、川芎、赤芍、红花、益母草、三棱、莪术等)加减为主,治疗子宫肌瘤。结果:在患者的症状改善情况,子宫肌瘤缩小的情况等方面都有了一定的效果,值得临床推广。结论:中医治疗子宫肌瘤的疗法是一种效果不错的方法,值得推广应用。