新型逆转录病毒载体介导的人多药耐药基因转移小鼠造血干／祖细胞

为探讨逆转录病毒介导的外源基因转导对骨髓造血重建的影响,我们以人多药耐药基因(mdr-1)为报告基因,采用包含Friend脾灶形成病毒(spleen focus-forming vims)和鼠胚胎干细胞病毒序列的新型逆转录病毒载体SF-MDR,以病毒包装细胞与小鼠造血细胞体外共培养法进行基因转染,并对基因转导后造血细胞的体外耐药能力及体内造血重建能力进行了观测。结果表明,该载体可有效地介导mdr-1基因转导,明显提高小鼠骨髓造血细胞对秋水仙素及紫杉醇的耐受能力,对细胞体内造血重建能力没有影响,体内移植8个月后经紫杉醇体内筛选,7/7的小鼠可于外周血细胞基因组DNA中检出外源mdr-1基因的存在。     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂FK228对前列腺癌LNCaP细胞抑制效应的细胞信号通路研究

目的研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂FK228对前列腺癌LNCaP细胞抑制作用的细胞信号机制。方法Western blot分析细胞蛋白乙酰化水平、细胞信号通路蛋白及细胞周期相关蛋白的表达。结果FK228能够使细胞内蛋白乙酰化水平增高,乙酰化组蛋白H3积累,多种细胞信号通路的相关蛋白如雄激素受体、HER-2、Raf-1、Akt、CDK4等呈时间依赖性和剂量依赖性被清除。结论FK228能够同时阻断对细胞生长具有重要作用的多条细胞信号通路,从而对前列腺癌LNCaP细胞发挥抑制作用。     

Toll样受体4参与卵巢癌细胞增殖与凋亡的调控

目的 探讨Toll样受体4 (TLR4)异常表达对卵巢癌细胞增殖与凋亡的影响。方法 免疫组化法检测卵巢癌及其周围正常组织中TLR4的表达情况;构建针对TLR4基因的siRNA,转染人卵巢癌细胞株SKOV3,实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测TLR4 mRNA表达,Western blotting检测TLR4蛋白表达;CCK-8法检测TLR4 siRNA转染SKOV3细胞6～24 h后细胞的生长情况,流式细胞仪检测细胞转染24 h后的凋亡情况。结果 TLR4在卵巢癌及其周围正常组织中均有表达,且卵巢癌组织中TLR4表达量明显高于癌旁组织（P <0.05）;TLR4 siRNA转染后,SKOV3细胞中TLR4 mRNA及蛋白表达水平明显降低（P <0.05）;siRNA转染24 h后,SKOV3细胞活力下降,细胞凋亡率升高（P <0.05）。结论 TLR4参与了卵巢癌细胞增殖与凋亡的调控,干扰TLR4能抑制SKOV3细胞增殖,诱导细胞凋亡。     

1型糖尿病患者血浆血小板活化因子乙酰水解酶(PAF-AH)活性检测及其基因单核苷酸多态性的研究

目的 观察1型糖尿痛(T1DM)病人血浆血小板活化因子乙酰水解酶(PAF-AH)的活性以及PAF-AH基因G275A多态性与1型糖尿病(T1DM)的相关性.方法 选择T1DM病人115例,对照组106例,测定血浆PAF-AH活性,采用PCR-RLFP法测定PAF-AH基因G275A基因型.结果 T1DM患者的血浆PAF-AH活性为(18.95±5.43)nmol/(min·ml);健康对照者血浆PAF-AH活性为(26.65±3.71)nmol/(min·ml),2组比较差异具有统计学意义(P<0.05).与对照组相比,TIDM组G275A多态性位点GA基因型频率显著高于对照组(36.52% vs 22.64%,P<0.05).结论 TIDM患者的血浆PAF-AH活性降低.PAF-AH基因G275A多态性可能与1型糖尿病相关.     

手术治疗腰椎间盘突出症的护理

我院近８年来开展腰椎间盘摘除手术治疗腰椎间盘突出症 (以下简称腰突症 )１１８例。现将护理体会报道如下 :１临床资料本组男８０例 ,女３８例 ,年龄３２～６８岁 ,平均４２岁。部位 :Ｌ４～５６０例 ,Ｌ５～Ｓ１５８例。２术前护理２ .１心理护理 :本组患者腰腿疼痛 ,感觉异常 ,病程长 ,反复发作 ,导致生活能力下降 ,严重影响着生活和工作 ,且多经保守治疗无效 ,易产生焦虑和悲观情绪 ,同时对手术又持怀疑态度 ,所以对这类患者的心理护理显得特别重要。本组１１８例均有不同程度的悲观情绪和持怀疑态度 ,针对这种情况 ,我们正确地使用了开…     

紫杉醇对p53突变型肺癌细胞株H322的生长抑制作用

目的:通过体外实验评价紫杉醇对p53突变型肺癌细胞株H322的生长抑制作用. 方法: 紫杉醇不同作用浓度不同作用时间处理H322细胞后,应用MTT法检测紫杉醇对肺癌细胞生长抑制作用,通过流式细胞术分析细胞周期及凋亡的变化,荧光显微镜观察细胞核形态的变化. 结果: 紫杉醇对H322的细胞毒性呈时间依赖性(P<0.05),(10-1000)nmol/L的浓度对H322生长抑制差异不显著(P>0.05).浓度≤100nmol/L时,G2-M期比率随浓度增加而增高(P<0.05);凋亡比例在低浓度范围内(0.1-10)nmol/L呈浓度依赖性,浓度进一步增加,反而降低.时间依赖性实验中,10nmol/L作用时,凋亡发生呈时间效应;G2-M期所占比例在12h达最高.1000nmol/L作用时,G2-M期阻滞程度和持续时间均高于10nmol/L,但不如低浓度诱导凋亡出现得早.典型凋亡细胞出现浓缩、成片的染色质.紫杉醇诱导的凋亡和G2-M期阻滞无相关性(P>0.05).结论: 体外实验中,紫杉醇对H322细胞有明显生长抑制作用,并且这种作用呈时间依赖性,但在一定浓度范围内剂量效应不明显;低浓度紫杉醇虽然对G2-M期阻滞影响较小,却能比高浓度更早诱发凋亡,延长作用时间亦可达到有效抑制肿瘤细胞增殖的目的.     

1型糖尿病患者血浆血小板活化因子乙酰水解酶(PAF-AH)活性检测及其基因单核苷酸多态性的研究

目的 观察1型糖尿痛(T1DM)病人血浆血小板活化因子乙酰水解酶(PAF-AH)的活性以及PAF-AH基因G275A多态性与1型糖尿病(T1DM)的相关性.方法 选择T1DM病人115例,对照组106例,测定血浆PAF-AH活性,采用PCR-RLFP法测定PAF-AH基因G275A基因型.结果 T1DM患者的血浆PAF-AH活性为(18.95±5.43)nmol/(min·ml);健康对照者血浆PAF-AH活性为(26.65±3.71)nmol/(min·ml),2组比较差异具有统计学意义(P<0.05).与对照组相比,TIDM组G275A多态性位点GA基因型频率显著高于对照组(36.52% vs 22.64%,P<0.05).结论 TIDM患者的血浆PAF-AH活性降低.PAF-AH基因G275A多态性可能与1型糖尿病相关.     

益母草醇提取物对大鼠肾毒性损伤作用研究

目的观察长期、大量给予益母草醇提取物致大鼠肾毒性损伤的作用和程度。方法按90天毒性实验法,除观察一般状况外,监测大鼠尿常规、尿微量蛋白及肾毒性相关指标,并进行肾组织病理学检查。结果益母草醇提取物可导致血中尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）含量增高,肾脏重量和肾／体比值增大,病理组织学检查可见不同程度的肾小管损伤,上述变化随剂量的增加而逐渐加重。结论益母草醇提取物长期给药后可导致大鼠明显的肾毒性损伤。     

柴胡总皂苷粗提取物对大鼠肝毒性损伤作用研究

目的观察长期、大量给予柴胡总皂苷粗提取物致大鼠肝毒性损伤的作用和程度。方法按45天毒性实验方法,除观察一般状况、肝毒性相关指标外,检测血和肝组织内脂质代谢情况、糖代谢、胆红素（TBIL）水平和肝组织病理检查。结果柴胡总皂苷粗提取物可导致血中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）活性增高,肝脏重量和肝体比值增大,血和肝内甘油三酯（TG）含量增加,对血中胆固醇（CHO）和肝内糖原（Gn）影响不明显,仅高剂量组对TBIL有影响;上述变化随剂量的增加而逐渐加重,病理组织学检查可见肝细胞损伤,与蒸馏水对照组相比有明显差异。结论长期给柴胡总皂苷粗提取物可致大鼠明显的肝毒性损伤,既可致肝功能指标的改变,又可致肝细胞器质性病变。