基于慢病毒的SHARP-2特异的RNA干扰延长肾移植受者大鼠存活时间

Objective To investigate if rat enhancer of split- and hairy-related protein-2 (SHARP-2) short hairpin RNA interference (shRNAi) prolongs the survival time of rat kidney transplant recipients. Methods Gene recombinant procedures, transfection and co-transfection were carried out to introduce short hairpin RNA interference sequences target for SHARP-2 into 3rd generation self-inactivated lentiviral-ViraPower packaging mix. Limiting dilution method was used for viral titration. Real-time PCR was employed for quantification of gene expression. Rat kidney transplantation was utilized to investigate the effect of SHARP-2 gene silence on the recipient survival. Results A lentiviral-based shRNAi construct LV-SHARP-2iC showed 84% SHARP-2 gene silence efficiency in normal rat kidney cells. At multiplicity of infection 20, 57% T cells could be transfected by lentivirus with spinoculation method. In activated T cells, SHARP-2 g ene silence resulted in 61.3% and 68.7% reduction of intedeukin 2 (IL-2) and interferon γ (IFN-γ) gene expression. When donor kidney was perfused with 5×107 TU LV-SHARP-2iC, the median survival time prolonged for 4-5 days as compared to blank and scramble control groups. Conclusions A recombinant lentivirus LV-SHARP-2iC that effectively silence SHARP-2 gene expression is constructed successfully, leading to the inhibition of IL-2 and IFN-γ. LV-SHARP-2iC treatment can prolong the survival time of rat kidney transplant recipients.     

围手术期炎症标志物与术后认知功能障碍相关性的Meta分析

目的 应用询证医学方法系统评价围手术期炎症标志物水平与术后认知功能障碍（postoperative cognitive dysfunction, POCD）之间的相关性,为临床预测POCD的发生提供依据。 方法 检索PubMed、The Cochrane Library、EMBASE、ISI Web of Knowledge、Google Scholar、百度学术、CNKI数据库、维普数据库和万方医学网。文献检索时间从建库至2015年11月,查找对POCD及非POCD患者血清炎症标志物指标进行检测的相关病例对照研究,采用Review Manager 5.1、STATA12.0软件进行分析。采用随机效应模型,计算每项指标的标准化均数差（standardized mean difference, SMD）及95%CI。并对研究结果分别进行回归分析、发表偏倚检验、异质性检验。 结果 共有15项符合条件的研究被纳入。在POCD及非POCD患者术后血清炎症标志物浓度的比较中,POCD组患者血清有着更高浓度的S-100β蛋白［SMD（95%CI）：1.82（0.90~2.74）,P〈0.001,N（POCD/非POCD）=195/431,8篇研究］和IL-6［SMD（95%CI）：1.35（0.67~2.02）,P〈0.001,N（POCD/非POCD）=128/162,6篇研究］,但两组患者的神经元特异性烯醇化酶（neuron-specific enolase, NSE）、IL-1β、TNF-α浓度无显著增高（P〉0.05）。线性回归分析发现POCD患者和非POCD患者术后IL-6以及S-100β蛋白的SMD和POCD患者术前IL-6以及S-100β蛋白外周血浓度无显著正相关性。 结论 POCD的发生与术后外周血炎症标记物浓度有关,尤其与IL-6和S-100β密切相关;但是IL-6和S-100β蛋白的术前血清浓度不能作为术后是否发生POCD的预测指标。     

山刺玫果对D-半乳糖致衰小鼠心肌线粒体能量代谢的影响

山刺玫为蔷薇科蔷薇属植物,广泛分布于我国东北、华北、内蒙等地,果实具有治疗消化不良等功效.山刺玫果富含黄酮、维生素、有机硒等多种抗氧化营养成分〔1〕.实验表明,山刺玫果具除自由基〔2〕、抗衰老、防治心血管疾病等作用.     

经皮经肝胆道镜与经内镜乳头括约肌切开联合取出胆管巨大结石7例

胆道结石是一种较常见的疾病,绝大多数患者通过经内镜逆行胰胆管造影术（ERCP）及经内镜乳头括约肌切开术（EST）取石成功。但对于肝内胆管结石、胆总管巨大结石,单纯行ERCP及EST取石难以成功。2004年8月至2009年11月间我科有7例患者因胆总管巨大结石行ERCP及EST难以取石,后在超声引导下经皮经肝胆管穿刺引流术（PTBD）、探条扩张、胆道镜下液电碎石,再通过胆道镜及十二指肠镜联合取石,均获良好效果,现总结报道如下。     

多西他赛联合顺铂和氟尿嘧啶治疗晚期胃癌疗效观察

目的观察多西他赛联合顺铂、氟尿嘧啶(DCF方案)治疗晚期胃癌的疗效和不良反应。方法采用DCF方案治疗33例晚期胃癌患者。多西他赛75 mg/m2,d1;顺铂75 mg/m2,d1;氟尿嘧啶750 mg/m2,持续静脉滴注,d1~5,3周1个周期,至少2个周期。结果33例晚期胃癌中,完全缓解(CR)0例,部分缓解(PR)18例(54.5%),稳定(SD)8例(24.2%),进展(PD)7例(21.2%)。中位肿瘤进展时间为6.1个月(3.5~11.5个月),中位总生存期为11.2个月(6.0~14.5个月)。最常见的不良反应为骨髓抑制、消化道反应及可逆性体液潴留,不良反应多为Ⅰ~Ⅱ度,无Ⅳ度不良反应发生。骨髓抑制以白细胞减少为特点,血小板减少及贫血较轻。消化道反应主要表现为恶心呕吐、腹泻、便秘,无Ⅳ度腹泻发生。无治疗相关性死亡。结论DCF方案是治疗晚期胃癌安全有效的化疗方案。     

非甾体抗炎药致胃黏膜损伤53例临床观察

服用非甾体抗炎药(non-steroidal anti-inflammatory drug,NSMD)易致NSAID胃病,而长期低剂量(75～325 mg/d)服用非甾体抗炎药仍可导致胃黏膜损害.我院门诊和病房确诊的低剂量非甾体抗炎药所致的胃黏膜损伤病例53例,现报告如下.     

尼卡地平联合艾司洛尔预防气管导管拔管期心血管反应

目的观察尼卡地平和艾司洛尔联合用药对高血压冠心病患者气管导管拔管期间心血管反应的影响.方法选择36名口咽肿瘤术后带气管导管辅助或支持通气入ICU的高血压冠心病患者,随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三组.拔管前Ⅰ组(对照组) 静注生理盐水,Ⅱ组静注艾司洛尔1 mg/kg,Ⅲ组静注艾司洛尔1 mg/kg和尼卡地平10 μg/kg,记录所有患者给药前(基础值),拔管前,拔管时,拔管后5、10 min 心率(HR)、平均动脉压(MAP)和ECG的ST段变化,并计算HR和收缩压乘积(RPP).结果Ⅰ组患者出现明显心血管反应,拔管刺激时HR、MAP、RPP显著高于基础值(P<0.01);Ⅱ组和Ⅲ组无明显心血管反应,Ⅲ组拔管前及拔管时HR、MAP、RPP均较基础值低(P＜0.01),而Ⅱ组拔管前、拔管时的 MAP 较基础值无明显差异(P＞0.05).结论尼卡地平复合艾司洛尔,可以有效地控制高血压冠心病患者的气管导管拔管期心血管反应,且无显著副作用.     

新生儿缺氧缺血性心肌损害的心功能变化

新生儿窒息后心肌损害可表现为心功能异常.既往的研究大多局限于观察左心功能的变化[1],而对右心功能的研究很少.笔者采用反映左右心功能的超声心动图指标,对一组窒息新生儿进行对照研究,揭示了新生儿时期缺氧缺血性心肌损害的心功能状况.     

奥沙利铂联合5-氟尿嘧啶、醛氢叶酸钙每周方案治疗晚期胃癌的初步临床研究

目的 观察奥沙利铂联合5-氟尿嘧啶、醛氢叶酸钙（FOLFOX）每周方案治疗晚期胃癌疗效和不良反应。方法 FOLFOX每周方案治疗26例晚期胃癌病人。L-OHP50mg／m^2＋醛氢叶酸钙500mg／m^2，静脉滴注，2h＋5-氟尿嘧啶2000mg／m^2，持续静脉注射，48h，d1，d8，d15，d22，5wk1个周期，至少2个周期。结果 26例晚期胃癌中，完全缓解（CR）1例（3．9％），部分缓解（PR）13例（50．5％），稳定（SD）5例（19．2％），进展（PD）7例（26．9％），总有效率为53．8％。中位生存期11．5（8．0-14．5）mo，肿瘤中位进展时间6．5（3．5-10．5）mo。最常见的不良反应为骨髓抑制、消化道反应以及神经感觉障碍，多为Ⅰ-Ⅱ度，无Ⅳ度不良反应发生。骨髓抑制以轻中度贫血为特点，对白细胞及血小板抑制较轻。消化道反应主要表现为恶心呕吐和腹泻，Ⅲ度腹泻发生率为19．2％。神经感觉障碍是L-OHP最主要不良反应，发生率高达61．5％。化疗间歇期可缓解。结论 FOLFOX每周方案是治疗晚期胃癌安全有效的化疗方案。     

siRNA沉默膀胱癌肝素酶基因对T24细胞增殖及MMP-2表达的影响

目的研究siRNA干扰沉默膀胱癌肝素酶基因对T24细胞增殖及MMP-2表达的影响 方法体外化学合成肝素酶特异性小干扰RNA（siRNA），用脂质体2000转染至T24膀胱移行细胞癌细胞内，常规分为正常对照组、空白对照组、阴性对照组和转染实验组进行实验，用噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖情况，反转录聚合酶链法（RT-PCR）检测肝素酶基因的表达，免疫细胞化学方法检测MMP 2的表达。结果RNA干扰沉默T24膀胱移行细胞癌细胞肝素酶基因后，T24细胞增殖活力下降，三个不同干扰组细胞活力分别下降了(28.55±3.66)%、(27.20±3.25)%和(37.29±4.82)%。肝素酶mRNA表达下降，膀胱移行细胞癌细胞中MMP-2（明胶酶A）的表达亦明显下降（P均＜0.05）。结论RNA干扰肝素酶基因后，细胞活力及肝素酶mRNA表达水平下降并且明显抑制膀胱癌细胞中MMP-2的表达。