不同龋敏感儿童变异链球菌临床分离株耐酸能力的实验研究

目的:比较不同龋敏感儿童口腔中变异链球菌临床分离株耐酸能力的差异。方法:以高龋、中龋和无龋儿童口腔中分离得到的变异链球菌为实验菌株,以ATCC25175国际标准株作对照,经常规复苏、增菌后,配制相同浓度的菌悬液,pH在7.0～6.0时各菌株间的耐酸能力无显著差异(P>0.05),而当pH在5.5～5.0时,分别在不同pH(以0.5为间隔,pH 4.0～7.0)的BHI液体培养基中培养48 h后,用紫外分光光度计在540 nm处测定吸光度,比较细菌的生长情况。结果:高、中龋病人口腔中分离出的变异链球菌临床分离株和国际标准菌株的耐酸能力明显高于无龋者口腔中分离出的变异链球菌,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:高龋儿童口腔中变异链球菌临床分离株具有高致龋性。     

表皮生长因子与碱性成纤维生长因子对人牙髓干细胞增殖的影响

目的：探讨表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)和碱性成纤维生长因子（basic fibroblast growth factor, bFGF）对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells, hDPSCs)增殖能力的影响。方法：采用噻唑蓝（MTT）比色法分别测定不同浓度EGF和bFGF在不同时间,单独或联合应用对hDPSCs增殖能力的影响。结果：50 ng/ml EGF和20 ng/ml bFGF促hDPSCs增殖能力最强。以50ng/ml EGF、20ng/ml bFGF单独或联合作用,其促hDPSCs增殖能力均具有时间依赖性,第3 d、5 d、7 d, EGF、bFGF促hDPSCs增殖作用显著增强,二种生长因子联合作用,促增殖作用显著高于其单独作用效果,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论：生长因子EGF和bFGF最大效应浓度分别为：50 ng/ml、20 ng/ml。EGF和bFGF单独作用均能显著促进hDPSCs的增殖,二者联合作用对hDPSCs的增殖有一定的协同作用。     

不同龋敏感儿童口腔变异链球菌不同基因型临床分离株产酸力的实验研究

目的比较不同龋敏感儿童口腔变异链球菌不同基因型临床分离株对蔗糖进行酵解产生有机酸的能力。方法从不同龋敏感的3~5岁学龄前儿童口腔变异链球菌中选取66株变异链球菌临床分离株,用气相色谱法测定高龋、中龋和无龋儿童口腔变异链球菌不同基因型临床分离株产生各有机酸的量。结果不同龋敏感儿童不同基因型变异链球菌临床分离株产生有机酸的量的差异有统计学意义（P<0.05）,同一龋敏感儿童变异链球菌携带不同基因型菌株产酸量的差异也有统计学意义（P<0.05）,携带基因型数目越多的菌株其产酸量越多。变异链球菌临床分离株产生乳酸、乙酸、甲酸的量的差异有统计学意义（P<0.05）,乳酸多于乙酸和甲酸。结论不同龋敏感儿童口腔变异链球菌不同基因型菌株产酸力不同,携带基因型数目越多的菌株其产酸力越强。     

不同龋敏感者口腔变形链球菌基因型与产酸性之间的关系

目的: 研究不同龋敏感者口腔变形链球菌基因型与产酸性的关系.方法: ①随机选取50例24～32岁的高龋、中龋及无龋者,取牙面菌斑样本接种于MS培养基上,每人随机挑取2～5株临床分离株,提取细菌染色体DNA,采用AP-PCR法对不同龋敏感者口腔变形链球菌临床分离株进行基因分型.②以pH 0.5为间隔配制pH 4.0～7.0系列的,含50 mg/L葡萄糖的MS液体培养基,对不同基因型口腔变形链球菌临床分离株进行厌氧培养48 h,用精密pH计检测培养基上清液的pH值.结果: ①14例高龋个体中有3例为1种基因型,5例有2种基因型,6例有3种基因型;9例中龋个体中有4例为一种基因型,3例有2种基因型,2例有3种基因型;13例无龋个体中有12例为1种基因型,1例有2种基因型.②不同基因型的变形链球菌培养基上清液的pH值进行统计学分析,发现基因型越多的细菌其产酸能力越强.结论: ①龋敏感越高的个体其口腔变形链球菌临床分离株基因型越多;②不同基因型的变形链球菌pH值的检测,基因型越多的细菌其产酸能力越强.     

基因芯片技术在变形链球菌分子生物学研究中的应用

基因芯片技术是近年来的一种新兴的分子生物学研究工具,用来分析基因的突变、多态性以及测序等;变形链球菌是人类主要致龋菌,定量检测和鉴别变形链球菌的种属类型和它们的相互关系,对龋病的防治具有重要意义.本文就基因芯片技术在口腔变形链球菌研究中的应用作一综述.     

不同条件下臭氧溶液对牙周致病菌的体外抑制作用

目的 探讨小型电解式臭氧机制备的臭氧溶液在不同条件下对3种牙周致病菌的体外抑制作用。方法 以碘量法检测臭氧机产生的臭氧溶液浓度,通过定量悬液杀菌法测定其在不同浓度(1.12、1.96、2.85 mg/L)、不同温度(10、15、20℃)下对牙龈卟啉单胞菌(P.g)、黏性放线菌(A.v)和具核梭杆菌(F.n)处理不同时间(30、60 s)后的菌落总数,分析其抑菌效果。结果 1.12、1.96、2.85 mg/L 3种浓度的臭氧溶液在不同温度及作用时间下对P.g、A.v和F.n均有不同程度的抑制作用(P<0.05);当温度相同时,作用浓度越高,抑菌效果越强。当温度为20℃、浓度为2.85 mg/L,作用30 s时对P.g抑制作用最强(82.35%),作用60 s时对F.n作用最强(86.36%);当温度为15℃、浓度为2.85 mg/L,作用60 s时对A.v抑菌作用最强(81.25%)。结论 小型电解式臭氧机所制备的3种不同浓度的臭氧溶液在不同温度下对3种牙周致病菌均有明显的抑菌效果,但抑菌敏感性不一致。     

表皮生长因子与碱性成纤维细胞生长因子对人牙髓干细胞分化的影响

目的探讨表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblastgrowth factor,bFGF)对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性的影响。方法确定EGF与bFGF最大效应浓度后,对细胞分组,根据EGF和bFGF单独或联合应用,分为4组:EGF组、bFGF组、EGF联合bFGF组、不加任何生长因子的对照组。作用1、3、5、7、14 d后,采用ALP活性检测法(酶动力法)检测hDPSCs细胞ALP活性。结果 1～14 d bFGF组ALP活性与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);在5、7、14 d,EGF组和EGF联合bFGF组ALP活性显著高于对照组(P<0.05);EGF联合bFGF组的ALP活性明显高于bFGF组(P<0.05),但EGF联合bFGF组ALP活性与EGF组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论 bFGF单独应用不能诱导hDPSCs分化,EGF在hDPSCs的分化中发挥作用,EGF和bFGF无明显协同作用。     

酪蛋白磷酸肽钙磷复合体对发酵乳杆菌生长影响的实验研究

研究酪蛋白磷酸肽钙磷复合体(CPP-ACP)对发酵乳杆菌生长的影响,探讨CPP-ACP作为一种生物防龋制剂的可行性.将发酵乳杆菌接种到BHI培养基中厌氧培养,实验组中加入不同浓度[0.5%～5.0%(W/V)]的CPP-ACP溶液,厌氧培养48 h后采用噻唑蓝(MTT)比色分析法测定细菌液的吸光度A值(λ=550 nm).随CPP-ACP浓度的升高,发酵乳杆菌的吸光度值降低,即发酵乳杆菌的活菌数减少(P<0.01).CPP-ACP对发酵乳杆菌的生长具有抑制作用,且随CPP-ACP浓度的升高抑制作用增强.     

酪蛋白磷酸肽钙磷复合体对变形链球菌生长、产酸的影响

目的：研究酪蛋白磷酸肽钙磷复合体（Casein phosphopeptide-Amorphic Calcium Phosphate，CPP-ACP）对变形链球菌生长和产酸的影响，探讨CPP-ACP作为一种生物防龋制剂的可行性。方法：将变形链球菌ATCC 25175（血清型c）在含糖的BHI培养基中厌氧培养，在实验组中加入不同浓度（0．5％～5．0％（W／V）的CPP-ACP溶液，厌氧培养48h，采用MTT法检测细菌浓度的吸光度值A（A=550nm），采用精密pH计检测培养御清液的pH值，计算pH的变化值ApH（初始pH值-终末pH值）。结果：随CPP-ACP浓度的升高，变形链球菌的吸光度值降低，即变形链球菌的活菌数减少（P〈0．01）；培养物上清液的pH值升高，ApH降低，即变形链球菌的产酸量降低（P〈0．01）。结论：CPP—ACP具有抑制变形链球菌生长、产酸作用，随浓度升高抑制作用增强。     

高温需要A蛋白与口腔变异链球菌的致龋性

变异链球菌是龋齿的主要致病菌,细菌表面多糖合成物、对牙面的黏附聚集、生物膜形成是其重要的生理学致病因子.高温需要(Htr)A是一种细菌细胞质的热休克蛋白,对于细菌耐受环境变化,特别是温度的增高,pH值和氧化还原电势的变化有重要的意义.下面就HtrA与变异链球菌致病因子相关的研究进行综述.