志贺菌全菌蛋白质双向电泳技术的建立

目的:建立针对志贺菌全菌蛋白质组学研究的双向电泳及其相关技术体系.方法:采用超声兼尿素-3-[(3-胆酰胺丙基)-乙二胺]-1-丙磺酸(CHAPS)-二硫苏糖醇(DTT)裂解法提取临床分离志贺菌全菌蛋白,利用固相pH梯度等电聚焦对全菌蛋白进行双向电泳,银染后获得的双向电泳图谱进行Image Master 2D Platinum软件分析,并对实验条件进行调整优化. 结果:成功构建了高重复性的志贺菌全菌蛋白质双向电泳图谱,共获得946±37个蛋白质斑点, pI值主要集中在4.94～7.23之间.结论:通过相关条件的调整优化提高了双向电泳的分辨率,为后续志贺菌蛋白质组学研究奠定了基础.     

幽门螺杆菌hpaA基因工程菌蛋白表达条件优化、纯化及其活性鉴定

目的:优化幽门螺杆菌hpaA基因工程菌(pMAL-c2X-hpaA-TB1)的表达条件,并对其表达产物进行纯化和免疫活性鉴定.方法:通过诱导表达实验了解不同诱导时机、诱导剂浓度、诱导时间对蛋白表达量的影响, 并应用SDS-PAGE方法对表达产物进行分析;Amyloss树脂预装柱对可溶性HpaA蛋白进行分离、纯化;对纯化后蛋白做Western blot实验鉴定免疫活性.结果:该工程菌培养2 h时加入异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)终浓度为0.3 mmol/L进行诱导4 h,目的蛋白表达量达到菌体总蛋白的30%以上;经纯化得到了较高纯度(＞90%)的目的蛋白,并具有良好的免疫活性.结论:建立了从TB1(pMAL-c2X-hpaA)可溶性表达产物中纯化高纯度rHpaA融合蛋白的方法,为进一步的动物实验和诊断性抗原的研制以及工程菌发酵、高效表达生产工艺的研究打下了基础.     

幽门螺杆菌超氧化物歧化酶基因克隆及表达

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)是一种可长期定植于人类胃粘膜的革兰阴性螺旋形微需氧菌,是慢性活动性胃炎的病原体。Hp感染是消化性溃疡、胃癌和胃粘膜相关淋巴组织瘤的重要危险因素^〔1〕。研究发现,Hp中超氧化物歧化酶(SOD)基因可能与细胞毒素相关基因A蛋白(Cytotoxin-associated gene A,CagA)存在着密切关系^〔2〕,而CagA是Hp重要的毒力因子之一^〔3-5〕。因此,本实验进行体外扩增sod基因并诱导表达、纯化SOD蛋白,为进一步研究sod基因、SOD蛋白在Hp致病中的作用提供参考依据。     

志贺菌诱导耐药相关基因序列分析

目的获取并分析志贺菌由抗生素诱导产生的耐多药相关基因序列。方法以志贺菌敏感株(Z23)和诱导株(YD)基因组DNA为模板,利用引物设计软件Primer 5.0根据已测得基因序列(Y16B3、Y16B8和Y16A11)设计引物,PCR扩增诱导耐多药相关基因并将相关基因克隆到pMD19-T载体上,测序并将结果在序列相似性搜索工具Blast上检索分析相关基因序列。结果Y16B3和Y16B8基因片段分别在诱导株中扩增出320和225 bp产物,在敏感株中未扩增出;而Y16A11基因片段在诱导株扩增出310 bp产物,在敏感株中扩增出554 bp产物,并且产物序列同源性极低。结论志贺菌在抗生素诱导下产生的耐多药株与敏感菌株比较,具有基因组差异。     

以人群为基础的食管癌高发区危险因素病例对照家系研究

目的 探讨食管癌高发区食管癌发生的危险因素,为食管癌的综合防治提供理论依据.方法 采用以人群为基础的病例一对照家系研究方法,在河南省食管痛高发区以匹配方式选择病例和对照家系各505户,家庭成员各1171名,进行以家庭为单位的问卷调查,应用单因素和多因素logistic回归模型分析食管癌危险因素.结果 病例组和对照组比较,食用炯熏食物[2.10%(36/1711),0.82%(14/1711);X2=9.82,P=0.00;OR=2.61,95%C/:1.40～4.85],常吃油炸食品[7.17%(66/921),3.91%(35/894);X2=9.13,P=0.00;OR=1.90,95%C/:1.24～2.89],常吃生硬食物[13.36%(123/921),8.95%(80/894);X2=8.87,P=0.03;OR=1.57,95%CI/:1.16～2.11],喜食热烫食物[20.05%(343/1711),15.20%(260/1711);X2=13.87,P=0.00;OR:1.40,95%C/:1.17～1.67],有精神刺激史[6.72%(115/1711),3.10%(53/1711);X2=24.06,P=0.00;OR=2.25,95%CI:1.62～3.14]和有E消化道不适症状[19.40%(332/1711),12.74%(218/1711);X2=28.15,P=0.00;OR=1.65,95%CI:1.37～1.99]等因素,是食管癌发生的危险因素.而进食速度较快则显示是保护因素[20.85%(192/921),25.14%(225/895);X2=4.73,P=0.03;OR=0.78,95%Cl:0.63～0.98].结论 食管癌发生是多因素综合作用所致,要从生活行为方式、环境因素、社会心理因素和生物遗传因素等多方面进行综合防治.     

河南省商丘地区农村居民高血压危险因素分析

目的调查河南省商丘地区农村居民高血压患病情况并分析其危险因素。方法以整群抽样法对商丘地区2个行政村18周岁及其以上常住居民816人,进行健康体检和高血压危险因素问卷调查;采用SAS软件进行单因素和多因素分析。结果总标化患病率52.38%。单因素分析显示年龄、文化水平、饮酒、体质指数(BMI)、腰臀比(WHR)、家族史等与高血压患病有关。经Logisti逐步回归分析显示,性别、年龄、体质指数、腰臀比、饮酒、高血压家族史为高血压患病危险因素,在调查中仅有5%的人知道高血压的诊断标准。结论此地区农村居民高血压患病率较高,应注重加强高血压防制知识宣传,从饮食及行为习惯等方面预防高血压。     

河南新乡县农村居民幽门螺杆菌感染调查

目的 了解河南省新乡县农村居民幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，lip）的感染情况，为预防Hp感染和Hp相关疾病的防治提供依据。方法 对河南省新乡县小冀镇有上消化道症状或有消化道疾病家族史者及其家庭成员1057人，采用酶联免疫吸附试验（ELIsA）法检测Hp-IgG抗体。应用SPSS10．0统计软件进行分析。结果 血清Hp抗体阳性率为77．22％，其中男性为78．16％，女性为76．57％，男女间差异无统计学意义。各年龄组Hp感染率经趋势Y0检验差异无统计学意义，以25岁～组感染率最高（85．21％）。195对配偶中，一方Hp阳性，其配偶Hp阳性率为92．81％；一方Hp阴性，另一方Hp阳性率为30．95％，差异有统计学意义（x^2=77．335，P〈0．01）。结论 新乡县农村居民Hp感染率很高，且有家庭聚集性。     

“四全照顾”在恶液质治疗中的作用

恶液质是一种以浪费型代谢为主的状态,多发生于肿瘤及其他重大慢性病,严重降低患者的生存率和生存质量。 虽然恶液质的研究一直在进展,但是到目前为止,其机制尚未阐明,尚且没有有效的手段可以彻底治愈恶液质。“四全照顾” 不仅是对患者身、心、灵的照顾,也是对患者从发病到去世的全程照顾;不仅包括对患者的照顾,还包括对其家属的关怀; 不仅由医生、护士进行疗护,心理师、营养师等人员也参与组成专业的照顾团队。恶液质具有不可逆的终末性质,为了提 高恶液质患者的生存质量,“四全照顾”需要被运用到恶液质的治疗中。“四全照顾”不仅能有效舒缓患者和家属的身心 痛苦和精神压力,而且具有深远的社会意义,有利于社会和谐、稳定。但是与此同时,“四全照顾”在我国的发展程度有限, 发展水平在世界上处于落后地位,一些现实问题如生命自主权的选择、有限的社会认可和政策支持,需要我们积极地去面 对和解决。本文就“四全照顾”在恶液质治疗中的作用做一综述,为“四全照顾”运用于恶液质治疗在我国的发展和推广 提供理论依据.     

自配褥疮液治疗深部褥疮的临床观察

在临床护理中，尽管我们对预防褥疮做了大量时工作，但截瘫、偏瘫等疾病仍不可避免地引起褥癌。我们自1999-1995年采用自行配制褥疮液湿敷患部治疗第Ⅱ期、第Ⅲ期耨疮息者11例，取得较理想的临床效果。此方法具有简便易行、费用低、愈合期时间短等优点。是治疗褥疮的一种较好方法。现将我们的治疗和护理体会报告如下。     

肺癌患者住院费用通径分析

目的探讨影响肺癌患者住院费用的影响因素,为控制肺癌住院费用的增长,制定卫生政策提供依据。方法对河南省某省级专科肿瘤医院8 127例肺癌患者的住院费用进行分析,采用通径分析的方法分析肺癌患者住院费用的影响因素。结果住院天数是住院费用的主要影响因素,职业和付费方式直接影响住院费用,手术与否、住院年份、有无伴随疾病、年龄和转归情况对住院费用不仅存在直接作用,而且存在间接作用。结论住院天数和转归情况是影响住院费用的主要因素,各部门应协同努力,采取综合措施,有效控制患者住院费用的快速增长。