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目的 探讨牛磺酸对高温处理后神经上皮细胞存活和分化的作用。 方法 取孕12.5d小鼠胚胎神经管上皮细胞进行原代培养,将其分为正常对照组、高温组和牛磺酸保护Ⅰ、Ⅱ组。显微镜下观察细胞的形态学变化,用四甲基偶氮唑盐(MTT)自动比色法测定细胞增殖活性,二脒基苯基吲哚(DAPI)染色法测定细胞凋亡率,免疫荧光法检测细胞中Caspase-3、微管相关蛋白-2(MAP-2)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。 结果 与正常对照组比较,高温组细胞增殖活性明显降低,细胞凋亡率明显升高,Caspase-3阳性细胞数明显增多,MAP-2阳性细胞数明显减少;与高温组比较,牛磺酸保护Ⅰ、Ⅱ组细胞活性显著升高,凋亡率显著降低,Caspase-3阳性细胞数明显减少,MAP-2表达明显增多;4个组比较,GFAP的表达差异无显著性。 结论 牛磺酸对高温处理后神经管上皮细胞的存活具有保护作用,并可能促进其向神经元方向分化。 相似文献
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小鼠IL-17A-GST融合蛋白的克隆表达 总被引:1,自引:1,他引:0
目的: 构建含有小鼠IL-17A(mIL-17A)基因的重组原核表达载体,获得高效表达mIL-17A 的基因工程菌,以及较高产量的mIL-17A蛋白.方法:以PMA 活化后小鼠脾脏单个核细胞的总RNA 逆转录合成的cDNA为模板,PCR 法扩增mIL-17A的编码序列,并分别亚克隆至pMD18-T 载体和原核表达载体pGEX-4T-1 中,经酶切和DNA测序鉴定后,转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,产物经SDS-PAGE及Western blot鉴定.结果:PCR 产物大小及其双酶切鉴定均证明所克隆的基因是mIL-17A,DNA 序列测定进一步证实与GenBank 报道的序列完全一致成功构建了重组原核表达载体pGEX-4T-1/mIL-17A,并在大肠杆菌中高效表达出相对分子质量(Mr)约40 000的具有可溶性的融合蛋白,且Western blot证实确为目的蛋白结论: 成功构建了基因重组体pGEX-4T-1/mIL-17A;并制备出可溶性IL-17A-GST融合蛋白. E3),IPTG诱导表达,产物经SDS-PAGE及Western blot鉴定.结果:PCR 产物大小及其双酶 鉴定均证明所克隆的基因是mIL-17A,DNA 序列测定进一步证实与GenBank 报道的序列完全一致成功构建了重组原核表达载体pGEX-4T-1/mIL-17A,并在大肠杆菌中高效表达出相对分子质量(Mr)约40 000的具有可溶性的融合蛋白,且Western blot证实确为目的蛋白结论: 成功构建了基因重组体pGEX-4T-1/mIL-17A;并制备出 相似文献
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目的 检测胰岛素样生长因子II(IGF-II)在多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵巢颗粒细胞中的表达水平及与促排卵结局的相关性。 方法 采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测42例 PCOS正常反应患者(PCOS正常反应组)、42例PCOS高反应患者(PCOS高反应组)及90例对照组(因输卵管或男方因素助孕者)颗粒细胞中IGF-II的表达,对比分析各组IGF-II的表达及促排卵相关参数的差异,并进行关联性分析。 结果 IGF-II在对照组、PCOS正常反应组和PCOS高反应组相对表达量的中位数分别为1.3(0.5~1.8)、1.7(1.4~2.2)及3.2(2.5~4.3),3组间比较差异有统计学意义(F=88.7, P<0.001),其中PCOS正常反应组和PCOS高反应组均高于对照组(P均<0.001),PCOS高反应组高于PCOS正常反应组(P<0.001)。在PCOS高反应组,注射人绒毛膜促性腺素(HCG)日雌二醇(E2)、直径≥14 mm的卵泡数、获卵数、2原核受精卵(2PN)数、优质胚胎数、卵裂数及可移植胚胎数均高于对照组及PCOS正常反应组,差异有统计学意义(P均<0.05),HCG日黄体生成素(LH)、获卵率、受精率及可利用卵子率均低于对照组和PCOS正常反应组(P均<0.05);在PCOS正常反应组,促性腺激素(Gn)总量(P=0.02)及E2值(P<0.001)均低于对照组。相关性分析结果显示,颗粒细胞上IGF-II的相对表达量与HCG日E2值(r=0.163, P=0.032)、HCG日≥14 mm的卵泡数(r=0.286, P<0.001)、2PN数(r=0.246, P<0.001)、卵裂数(r=0.296, P<0.001)、优质胚胎数(r=0.286, P<0.001)、获卵数(r=0.386, P<0.001)、可移植胚胎数(r=0.252, P<0.001)及优质胚胎率(r=0.155, P=0.041)呈正相关;多重线性回归分析结果显示,PCOS患者颗粒细胞上IGF-II的相对表达量与获卵数(β=0.921, P<0.001)及优质胚胎率(β=0.285, P<0.001)呈正相关,与卵裂数(β=-0.283, P<0.001)呈负相关。 结论 IGF-II在接受辅助生殖技术治疗的PCOS患者颗粒细胞中高表达,与获卵数及优质胚胎率密切相关,有促进卵泡和早期胚胎发育的潜能。 相似文献
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目的利用已建立的基于动作捕捉的面部运动三维动态定量分析系统(3-D ASFM)定量分析正常人面部运动,比较面部对称性,为进一步客观评估面瘫患者面肌功能提供参考。方法无偿招募28名志愿者。标记观察点,利用基于动作捕捉的面部运动三维动态定量分析系统进行面部的静态及动态采集、重建及分析。比较受试者面部静态及动态双侧差异。结果面部存在不对称性,虽然所纳入的受试者均为右利手,但统计结果未发现面部运动的优势侧,同一个体面部不同区域活动优势侧并不一致。静态指标中除双侧鼻小柱—鼻翼距离存在统计学差异外,其余面部静态指标无显著性差异。动态测量呲牙动作时,左右口角最大移动距离具有统计学差异(P<0.05),左侧移动距离较右侧平均多1.23mm。余指标未发现统计学差异。结论证实面部不对称性普遍存在,人群中不存在面部运动半侧优势。 相似文献
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目的 了解在校医学生对全科医学的认知状况,探讨开展全科医学教育的必要性.方法 以本校临床医学系和护理系在校专科生作为抽样调查对象,自行设计并发放问卷,对不同专业医学生对全科医学的学习意愿、对全科医师择业意愿等进行调查并进行描述性统计学分析.结果 超过半数的学生认为在校学习期间有必要开设全科医学教育课程;临床专业94.60%的学生赞成设置全科医学培养方向,护理专业只有53.92%的学生持支持态度;临床专业有56.44%的学生可以接受到农村社区就业,而护理专业只有41.18%的学生愿意到农村社区.结论 大多数在校医学生择业方向明确,认为有必要接受全科医学教育;建议政府出台相关政策吸引更多医学生加入全科医师行列. 相似文献
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[摘 要] 目的:探讨牡蛎提取液在高温所致神经干细胞凋亡中的保护作用。方法:取孕13天小鼠胚胎大脑皮层细胞培养,采用免疫荧光法检测巢蛋白(nestin)的表达以鉴定神经干细胞,将培养3代的神经干细胞随机分为4组:正常对照组(对照组Ⅰ)和牡蛎保护组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ(分别加入浓度是2.5mg/ml、5mg/ml、10mg/ml的牡蛎提取液),同时设立培养液对照组(对照组Ⅱ,其中无细胞)、培养液+牡蛎提取液对照组(对照组Ⅲ,其中无细胞),各牡蛎保护组及对照组均经过高温处理。用MTT法检测神经干细胞的增殖活性,用蛋白质印迹方法检测神经干细胞凋亡相关蛋白p53的表达。结果:①原代和传代培养的神经球中,均有细胞表达nestin抗原。②)牡蛎保护组Ⅱ(0.9410±0.0442)和牡蛎保护组Ⅲ(0.9914±0.0562)中细胞的MTT值明显高于对照组Ⅰ(0.8773±0.0416)。③与对照组Ⅰ相比,牡蛎保护组Ⅱ和牡蛎保护组Ⅲ中p53的表达明显下降。结论:牡蛎提取液对高温所致神经干细胞的凋亡具有一定的保护作用。 相似文献
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组织学与胚胎学是高等医学院校重要的基础医学学科,也是学习其他机能性学科和临床学科不可或缺的课程,而在组织学与胚胎学的教学中,实验课占有1/2~1/3的学时,因此,搞好实验教学,对于提高教学质量和培养学生的基本素质至关重要.现代高等教育理念认为,教师在教学过程中的作用和活动方式主要是"导学",也就是要根据学生的学习心理、认识规律、思维流程,正确地引导学生达到教学目标的要求[1].正是基于这种理念,为了培养基础扎实、动手能力强,具备独立思考能力、创新能力及团结协作能力的高素质人才,本室将教学内容、教学方法与素质教育有机地结合起来,对组织学与胚胎学的实验教学进行了改革与探索,采用"学生自主授课法"进行教学,现报道如下. 相似文献
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目的探讨侧卧位"Φ"字切除法在经皮肾镜等离子肾囊肿去顶术中的效果。 方法回顾性分析2017年2月至2021年5月在厦门大学附属东南医院泌尿外科手术治疗的31例背侧肾囊肿患者资料。手术取侧卧位,彩超引导穿刺针刺入囊肿腔内,置导丝,退针,置入22 F剥皮鞘及经皮肾镜,探查囊腔是否与肾盂相通并辨识囊壁与肾实质的交界线,置入等离子电极,分别向12及6点钟方向切割囊壁至交界或囊壁增厚处;自6点钟沿交界线附近向左弧形挑拨切割至12点方向,同法切割右侧囊壁,总体切割路径呈"Φ"字型。不进一步游离囊壁,以穿刺点左侧囊壁为钳夹部位,边旋转边将左半边囊壁牵拉出体外,同法处理右侧。检查有无出血,必要时电凝止血。留置引流管退鞘。术后复查囊肿腔较术前缩小50%以上为有效。 结果1例术中修正诊断为肾盏憩室,余30例患者手术均按计划完成,手术时间15~52 min,无并发症。随访3~12个月,未见明显复发。 结论经皮肾镜等离子肾囊肿去顶术治疗背侧单纯性肾囊肿的过程中采用侧卧位改良"Φ"字切除法安全、有效,便于麻醉管理,可完整取出手术标本。 相似文献