地骨皮提取物CL-5拮抗内毒素的实验研究

目的 观察地骨皮提取物(CL-5)对内毒素(LPS)的体内外拮抗活性.方法 应用生物传感器技术检测CL-5与LPS的活性中心类脂A(Lipid A)的结合活性,ELISA法检测不同浓度CL-5(50、100、200mg/L)对LPS(100μg/L)刺激RAW264.7细胞释放肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,进一步观察不同剂量(30、60、90mg/kg)的CL-5对致死剂量热灭活大肠杆菌(E.coil)攻击小鼠的72小时存活率.结果 10～640mg/L的CL-5,特异性结合值(RU)为36.5～481.2arc/s,随CL-5浓度递增而升高;单纯LPS刺激RAW264.7细胞(对照组)释放的TNF-α为(2479.03±61.43)ng/L,给予50、100、200mg/L CL-5预处理后TNF-α浓度依次为(2 210.29±70.95)、(1 998.27±111.24)、(1 423.28±86.35)ng/L,随CL-5剂量递增而减少,均显著低于对照组(P<0.05);以1.30×1011CFU/kg热灭活E.coil攻击小鼠(对照组)72小时动物死亡率为100%,而以30、60、90mg/kg CL-5处理后,小鼠72小时存活率分别为50%、60%和80%,随CL-5注射剂量的增加而升高,均显著高于对照组(P<0.05).结论 CL-5与Lipid A有一定的结合活性,可抑制LPS诱导的RAW264.7细胞活化,并对致死剂量热灭活E.coil攻击的小鼠具有保护作用.     

泛耐药鲍曼不动杆菌新疆分离株氨基糖苷类药物耐药机制研究

目的:探讨一组分离自新疆的泛耐药鲍曼不动杆菌对氨基糖苷类药物的耐药机制。方法:收集患者标本中分离的泛耐药鲍曼不动杆菌共20株,用聚合酶链反应(PCR)的方法分析5种氨基糖苷类修饰酶基因、2种16SrRNA甲基化酶基因和外排泵蛋白AdeB编码基因adeB。结果:本组20株泛耐药鲍曼不动杆菌检出aac(3)-Ⅰ、aac(6’)-Ⅰb、ant(3")-Ⅰ、aph(3’)-Ⅰ等4种氨基糖苷类修饰酶基因和armA 16SrRNA甲基化酶基因以及adeB外排泵基因,阳性基因共分为6种阳性模式。主要的阳性模式为(aac(3)-Ⅰ+aac(6’)-Ⅰb+ant(3")-Ⅰ+aph(3’)-Ⅰ+armA+adeB)六种基因阳性11株,占55%;(aac(3)-Ⅰ+aac(6’)-Ⅰb+ant(3")-Ⅰ+aph(3’)-Ⅰ+adeB)五种基因阳性4株,占20%;未检出ant(2")-Ⅰ及rmtB基因。结论:产修饰酶和产靶位甲基化酶以及AdeABC外排泵系统是导致本组菌株对氨基糖苷类药物耐药的主要原因。     

2型糖尿病血糖控制水平与并发糖尿病肾病的风险研究

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者血糖控制水平与并发糖尿病肾病风险的关系。方法根据糖化血红蛋白(HbA1c)的含量将2型糖尿病患者分成血糖控制良好组(HbA1c≤7.0%,n=72)、血糖控制不佳组(HbA1c>7.0%,n=32),分别检测血清中胱抑素C(Cys C)、肌酐(Cr)、尿素(Urea)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)和尿液中视黄醇结合蛋白(U-RBP)、尿微量清蛋白(U-mAlb)等项目。结果糖尿病各组血清Cys C、hs-CRP、U-RBP和U-mAlb与对照组比较均升高(P<0.05或P<0.01),并且患者血糖控制水平越差,Cys C、hs-CRP、U-RBP和UmAlb升高幅度越大。结论 T2DM患者HbA1c水平越高,血糖控制越差,并发糖尿病肾病的风险就越高。因此,控制好血糖对预防或延缓T2DM患者并发糖尿病肾病具有重要意义。     

2',5,6',7-四羟基二氢黄酮醇对内毒素刺激巨噬细胞ST2 mRNA表达的影响

目的检测2’,5,6’,7-四羟基二氢黄酮醇（THF）对内毒素（LPS）刺激巨噬细胞ST2 mRNA表达的影响。方法采用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）分别检测不同浓度LPS刺激对RAW264.7细胞ST2 mRNA表达的影响及不同浓度THF对100μg/LLPS诱导的RAW264.7细胞ST2 mRNA表达的影响。结果LPS（10、100、1000μg/L）可显著上调RAW264.7细胞ST2 mRNA的表达,依LPS浓度升高ST2 mRNA表达增强,呈剂量-效应关系;而以20～160mg/LTHF干预后,则可显著下调LPS（100μg/L）上调的ST2 mRNA表达。结论THF可在基因水平上拮抗LPS对巨噬细胞ST2 mRNA表达的诱导效应。     

黄芩药材中2′,5,6′,7-四羟基二氢黄酮醇的分离与鉴定

目的:分离并鉴定黄芩药材中2′,5,6′,7-四羟基二氢黄酮醇。方法:依托以Lipid A为靶点的抗内毒素(LPS)药物筛选平台,应用大孔吸附树脂、膜和高效液相色谱法对黄芩水提液进行针对Lipid A的逐级分离纯化,对所得目标化合物采用质谱、核磁共振和红外光谱等技术进行结构解析。结果:从黄芩水提液中分离出活性化合物5KL-1B,其与LipidA的特异性结合值为208.6arc seconds,结构鉴定确证5KL-1B为2′,5,6′,7-四羟基二氢黄酮醇。结论:本试验建立的定向分离模式目的性强、效率高,可用于天然药物中抗LPS活性物质的富集与分离纯化。     

金黄色葡萄球菌细胞壁可溶性肽聚糖的分离纯化和鉴定

目的：从金黄色葡萄球菌中提取纯化可溶性肽聚糖并鉴定其活性。方法：采用小剂量青霉素作用金黄色葡萄球菌（ATCC25923），诱导合成可溶性肽聚糖（PGN）粗品，经Sephadex G-100凝胶层析进一步分离纯化；采用SLP试剂盒对纯化的可溶性PGN定性，ELISA法检测纯化的可溶性PGN对小鼠RAW264．7细胞的活化作用。结果：分离纯化的可溶性PGN经SLP试剂检测阳性，该可溶性PGN可刺激RAW264．7细胞释放TNF-α，并具有明显的量效关系。结论：采用青霉素诱导结合凝胶层析技术可从金黄色葡萄球菌获取纯度及生物学活性较高的可溶性PGN。     

酒精灌胃大鼠血浆中乙醇浓度变化

目的通过实验了解大鼠酒精灌胃后体内乙醇代谢的特点,为建立大鼠乙醇中毒所致慢性酒精性肝病模型提供依据。方法雄性Wistar大鼠30只,随机分成三个剂量组。实验大鼠以50%的酒精按各组剂量给予灌胃,灌胃后分别于第0.5、1、1.5、2、2.5、3、5、10h经眼眶静脉丛采集大鼠血标本,以乙醇脱氢酶法测定血浆中乙醇浓度。结果对各时段点乙醇浓度测定分析,大鼠摄入酒精后乙醇浓度的高峰均出现在灌胃后1~1.5h处,随后开始缓慢下降,代谢曲线与醉酒表现一致。结论酒精灌胃剂量小于8g/kg是比较安全的,灌胃后1~1.5h达到代谢吸收高峰期,10h后醉酒状态基本恢复,这为制备大鼠酒精性肝病模型提供理论依据。     

神经诱导损伤蛋白1在心血管疾病演进中的研究进展

神经诱导损伤蛋白1(Ninj1)是神经诱导损伤蛋白家族中的重要成员之一,参与了人体多种生物学功能的调控。近年来研究发现,Ninj1通过调控多种信号传导通路在心血管疾病演进过程中发挥着重要的生物学作用。本文总结了Ninj1的生物学特性,以动脉粥样硬化、心房颤动、心力衰竭等为切入点,论述Ninj1在心血管相关疾病中的研究进展,以期为临床心血管相关疾病的诊疗和药物研发提供新思路。     

脑出血疾病患者脑脊液中NSE、S100β及miR-124-3p、miR-146a-5p检测的临床意义

目的探讨脑出血疾病患者脑脊液(CSF)中神经元特异性烯醇化酶(NSE)、酸性钙结合蛋白(S100β)及差异表达的miRNA在疾病诊断与病情评估中的价值。方法选择脑出血(ICH)疾病患者26例,依据格拉斯哥评分(GCS)将其分为轻度ICH组(13例)、重度ICH组(13例),并选取22例同期排除脑部疾病住院病人作为对照,采用实时荧光定量PCR检测所有入组对象CSF样本中的15个靶标微小RNA(miRNA),同时采用生化及化学发光方法检测β2微球蛋白(β2-MG)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸(LAC)、乳酸脱氢酶(LD)、微量清蛋白(mAlb)、NSE、S100β,统计分析上述指标在诊断脑出血的效能及评估病情中的价值。结果轻度ICH组CSF NSE:17.48(8.64,26.86)ng/mL,S100β:1.40(0.38,2.11)μg/L,重度ICH组CSF NSE:18.55(8.86,24.69)ng/mL,S100β:1.51(1.10,4.64)μg/L,明显高于对照组[NSE:2.93(2.48,3.83)ng/mL,S100β:0.43(0.25,0.88)μg/L],差异有统计学意义(P0.05);ICH患者CSF NSE的水平与出血量显著相关(r=0.86;P0.01);与对照组比较,ICH组CSF miR-124-3p和miR-146a-5p显著上调,差异有统计学意义(P0.05)。CSF中NSE、S100β、miR-124-3p、miR-146a-5p诊断ICH的曲线下面积(AUC)分别为0.931[95%置信区间(95%CI):0.857～0.892]、0.795(95%CI:0.670～0.921)、0.667(95%CI:0.512～0.822)和0.878(95%CI:0.776～0.844)。CSF中NSE、S100β两者联合诊断ICH的AUC为0.945,灵敏度为84.6%,特异度为98.2%。结论 CSF中NSE、S100β、miR-124-3p、miR-146a-5p的检测对于ICH的辅助诊断具有一定价值,尤其NSE、S100β可反映脑组织损伤严重程度。     

127名汉族青年口腔唾液一氧化氮含量检测

目的 :研究健康汉族青年唾液中一氧化氮 (NO)含量正常参考值限 ,及其与口腔龋病、龈炎的关系。方法 :分别采集口腔正常 (42名 )、有龋病 (49名 )或龈炎 (36名 )的健康汉族青年学生口腔唾液 ,由专业人员用NO检测试剂盒 ,比色并计算出唾液中NO含量。结果 :男性唾液中NO含量值限为 0～ 2 40mol/L ,均值为(6 7.0 2 5± 39.0 6 5 ) μmol/L ;女性唾液中NO含量值限为 0～ 2 39μmol/L ,均值为 (76 .397± 34 .85 6 ) μmol/L。口腔正常组、龋病组、龈炎组唾液NO含量均值 ,分别为 (6 8.2 86± 37.432 ) μmol/L ,(6 8.6 82± 34 .6 2 7) μmol/L和 (79.70 0±40 .0 0 7) μmol/L ,经统计学检验 ,3组间唾液NO含量无显著差异 (P >0 .0 5 )。 结论 :汉族青年唾液NO含量正常参考值在 11～ 140 μmol/L ,唾液中NO含量在浅、中度龋和轻度龈炎者中 ,未见明显增高 (P >0 .0 5 )。