液相色谱法纯化牛血铜-锌超氧化物歧化酶

超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)广泛存在于生物体内,是一种新型的酶制剂,在抗衰老、抗肿瘤、防辐射以及自身免疫性疾病的治疗等方面具有广阔的应用前景,已受到生化界和医药界的极大关注。目前国内有不少单位开发该产品,但酶的比活一般在 3 000～12 000 U/mg蛋白。我们从牛血红细胞中提取SOD粗品,分别用常压和高效液相色谱(HPLC)纯化,得到了较高纯度的CU-Zn SOD,为SOD的基础研究及临床应用提供物质基础和纯化方法。     

影响DNA测序的因素及解决方法

全自动DNA测序以其快速、准确和读序长等优点得到广泛应用。美国PE公司373A型DNA测序仪以其模板用量小、测序长度长和无同位素污染等特点应用最多。我室于1995年引进该仪器，仪器专管共用，为全校测序数千份样品，测序成功率达90％。其中影响测序成败的因素很多，我们对其主要因素进行了综合比较分析，提出了一些可行的解决方法。     

流式细胞术细胞周期分析样品保存条件的研究

流式细胞术（ＦｌｏｗＣｙｔｏｍｅｔｒｙ,ＦＣＭ）是一种对单细胞自动定量分析的新技术,具有敏感性高、速度快、信息量大和统计学精度高等优点［１］,已在细胞生物学、肿瘤病理学和体细胞遗传学等众多领域得到了广泛应用［２］。在检测细胞周期的变化、ＤＮＡ含量及细胞凋亡等方面,ＦＣＭ可为细胞周期的动力学研究提供有力的分析手段。然而,在细胞周期分析过程中,由于受到实验设计方案和临床诸多因素的影响,采样与上机检测的时间往往不能紧密衔接,因此,集中检测样品实属必要。本研究旨在探索样品的固定时间和保存样品的实验条件,…     

多肽转移电泳时间探讨

转移电泳是将凝胶电泳分离的结果 ,通过电泳装置转移到固相支持物 (如硝酸纤维素膜 )上的一种电泳技术 ,可用于ＤＮＡ片断的分析 (Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ)、ＲＮＡ的分析 (Ｎｏｒｔｈ ｅｒｎｂｌｏｔ)和蛋白质的研究 (Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ)。由于转移到固相支持物上的样品可进行多种分析 ,且操作简便、灵敏度高和特异性强 ,目前广泛应用于生物化学、分子生物学和免疫学等研究领域。对低分子量蛋白质的转移电泳条件已趋成熟 ,且应用很多 ,而小分子多肽 (Ｍｒ在 2 5 0 0～ 16 0 0 0 )的转移电泳报道较少。又因在一定凝胶孔径下 ,Ｍｒ小…     

RP-HPLC制备葡萄糖醛酸苷酶前体药葡萄糖醛酸化表阿霉素及其代谢物

目的制备可被β-葡萄糖醛酸苷酶(βG)水解活化的表阿霉素(Epirubicin,Epi)及其代谢物. 方法 Epi代谢物(Epi治疗患者的尿液)经C18树脂初提富集并减压蒸溜浓缩后,用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)分离纯化代谢物组分,用MTT法分析βG对代谢物组分的激活杀伤作用. 结果经RP-HPLC洗脱分离,共得到6个组分(峰Ⅰ～峰Ⅵ),外标法证实第6组分(峰Ⅵ)为Epi. 细胞毒实验证实第1组分(峰Ⅰ)至第4组分(峰Ⅳ)均有βG激活杀伤作用. 结论 Epi代谢物第1至第4组分均可作为βG的前体药物.     

胃癌特异性转移因子诱导淋巴细胞表面IL-2受体表达

观察胃癌特异性转移因子对淋巴细胞进行诱导刺激后，淋巴细胞表面的ＩＬ－２受体表达的变化。方法应用流式细胞仪检测异硫氰基荧光素标记的淋巴细胞表面ＩＬ－２Ｒ抗体的荧光强度，以观察其受刺激前后表面ＩＬ－２Ｒ的表达。     

流式细胞术快速测定细胞活性

0　引言　细胞周期动力学研究和细胞凋亡的研究是目前生物医学领域的热门课题之一 [1 ] ,流式细胞术 (FCM)检测细胞周期和凋亡是其主要研究手段 [2 ] .FCM对细胞周期的分析方法已很成熟 ,但是我们在分析化学或物理因素对细胞周期的影响时 ,发现在 DNA直方图上出现 DNA含量较低的细胞峰 ,为确定该细胞峰的性质 ,鉴定细胞的活性 ,我们用 FCM法和台盼蓝染色法进行对比实验 ,建立了 FCM同时检测细胞周期和细胞活性的新方法 .1　材料和方法1.1　材料　所用设备包括 :EL ITE ESP型流式细胞仪 (美国Coulter公司 ) ,XD- 10 1型倒置显微…     

牙髓卟啉菌和牙龈卟啉菌外膜蛋白及膜泡的氨基酸组成分析

牙髓卟啉菌(Porphyromonas endodontalis,Pe)和牙龈卟啉菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)是牙髓病和牙周病的重要优势厌氧菌。 研究表明:Pe和Pg的外膜蛋白(outer membrane protein,OMP)和膜泡(vesicles,Ves)是非常重要的功能基团。为观察Pe,Pg中OMP和Ves的氨基酸组成及含量,为牙髓病、