维生素B 6和丰诺安对X射线辐照小鼠外周血细胞的保护作用及意义

目的观察维生素B₆和丰诺安(20AA复方氨基酸)对X射线辐照小鼠外周血细胞的保护作用。 方法将小鼠随机分为对照组、模型组、维生素B₆组、丰诺安组和联合组。除对照组外，其余4组小鼠均接受X线照射。从照射前4 d开始至照射后第10天，对照组和模型组腹腔注射等渗盐水，维生素B₆组、丰诺安组和联合组分别腹腔注射维生素B₆、丰诺安、以及维生素B₆和丰诺安的混合液，照射后第11天处死小鼠，检测小鼠血常规和外周血淋巴细胞亚群。 结果与对照组相比，X线照射小鼠外周血白细胞总数、中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、红细胞、血小板、自然杀伤(natural killer cell，NK)细胞、总T细胞、CD4^＋和CD8^＋ T细胞数量和血红蛋白浓度均显著降低(P<0.05)；CD4/CD8比值升高(P<0.05)；丰诺安、维生素B₆和混合液均可显著提高X线照射小鼠的白细胞总数、淋巴细胞、血小板、NK细胞、B细胞、总T细胞、CD4^＋和CD8^＋ T细胞数量(P<0.05)；混合液在提高总T细胞数量[(41.94%±10.90%)比(32.14%±5.86%)]和CD4^＋ T细胞数量[(33.11%±10.00%)比(25.01%±4.64%)]效果上优于维生素B₆(P<0.05)，在提高白细胞总数[(6.3±0.6)×10⁹/L比(3.7±0.5)×10⁹/L]和淋巴细胞数量[(5.3±0.4)×10⁹/L比(3.4±0.3)×10⁹/L]效果上优于丰诺安组(P<0.05)。 结论维生素B₆和丰诺安对X射线辐照小鼠外周血细胞具有保护作用，维生素B₆和丰诺安联合应用优于单一应用。     

模拟失重抑制荷黑素瘤小鼠的T淋巴细胞抗肿瘤免疫功能

目的 研究模拟失重对小鼠T淋巴细胞抗肿瘤免疫功能的影响.方法 小鼠右后肢皮下注射B16细胞建立移植性恶性黑素瘤模型,采用头低位-15°～20°尾吊小鼠模拟失重模型.观察模拟失重对荷瘤小鼠肿瘤体积和生存时间的影响;采用全自动血细胞分析仪和流式细胞仪分别检测模拟失重条件下荷瘤小鼠外周血白细胞、淋巴细胞的变化和T淋巴细胞亚群的变化;采用ELISA法和LDH释放法分别检测模拟失重对肿瘤细胞诱导T淋巴细胞产生IL-2、TNF-α、IFN-γ的水平和肿瘤特异性CTL对肿瘤细胞杀伤活性的影响.结果 与对照组相比,模拟失重组荷瘤小鼠肿瘤生长速度加快,生存期缩短,外周血淋巴细胞总数降低,淋巴细胞比例降低,CD3+、CD4 +/CD3+、CD8+/CD3+T淋巴细胞所占比例降低,丝裂原诱导的脾脏T淋巴细胞增殖能力降低(P＜0.05或P＜0.01).模拟失重条件下,肿瘤细胞诱导产生的细胞因子IL-2、IFN-γ和TNF-α水平降低,肿瘤特异性CTL对肿瘤细胞的杀伤活性降低(P＜0.05或P＜0.01).结论 模拟失重抑制小鼠T淋巴细胞抗肿瘤免疫功能.     

尾悬吊模拟失重大鼠卵巢组织中缺氧诱导因子-1α表达变化

目的 研究模拟失重环境下大鼠卵巢组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达变化.方法 取性成熟期健康雌性Wistar大鼠60只作为研究对象,体重200±20g,随机分为10组(n=6),按模拟失重时相分为悬吊0.25、0.5、1、2、3、5、7、14、21d组和0d组(对照组).采用尾悬吊法建立模拟失重动物模型.各组大鼠卵巢组织中HIF-1 α的表达分别应用免疫组织化学和RT-PCR方法进行检测.结果 各实验组及对照组大鼠卵巢卵泡卵母细胞、颗粒细胞和膜细胞中均可见HIF-1α阳性染色细胞.对照组大鼠卵巢HIF-1 α染色阳性颗粒主要位于细胞质中,悬吊0.25d和0.5d组大鼠卵巢卵母细胞、颗粒细胞和膜细胞的HIF-1α颗粒由细胞质向细胞核转移;尾悬吊1d组HIF-1 α表达情况与对照组接近,HIF-1α核染色消失.尾悬吊0.25d、0.5d大鼠卵巢HIF-1α mRNA表达水平显著高于对照组(P＜0.05),持续尾悬吊1d以后各组卵巢HIF-1α的蛋白和mRNA水平逐渐恢复至对照组水平.结论 尾悬吊模拟失重使大鼠卵巢组织中HIF-1α蛋白及mRNA表达发生明显变化,早期同步过表达,提示卵巢HIF-1α表达变化与失重应激反应和失重耐受有密切关系.     

成骨生长肽（OGP10-14 )在不同微重力条件下生物学活性的研究

目的 成骨生长肽(osteogenic growth peptide,OGP10-14)在不同重力条件下对成骨细胞增殖、分化的影响.方法 利用MTT实验和alkaline phosphatase(ALP)实验分别测定OGP10-14在不同重力条件下对成骨细胞的增殖、分化效应.结果 在正常条件下,10-12 mol/L及10-8 mol/L OGP10-14能够显著促进成骨细胞的增殖(P<0.05),最大效应浓度是10-12 mol/L,而且10-12 mol/L 的OGP10-14显著促进成骨细胞的ALP活性.在微重力条件下,10-8mol/L OGP10-14诱导48h后,促进细胞增殖作用最强.结论 在不同重力条件下,10-8mol/L OGP10-14对成骨细胞的增殖与分化具有促进作用.在正常条件下,10-12 mol/L 的OGP10-14显著促进成骨细胞的ALP活性.     

雷奈酸锶在模拟微重力环境对成骨细胞增殖功能的影响

目的 观察新型的抗骨质疏松药雷奈酸锶在模拟微重力环境下对成骨细胞增殖功能的影响.方法 利用沿水平轴连续回转(30 r/min)细胞培养系统模拟微重力环境,使用MTT比色法或台盼兰染色、细胞计数法观察小鼠成骨样细胞MC3T3-E1的增殖情况.结果 模拟微重力环境可以降低MC3T3-E1增殖功能,雷奈酸锶在模拟微重力环境可以增强MC3T3-E1增殖功能.结论 在模拟微重力环境下雷奈酸锶对成骨细胞增殖功能具有保护作用,为雷奈酸锶治疗微重力环境骨量丢失提供了理论和实验证据.     

男性维生素D水平与血浆致动脉硬化指数关系的研究

目的探讨男性维生素D水平与血浆致动脉硬化指数之间的关系。方法选取2013年1月至2013年12月期间在解放军第306医院体检中心体检的男性934例,留取空腹静脉血,测定血清25-羟维生素D的水平;检测血清甘油三酯及高密度脂蛋白胆固醇,计算血浆致动脉硬化指数。分析25-羟维生素D水平与血浆致动脉硬化指数之间的关系。结果受试者25-羟维生素D水平为53.23±21.59 nmol/L,血浆致动脉硬化指数水平为0.10±0.30,两者呈明显的负相关(r=-0.10,P0.01)。维生素D缺乏组的血浆致动脉硬化指数明显高于维生素D正常组(0.13±0.30比0.08±0.29,P0.05)。血浆致动脉硬化指数异常组25-羟维生素D水平较血浆致动脉硬化指数正常组明显降低(51.35±21.06 nmol/L比54.66±21.90 nmol/L,P0.05)。结论男性维生素D水平与血浆致动脉硬化指数关系密切。因此,维持人体正常维生素D水平可能对预防动脉粥样硬化及相关疾病具有一定意义。     

mTERT启动子调控的CD80-SEA基因重组腺病毒载体的构建及在不同肿瘤细胞中的表达研究

[目的]构建小鼠端粒酶反转录酶(mTERT)启动子调控的葡萄球菌肠毒素A(SEA)和CD80基因共表达重组腺病毒载体,并观察其介导的SEA和CD80在小鼠肝癌细胞Hepa1-6、结肠癌细胞CT26、黑色素瘤细胞B16和成纤维细胞NIH3T3中的表达情况。[方法]采用AdEasy腺病毒体系,亚克隆mTERT核心启动子区至穿梭质粒pShuttle2,并在其上游插入myc-Max反应元件MMRE,用来调控SEA及CD80基因的表达,构建SEA和CD80基因共表达重组腺病毒载体Ad-MMRE-mTERT-BIS,转化Ad293细胞制备病毒并纯化,然后将病毒以感染复数为100的浓度分别感染上述四种细胞。采用免疫荧光染色法及流式细胞术检测SEA和CD80在细胞膜表面的表达情况。[结果]以感染复数为100病毒量感染上述细胞后,CD80和SEA的不同肿瘤细胞上表达率不同,而病毒感染的NIH3T3细胞不表达SEA和CD80。[结论]成功地构建了mTERT启动子调控的SEA和CD80基因共表达重组腺病毒载体,能够调控SEA和CD80基因在不同肿瘤细胞中的靶向表达,但表达效率有所不同。为进一步采用同一腺病毒对不同肿瘤细胞的进行靶向基因治疗研究奠定了基础。     

凝血酶和PAR-1受体对成骨细胞白介素-6和成纤维细胞生长因子-2表达的影响

目的 探讨凝血酶对小鼠成骨细胞某些因子表达的调节作用.方法 使用小鼠颅骨的成骨细胞,通过荧光定量PCR方法 和人工合成的PAR-1或PAR-4特异性激活短肽了解受体介导的凝血酶对成骨细胞因子表达的影响.结果 凝血酶不影响成骨细胞转化生长因子、血小板生长因子A、胰岛素样生长因子-Ⅰ和-Ⅱ的表达,凝血酶和PAR-1 受体激活肽可以显著上调成骨细胞成纤维细胞生长因子-2 (FGF-2) 和白介素-6 (IL-6) 的表达,但对IL-6表达的调节作用,凝血酶远较PAR-1激活肽为强,而PAR-4特异性激活肽并不影响这两种因子的表达.结论 凝血酶可以促进小鼠成骨细胞FGF-2 和IL-6的表达,此作用可能是通过PAR-1和非PAR-1通路介导的,凝血酶对FGF-2表达的调节可能完全是由PAR-1 介导的,而凝血酶对IL-6表达的影响部分是由PAR-1 介导的,部分可能是由未知受体介导的.PAR-4并不参与介导凝血酶对FGF-2和IL-6 表达的调节作用.     

凝血酶对骨髓基质干细胞功能的影响

目的 探讨凝血酶对骨髓基质干细胞功能的影响.方法 小鼠骨髓基质干细胞取自于4周龄C57BL/6J小鼠双侧胫骨和股骨的新鲜骨髓,细胞增殖的检测采用5-溴-2-脱氧尿嘧啶嵌入测定试剂盒,细胞迁移的测定通过细胞计数法,细胞凋亡是根据4,6-二氨基-2-苯基吲哚所染细胞核形态的改变来辨认.结果 凝血酶可以促进骨髓基质干细胞剂量依赖性的增殖、抑制细胞的凋亡,但不影响细胞的迁移.结论 结果表明凝血酶对骨髓基质干细胞增殖和凋亡均有影响,这种影响可能有助于保障组织修复过程中所需的细胞的数量,这种功能可能是凝血酶在组织损伤修复过程中起保护作用.     

模拟失重对变异链球菌生长、产酸及合成胞外多糖的影响

目的观察模拟失重对变异链球菌生长、产酸及合成胞外多糖的影响,探讨模拟失重环境下变异链球菌的生物学效应。方法采用高截面纵横比容器(high aspect ratio vessel,HARV)建立模拟失重细菌培养模型,将变异链球菌分为正常对照组、模拟失重组,在2、4、6、8、10、12、16、20和24 h,比较其菌液的OD600nm吸光度值并绘制生长曲线;培养24 h后,测定p H值并分析p H变化;通过蒽酮法分析模拟失重对细菌合成水不溶性及水溶性胞外多糖的影响。结果与对照组相比,模拟失重组变异链球菌提前进入对数生长期,2、4、6、8、10、12 h的OD600nm值升高(P0.05);16、20、24 h的OD600nm值无明显变化(P0.05)。模拟失重条件下变异链球菌的产酸能力与对照组相比差异无统计学意义(P0.05),合成水不溶性及水溶性胞外多糖的能力较对照组有明显抑制(P0.05)。结论短期失重环境对变异链球菌生长及合成胞外多糖的能力有一定影响,其作用机理有待深入研究。