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目的 应用反向遗传技术构建以B型流感病毒冷适应株为骨架表达季节性流感病毒H1N1 HA蛋白的嵌合疫苗株。方法 将B型流感病毒冷适应株B/Vienna/1/99的HA片段胞外区替换为H1N1(A/Victoria/2570/2019)的HA蛋白,将重组质粒与骨架株的其余7个质粒共转染293T细胞,拯救H1N1嵌合疫苗株。对重组病毒株进行血凝鉴定、RT-PCR鉴定、电镜鉴定、一步生长曲线绘制以及小鼠安全性评价。结果 成功拯救出H1N1嵌合流感病毒株,命名为rA/B-H1-Vic。经测序鉴定其序列与预期一致,并且在电镜下观察到流感病毒粒子的典型特征。H1N1嵌合流感病毒株血凝效价最高达25,在MDCK细胞上的病毒滴度为104.5 TCID50/mL,在鸡胚中的病毒滴度为108.36EID50/mL。分别以106 EID50和105 EID50剂量鼻腔接种小鼠,其体重与对照组相比无明显下降,小鼠存活... 相似文献
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目的:研究κ-阿片受体选择性激动剂U50488H是否可通过调节内皮素-1(ET-1)表达的水平,进而影响c-Src蛋白酪氨酸激酶(PTK)的表达以实现抗心律失常的作用。方法:将42只大鼠随机分为7组(每组6只):正常对照组、U50488H组、U50488H+nor-BNI组、nor-BNI组、ET-1组、ET-1+U50488H组及ET-1+U50488H+nor-BNI组。左心室及股动脉插管观测大鼠心率(HR)、动脉压(ABP)、左心室内压(LVP)及心脏收缩和舒张功能(±LVdp/dtmax)等血流动力学指标,并计算大鼠室性心律失常的发生情况和大鼠的死亡率。实时荧光定量PCR检测ET-1及ET-1受体(ETRA)mRNA表达;Western blot测定ETRA及下游分子c-Src PTK的表达水平。结果:U50488H可显著抑制ET-1所致大鼠ABP、LVP以及心脏收缩、舒张功能的升高,并可显著降低ET-1所致大鼠室性心律失常的发生率和死亡率(P<0.01),以及抑制心肌ET-1 mRNA的水平(P<0.01)。给予ET-1后,磷酸化(P)-c-Src PTK的表达水平升高,U50488H可显著降低c-Src PTK的水平以及ET-1引起的P-c-Src PTK表达的水平(P<0.05),此作用可被κ-阿片受体阻断剂nor-BNI所阻断。结论:κ-阿片受体选择性激动剂U50488H可抑制ET-1所致大鼠室性心律失常发生。该作用可能与抑制ET-1及其下游分子c-Src PTK的表达有关。 相似文献
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目的 探讨阿奇霉素干糖浆联合青霉素治疗小儿急性化脓性扁桃体炎的临床疗效.方法 治疗组采用阿奇霉素干糖浆5~10 mg·kg-1·d-1,每日1次与青霉素10~20 万u·kg-1·d-1,分2次静脉滴注,连续3 d为1疗程;对照组予以青霉素10~20 万u·kg-1·d-1,分2次静脉滴注,3 d为1疗程.连续1~3个疗程.结果 剔除不合格病例7例(其中4例中途换用或联用其它抗生素,2例流失,1例因药疹停药).进入临床观察病例96例,其中观察组49例,治疗组47例.痊愈率:观察组51%,治疗组66%(P>0.05);有效率:观察组77.6%,治疗组93.6%(P<0.05).结论 阿奇霉素干糖浆联合青霉素治疗小儿急性化脓性扁桃体炎安全、方便、疗效显著,值得临床推广. 相似文献
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1临床资料 患者,男,92岁,于2003年3月11日出现咳嗽、咳痰、寒战、高热、呼吸困难2d入院。患者2年前曾因腹水、胸水、心包积液、肝功异常、贫血诊断为肝硬化、慢性支气管炎并肺内感染、贫血,给予抗感染、保肝、利尿、升血等对症治疗。效果不明显。查体:T38.6℃,P91次/min,BP110/60mmHg。贫血貌,睑面浮肿。甲状腺大小正常无结节。 相似文献
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目的为构建红花的遗传连锁图谱和功能基因的研究,探讨影响红花cDNA扩增片段长度多态性(cDNA amplified fragment length polymorphism,cDNA-AFLP)的各种因素,建立并优化红花cDNA-AFLP反应体系。方法以红花新鲜花瓣为材料,针对其内含物特殊性对Trizol法加以改进提取RNA,采用无RNase H活性的鼠源反转录酶(M-MLV RTase)结合置换合成法反转录双链cDNA;两步法酶切与连接,优化酶切时间;连接产物和预扩产物分别设置不同稀释倍数扩增并对选扩反应体系略微调整后,用6%的聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳分离,银染检测。结果改进Trizol法得到的红花总RNA样品较为完整,纯度较高,可直接用于双链的合成;经无RNase H活性反转录酶结合置换合成法得到高质量的cDNA模板。建立优化后的红花cDNA-AFLP体系为:250ng cDNA 37℃6 h经限制性内切酶MseI和EcoRI完全酶切,16℃连接12 h;连接产物最佳稀释倍数为10倍;预扩产物稀释为150倍;PAGE电泳得到清晰、稳定、分辨率较高的多态性条带。结论本研究建立的反应体系适用于红花功能基因的cDNA-AFLP研究。 相似文献
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69.
患者男性,45岁,因近日工作紧张劳累而出现头痛,并逐渐加重,于1周后在单位卫生所就诊,当时测血压24.0/13.3kPa(180/100mmHg),嘱其口服普萘洛尔30mg/d,硝苯地平30mg/d,但服药后症状无明显缓解,且出现焦躁不安,难以入睡,次日晚口服阿普唑仑0.8mg后仅睡眠2h,醒后异常兴奋,并出现幻听幻视,并对其幻觉信以为真,完全沉浸在幻觉中,时而侧耳倾听,喃喃自语,时而对空说话,奔走不安,对家人的劝阻不予理睬,故被家人强制送来我院。查体:血压31.9/18.6kPa(240/140mmHg),脉搏96次/min,患者神情紧张,双手颤抖,情绪狂躁,自言自语,行… 相似文献
70.
目的评估嗜酸性粒细胞性食管炎(eosinophilic esophagitis,EOE)患儿食管组织样本中聚丝蛋白(filaggrin,FLG)和骨膜蛋白(periostin,POSTN)的免疫组织化学表达水平。方法选取2015年3月至2017年3月在延安大学附属医院接受治疗的患儿为受试对象,EOE患儿、胃食管反流病(gastroesophageal reflux disease,GERD)患儿及对照组儿童各16例。EOE组患儿接受饮食和/或药物(皮质类固醇)治疗,并对患儿和对照受试者开展活检、FLG和POSTN的免疫组织化学表达水平评估。结果对照组所有食管活组织检查均显示FLG染色阳性和POSTN染色阴性结果。相反,所有EOE患儿预治疗后活检时FLG和POSTN染色分别呈阴性和阳性,而GERD患儿中FLG和POSTN染色阳性比例分别为62.5%和87.5%(P0.001)。在EOE组中,二次活检时,FLG阴性和POSTN阳性染色结果的病例比例相比首次活检显著降低,差异有统计学意义(P均0.001)。结论活动性EOE患儿食管黏膜FLG和POSTN表达可能分别出现下调和上调,治疗后显著比例的受试者上述变化得到恢复。但仍需开展大型研究对该发现作进一步调查。 相似文献