基因重组融合蛋白hNPY对小鼠前脂肪细胞增殖和分化影响的实验研究

目的：前脂肪细胞是一类具有增殖和向脂肪细胞分化潜力的特异化的前体细胞,如能找到可促进前脂肪细胞增殖和分化的因子或药物,并在脂肪组织移植的同时使用,则有希望提高脂肪组织的移植效果,本实验探索一种新的人体肥胖关联基因和外周脂肪细胞激动剂一基因重组融合蛋白hNPY对小鼠3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化的影响及其分子调控机制。方法：采用基因工程技术设计hNPY基因上下游序列,经过PCR反应合成hNPY的cDNA后与pET28a＋载体重组,再将已构建好、并经测序确认无误的重组质粒pET28a—NPY转导至大肠杆菌BL21（DE3）,再由IPTG诱导表达hNPY融合蛋白、并进行纯化;然后,将体外培养的小鼠3T3-L1前脂肪细胞经由3-异丁基-1-甲基黄嘌呤、胰岛素和地塞米松进行联合诱导;诱导2d后,再将此细胞分为三组,即空白对照组（未加任何诱导剂组）、经典诱导组（胰岛素诱导）和实验干预组（hNPY融合蛋白干预）,其中,实验干预组再按照hNPY融合蛋白浓度不同又分为高、中、低三个浓度组（10^-8mol／L、10^-19mol／L和10^-9 mol／L）。分别于细胞培养的第7d和第12d用相差显微镜观察各组细胞的形态学变化,再于细胞培养的第12d用油红O染色观察脂肪细胞的分化程度;同时,采用MTT法检测该细胞的增殖状况;采用Westernblot法检测脂肪细胞分化相关基因过氧化物体增殖剂活化受体-γ（PPAR-γ）、CAAT／增强子结合蛋白-a（C／EBP-a）蛋白的表达水平。结果：低浓度（10^-10 mol／L）的hNPY融合蛋白,无明显促进小鼠3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化的作用效果;中浓度（10^-9 mol／L）的hNPY融合蛋白,可有效促进小鼠3T3-L1前脂肪细胞增殖及细胞数量增多;而高浓度（10^-8 mol／L）的hNPY融合蛋白,不仅能明显促进小鼠3T3-L1前脂肪细胞的细胞增殖和分化,且能显著提高该细胞C／EBPa和PPARγ的表达水平、而明显降低INSIG-2的表达。结论：高浓度（10^-8mol／L）的基因重组融合蛋白hNPY能够明显促进小鼠3T3-L1前脂肪细胞的增殖和分化,其促进3T3-L1细胞增殖和分化的分子调控机制很可能与上调PPARγ、C／EBPa表达和降低INSIG-2表达水平有关,这提示：hNPY作为脂肪细胞膜上受体NPYR的有效促进剂或激动剂,未来很可能成为人体外周脂肪细胞一个新的作用靶点。     

与人体肥胖相关的神经肽Y受体Y2基因的克隆及序列分析

目的 克隆与肥胖相关的人神经肽Y受体Y2(NPY2R)基因,并鉴定该克隆基因序列的正确性.方法 从人的脂肪组织中提取总RNA并进行反转录,以此为模板用PCR扩增NPY2R基因的eDNA,然后与pET 28a+载体重组,筛选阳性克隆和DNA序列分析鉴定,测序后与GeneBank中NPY2R基因进行同源性比较和序列分析.结果 PCR扩增出一个1100 bp左右的DNA片段,与载体重组和DNA序列分析鉴定,DNA序列分析显示克隆的DNA片段是人NPY2R基因,且所克隆的基因共编码381个氨基酸,分子量为4.2 kD,与GeneBank中NPY2R基因序列同源性达100%.结论 克隆的人NPY2R基因与GeneBank中NPY2R序列完全一致,为进一步应用分子生物学技术深入研究NPY2R与人体肥胖发生、发展及转化等相关作用机制及应用该基因进行其基因蛋白表达奠定了基础.     

刺玫果冲剂对SOD活性的影响

本试验以刺玫果冲剂为试药,对人(45～71岁)和动物(小白鼠和大白鼠)进行了整体试验及单一细胞(淋巴细胞和红细胞)的离体实验。人体试验结果表明,刺玫果冲剂每天服用2次,每次5g,连续30天,服药前后对比,体细胞内SOD活性增强非常明显(P<0.01);大白鼠、小白鼠分别喂药7天和15天,其红细胞内SOD活性增强亦非常显著(P<0.01);同时,用高、中、低3种剂量的试药分别加入上述两种离体细胞进行培养,在0,8,12和24h时,细胞内SOD活性有显著增强,尤其在加药后12h时,其活性达到0～24小时周期中的峰值。     

33例老年胃癌患者红细胞中SOD活性变化(摘要)

老年胃癌患者在大体形态上以隆起形分化癌为多见,并伴有多种合并症,但对红细胞中SOD活性的影响如何,国内报道尚不多。为此,我们从武汉、河南、山东等地收集33例老年胃癌患者标本,进行了红细胞中SOD活性的分析测定。 一、对象与方法 受试对象33例(男21     

海水浸泡诱导小鼠肺组织氧自由基的改变及其防护的研究

目的：观察海水浸泡条件下，小鼠肺组织氧自由基的改变及超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的防护作用。方法：选用１２０只小鼠，随机分组，检测其ＳＯＤ活性及丙二醛（ＭＤＡ）含量的变化。结果：除未注射ＳＯＤ的小鼠，在海水浸泡２０分钟组ＳＯＤ活性稍高且无统计学意义外，其余各组ＳＯＤ活性均较相应对照组低，并均有显著性差异（Ｐ＜０．０１），而ＭＤＡ含量变化则相反。注射ＳＯＤ小鼠浸泡不同时间后，其各时间点ＳＯＤ活性均较未注射ＳＯＤ小鼠者高，而ＭＤＡ含量变化则相反并与注射ＳＯＤ的剂量有关。结论：海水浸泡可诱导小鼠肺组织氧自由基的改变，并有可能引起肺组织损伤，而注射ＳＯＤ对小鼠肺组织氧自由基的改变有防护作用。因此，为加强对海水浸泡伤害的防护，使用ＳＯＤ制剂值得推荐。     

自体血清(血浆)疗法在临床医疗和护理中的应用

白体血清(血浆)因其含有人体所需最基本、较齐全的营养成分和生物活性物质及细胞生长因子等,加上其是抽取患者的静脉血经立即离心分离后所获得的自体成分,来源方便、制备简便、安全有效、新鲜无污染、无刺激、无过敏、无毒副作用等特点,在现代医学研究及临床医疗和护理中的应用越来越广泛.为了不断探索自体血清(血浆)疗法在临床应用的新途径、新方法和新技术、进一步阐明白体血清(血浆)在临床应用过程中的治疗方法、作用机制和实际疗效等,本文通过对自体血清(血浆)在临床治疗和护理等领域中应用的检索文献进行综述,揭示自体血清(血浆)疗法充分利用其生物化学成分的广谱性及其生物学特性的多样性,在眼科、骨科、神经内外科、血液科、口腔科等相关疾病的临床治疗方面发挥着积极作用、且其有效性、安全性、稳定性在临床医学应用方面具有明显优势和独到之处.     

自体血清(血浆)疗法在整形外科和皮肤科诊疗及微创美容医疗和护理中的应用

自体血清(血浆)因能为多种细胞增殖和生长、组织修复和再生等提供较为丰富而完整的营养成分、生物活性物质和细胞生长因子,并能改善和调节细胞生长和代谢的微环境,提供某些必要的促细胞接触和伸展的生物活性因子,以促进和加快细胞迁移、聚集和贴附等独特的生物学特点,加上自体血清(血浆)来源于自体,具有良好的同一性和相融性,且因其毒副作用小、取材方便、应用安全等特点,使其近年来在临床某些疾病治疗和护理中的应用越来越广泛.为了进一步推动和拓展自体血清(血浆)在临床治疗和护理领域中的应用,并为未来设计和创建自体血清(血浆)在临床新的治疗方法和新的护理模式提供参考依据,本文对自体血清(血浆)在整形外科、皮肤科及微创美容和皮肤抗衰老医学中的临床治疗和护理领域的应用进行综述.

Abstract：

With rich nutritious ingredients, bioactive substances and growth factors for cell proliferation and growth, tissue repair and regeneration, autologous serum (plasma) can improve and regulate the micro environment for cell's growth and metabolism and provide some necessary bioactive factors to promote cell migration, aggregation and adhesion. Being autologoua makes the serum (plasma) identical and harmonious. Having slight side effects, autologous serum (plasma) is safe for application. Besides, the resources can be easily obtained. These features enable it to be widely used in clinical treatment and nursing care for some diseases in recent years. In order to further push forward the application of autologous serum (plasma) in clinical treatment and nursing care and provide references for designing new c linical treatment approaches and nursing modela, upon comprehensive and systematic review of relevant literature, this paper summarizes the application of autologous serum (plasma) on clinical treatment and nursing care in plastic surgery, dermatology, minimally invasive beauty and skin anti-aging medicine.     

脂肪细胞关联基因与老年肥胖代谢性疾病

肥胖及肥胖代谢综合征作为老年人常见病和合并症目前已不再足某些发达国家或地区的问题,它已经成为全球各个国家都将面l临的重大医学问题和健康问题。而且,肥胖可引发老年代谢性疾病、呼吸系统疾病、心血管系统疾病以及骨关节退行性变、性激素分泌失调、静脉淤滞、深静脉血栓形成及肿瘤的发生和发展等,其潜在的健康影响和生命威胁难以估量,给国家带来的社会问题和经济损失也无法计算。而某些脂肪细胞关联基因及肥胖基因与人类肥胖及肥胖代谢综合征密切相关,因此,对这些肥胖基因表达及关联因素实施有效调控,对控制人类肥胖及肥胖代谢综合征的发生、发展及转归具有重要临床意义。正是基于这些,本文通过对肥胖相关基因及其与相关临床疾病关系的文献进行综述,希望未来能够对以这些肥胖基因作为靶点的肥胖预防和治疗药物的设计提供某些依据并奠定一定基础。     

低强度He-Ne激光血管内照射对人体自由基代谢相关成分的影响

自８０年代前苏联学者将ＨｅＮｅ激光用于血管内照射以来，低强度激光血管内照射（ｉｎｔｒａｖａｓｃｕｌａｒｌｏｗｌｅｖｅｌｌａｓｅｒｉｒａｄｉａｔｉｏｎ，ＩＬＬＬＩ）已得到较广泛的应用，对某些疾病的疗效较好。为探讨其作用机理，我们在临床应用ＩＬＬＬＩ...