先天性小耳畸形听力重建术后全耳廓再造的术后护理

目的 探讨先天性小耳畸形听力重建术后全耳廓再造术后的护理方法.方法 对2001年1月至2009年4月在我科行先天性小耳畸形听力重建术后全耳廓再造术的25例患者做好术后负压引流管护理、皮瓣血运观察、心理护理和术后健康指导.结果 18例一期愈合,7例支架有外露.应用多孔高密度聚乙烯(medpor)做支架17例,外露3例,自体肋软骨做支架8例,外露4例.7例外露者,1例应用耳后筋膜瓣转移及全厚皮片修复治愈,6例局部皮瓣修复.全部外露病例均经修复后愈合,外形良好,但耳廓位置较无听力重建患者稍靠后.结论 术后做好负压引流管、耳洞的护理,注意观察皮瓣血运、再造耳位置,重视对患儿及家长的心理护理,加强术后健康指导,是保证手术成功和患者康复的重要措施,也为后期必要的局部修整手术提供良好的基础.     

全厚皮片移植修复治疗小儿先天性巨痣

【摘要】　目的　探讨应用全厚皮片移植法对小儿先天性巨痣的治疗效果。方法　2001年7月至2009年12月我科收治的其中6例小儿巨痣患者,予一次或分次切除小儿巨痣,均采用全厚皮片移植修复创面,下腹部取皮,供区直接缝合,植皮区采取打包固定。术后12天拆除植皮敷料换药。结果　6例小儿经过1～4次手术后,影响外观的病灶全部切除,植皮全部存活,外形良好,轻度色素沉着,无明显瘢痕增生形成,病灶无复发。结论 利用全厚皮片移植法治疗小儿巨痣,根据病灶部位、面积大小及外形要求,采取一次或多次手术治疗,手术简单,效果良好,尤其适合面部、超过肢体周径一半的肢体巨痣的治疗。     

5对孪生子尿道下裂的尿道修复术

目的 探讨孪生子尿道下裂的临床特点及尿道修复术疗效.方法 自1997年1月至2009年9月本院收治的5对孪生子的尿道下裂患者,进行一期尿道修复术,其中6例应用镍钛记忆合金尿道支架行尿道再造.结果 5对孪生子患者随访6个月～3年,术后尿瘘1例,尿道憩室1例,总并发症发生率为20.0%,其中6例应用镍钛合金尿道支架者无尿瘘、尿道狭窄等并发症,其余患者排尿通畅而无尿瘘,阴茎无下弯畸形,尿道口位置良好.结论 镍钛记忆合金尿道支架可减少尿道下裂术后并发症的发生,尿道下裂患者如有孪生背景者,需鉴别是否为同卵双生,有利于进一步的病因分析,对双胎共患者建议同期行尿道修复术.     

荷载角质细胞生长因子纳米微囊组织工程皮肤修复裸鼠皮肤缺损

目的 研究荷载角质细胞生长因子(keratinocyte growth factor,KGF)纳米微囊的新型组织工程皮肤对裸鼠皮肤缺损的修复效果及特点.方法 采用超声乳化一溶剂挥发法及低温干燥法,制备KGF纳米微囊,并构建KGF-脱细胞真皮基质(acellular dermal matrix,ADM);分离培养和鉴定人表皮干细胞群和成纤维细胞;接种表皮干细胞群于KGF-ADM之上,观察其生长情况;将荷载KGF纳米微囊的组织工程皮肤移植于裸鼠皮肤缺损处,以无KGF纳米微囊的组织工程皮肤为空白组,以其自体皮肤移植作对照组.于术后2,6周时分别观察修复区组织学愈合及皮片挛缩情况,并应用抗人角蛋白10及β1-整合素免疫荧光检测修复区表皮和真皮层细胞来源、分化及生长情况.结果 表皮干细胞群在KGF-ADM表面生长良好,粘贴紧密,可见到多角形的终末表皮细胞及小圆形的表皮干细胞,活性良好,有连接成片的趋势,部分形成克隆团块.以荷载KGF纳米微囊组织工程皮肤修复裸鼠皮肤缺损,2、6周时修复效果均优于空白组及对照组,移植的组织工程皮肤边缘可与邻近皮肤完全融合,但存在一定的挛缩.镜下可见修复区组织工程皮肤表皮细胞分层良好,与ADM紧密结合,能产生正常角质层.6周时实验组修复区组织工程皮肤切片免疫荧光检测,基底层仍存有少量β1-整合素阳性的表皮干细胞或短暂扩充细胞.结论 所构建的荷载KGF纳米微囊组织工程皮肤修复裸鼠皮肤缺损的效果,优于无KGF纳米微囊的普通组织工程皮肤及裸鼠自体全厚皮片移植修复效果.     

兔肌源性干细胞的生物学特性及表型分析

背景：骨髓间质干细胞作为种子细胞具有巨大的分化潜力和优势，但对于再生障碍性贫血或骨髓源性肿瘤等疾病的应用受限。现已发现肌源性干细胞具备与其相似的优越性，已引起相关领域研究者的注意。 目的：观察兔肌源性干细胞的生物学特性，并对其进行表型分析。 设计、时间和地点：细胞体外观察，于2005-08/2006-03在中山大学附属第二医院医研中心完成。 材料：清洁级1.5月龄新西兰大白兔1只，增殖培养基为DMEM-LG+体积分数0.1胎牛血清+100 g/L马血清，融合培养基为DMEM-LG+2%胎牛血清。 方法：兔麻醉后取大腿肌肉，采用差速贴壁Preplate技术分离培养肌源性干细胞，以Ⅺ胶原酶、dispase蛋白酶及胰蛋白酶分步消化，沉淀用增殖培养基重悬，接种在胶原包被的培养瓶中，该培养瓶为PP1。PP1于 37 ℃、含体积分数为0.05的CO2培养箱中静置过夜，随后将悬液转移到另一个胶原包被的培养瓶，此为PP2。随后同法建立PP3，PP4，PP5，PP6。将PP6接种到6孔板进行融合实验，分为两组：一组使用增殖培养基培养，在汇合度超过50%后继续培养，不传代；另一组使用融合培养基进行培养，汇合度达30%时传代培养。 主要观察指标：收集PP1~PP6，采用流式细胞仪、免疫细胞化学及Western Blot法鉴定细胞表型。通过不同汇合度及不同浓度血清培养，检测PP6融合情况。 结果：PP6细胞 > 80%为desmin+，> 70%为Bcl-2+，> 95%为CD45-，提示为高浓度肌源性干细胞，随着纯化步骤的进行，α-SMA表达逐渐减弱，至高度纯化的PP6时已无 α-SMA表达。PP6在高汇合度（> 50%）或低血清（仅含2%血清）培养时，极易融合成肌管或肌细胞链，骨骼肌肌球蛋白呈阳性表达。 结论：肌源性干细胞具有高水平表达desmin，Bcl-2，极低水平表达CD45，不表达α-SMA的生物学特性，在高汇合度或低血清培养条件下能够多向分化。     

先天性重唇畸形的手术矫治

【摘要】〓目的〓探讨先天性重唇畸形的手术矫治方法及其疗效。方法〓2005年4月至2012年12月对9例先天性重唇畸患者,采用双侧眶下神经阻滞麻醉及上唇局部浸润麻醉方法,应用双侧尖梭形切口直接楔形切除重唇赘生的粘膜组织及增生的粘膜下粘液腺,伤口间断全层缝合。结果〓9例患者伤口愈合良好,术后无并发症,重唇消失。随访6月~2年,重唇畸形无复发,瘢痕不明显,上唇对称,外形满意。结论〓应用双侧尖梭形切口直接楔形切除重唇赘生的粘膜组织及增生的粘膜下腺体矫治先天性重唇畸形,手术操作简单、并发症少、效果满意,是安全可靠的重唇畸形手术矫治方法。     

兔肌源性干细胞分离培养及诱导分化为神经细胞的研究

目的 探讨兔肌源性干细胞(MDSC)分离纯化及诱导分化为神经细胞的方法.方法 取2～3周龄新西兰兔大腿肌肉,采用改进的Preplating技术分离MDSC,并应用流式细胞仪(FCM)、免疫细胞化学检测细胞表型.添加神经生长因子、全反式维甲酸、β-巯基乙醇诱导MDSC分化为神经细胞并运用免疫细胞化学和FCM检测特异性神经巢蛋白(Nestin)的表达.结果 经过连续6d的差速贴壁分离得到小圆形及小菱形细胞,传代后进一步纯化,FCM结果显示这些细胞>90%为desmin+,>90%为bcl-2+,>95%为CD45-.免疫细胞化学显示大多数细胞为desmin+及bcl-2+.诱导后的细胞>90%为Nestin+.结论 采用改进的Preplating技术能很好地分离出MDSC,并能在体外诱导分化为神经细胞,为构建组织工程化尿道海绵体提供种子细胞.     

兔肌源性干细胞的生物学特性及表型分析

背景：骨髓间质干细胞作为种子细胞具有巨大的分化潜力和优势，但对于再生障碍性贫血或骨髓源性肿瘤等疾病的应用受限。现已发现肌源性干细胞具备与其相似的优越性，已引起相关领域研究者的注意。目的：观察兔肌源性干细胞的生物学特性，并对其进行表型分析。设计、时间和地点：细胞体外观察，于2005-08／2006-03在中山大学附属第二医院医研中心完成。材料：清洁级1．5月龄新西兰大白兔1只，增殖培养基为DMEM—LG＋体积分数0．1胎牛血清＋100gm/L血清，融合培养基为DMEM-LC＋2％胎牛血清。方法：兔麻醉后取大腿肌肉，采用差速贴壁Preplate技术分离培养肌源性干细胞，以Ⅺ胶原酶、dispase蛋白酶及胰蛋白酶分步消化，沉淀用增殖培养基重悬，接种在胶原包被的培养瓶中，该培养瓶为PP1。PP1于37℃、含体积分数为0．05的CO2培养箱中静置过夜，随后将悬液转移到另一个胶原包被的培养瓶，此为PP2。随后同法建立PP3，PP4，PP5，PP6。将PP6接种到6孔板进行融合实验，分为两组：一组使用增殖培养基培养，在汇合度超过50％后继续培养，不传代；另一组使用融合培养基进行培养，汇合度达30％时传代培养。主要观察指标：收集PP1～PP6，采用流式细胞仪、免疫细胞化学及Western Blot法鉴定细胞表型。通过不同汇合度及不同浓度血清培养，检测PP6融合情况。结果：PP6细胞〉80％为desmin^＋，〉70％为Bcl-2^＋，〉95％为CD45，提示为高浓度肌源性干细胞，随着纯化步骤的进行，α-SMA表达逐渐减弱，至高度纯化的PP6时己无α-SMA表达。PP6在高汇合度（〉50％）或低血清（仅含2％血清）培养时，极易融合成肌管或肌细胞链，骨骼肌肌球蛋白呈阳性表达。结论：肌源性干细胞具有高水平表达desmin，Bcl-2，极低水平表达CD45，不表达α-SMA的生物学特性，在高汇合度或低血清培养条件下能够多向分化。     

烧伤后瘢痕癌七例的临床分析

目的 探讨烧伤后瘢痕癌的临床特点与手术治疗方法.方法 2001 年7 月至2010 年6 月收治7 例患者8 处烧伤后瘢痕癌病灶,予7 处病灶行手术扩大切除肿物,同时松解瘢痕挛缩,并采用整张中厚皮片、全厚皮片移植或皮瓣移植修复创面,另1 处病灶行截肢术.结果 5 例肿物位于下肢,全部病理诊断均为高分化鳞癌.术后全部植皮或皮瓣均成活,伤口愈合良好,瘢痕挛缩基本矫正.所有患者随诊3 个月至3 年,1 例上肢截肢患者术后2 个月发现腋窝淋巴结转移,1 例患者于术后3 个月局部复发.结论 下肢为烧伤后瘢痕癌的好发部位,高分化鳞状细胞癌为烧伤后瘢痕癌最常见的病理类型.烧伤后瘢痕癌术前要行病理活检明确诊断,切除范围要充分并行植皮等方法修复或行截肢术以避免肿瘤复发.     

负压引流结合刃厚皮片移植治疗难治性感染缺损创面的疗效观察

目的:总结评价负压引流结合刃厚皮片游离移植修复难治性感染缺损创面的治疗效果。方法:难治性感染缺损创面患者32例。经全身支持治疗并通过一次或多次清创负压引流后,采用刃厚皮片移植进行修复,创面最大18.0cm×32.0cm,最小4.0cm×8.0cm。结果:32例皮片均成活良好,创面有效修复,平均住院时间25天,术后经3~28个月随访,创面愈合良好,功能基本恢复。结论:负压封闭引流结合刃厚皮片移植修复治疗难治性感染缺损创面,可获得较好的临床效果。