低强度激光缓解正畸疼痛的系统评价

目的评价低强度激光治疗（low-level laser therapy,LLLT）缓解正畸疼痛的治疗效果及风险。方法依据Cochrane Handbook和PRISMA statement的规范化要求,检索1980-2014年2月Cochrane CENTRAL、Medline、PubMed、Embase、CNKI和CBM数据库;同时手工检索纳入文献的参考文献及中文口腔医学杂志。偏倚风险评价由2位评价者依据Cochrane系统评价者手册5.1版独立完成。在独立进行数据提取后,运用Review Manager 5.1软件进行Meta分析。结果共纳入4个随机对照试验、1个不完全随机对照试验和3个临床对照试验,共计4个国家,644例患者。偏倚风险评价显示4个随机对照试验为中度偏倚风险,1个不完全随机对照试验和3个临床对照试验均为高度偏倚风险。Meta分析结果显示：LLLT使正畸后疼痛发生率降低了19%[RR=0.81,95%CI（0.69,0.96）,P=0.01]。与空白对照组相比,LLLT缩短了正畸疼痛达峰时间[MD=-0.42,95%CI（-0.74,-0.10）,P=0.009],使正畸疼痛呈现提前消退的趋势[MD=-1.37,95%CI（-3.37,0.64）,P=0.18],LLLT使6 h内的疼痛强度显著降低[MD=-1.97,95%CI（-2.37,-1.56）,P〈0.001],24 h内疼痛视觉模拟评分值仍持续降低[MD=-2.50,95%CI（-3.67,-1.32）,P〈0.001],48 h镇疼效果仍显著（MD=-2.83,95%CI（-3.90,-1.75）,P〈0.001]。结论由于纳入文献的方法学缺陷和偏倚风险限制,LLLT缓解正畸疼痛的证据存在,但尚显薄弱,需要更多大型优质的临床随机对照试验支撑。     

APRIL shRNA表达载体的构建与筛选

目的 构建并筛选有效的、编码短发夹RNA(shRNA)的增殖诱导配体(APRIL)基因特异性真核表达裁体.方法 分别设计、合成4对寡核苷酸单链,经退火、连接得到APRIL-shRNA双链,定向克隆至带有H1启动子、绿色荧先蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因和Neo基因的pGCsi-H1/Neo/GFP质粒裁体中,柏建4条含APRIL基因shRNA的pGCsi-H1/Neo/GFP-APRIL-shRNA真核表达裁体,转染高表达APRIL的结直肠癌细胞株SW480.G418筛选,荧光显微镜下现察转染效率,FQ-RT-PCR检测APRIL mRNA水平,Western印迹分析APRIL蛋白表达.结果 测序证实pGCsiH1/Neo/GFP-APRIL-shRNA(APRIL shRNA)构建成功,无碱基突变,4种不同shRNA质粒转染细胞后APRIL mRNA和蛋白表达差别有统计学显著性意义(P＜0.01).结论 成功地构建APRIL shRNA真核表达裁体,敲低效率85%以上,可用于后续的实验研究.     

上调CDX2基因表达对人胃癌SGC-7901细胞miRNA表达谱及生物学功能的影响

目的:筛选上调尾型同源盒基因2(caudal type homeobox gene 2,CDX2)基因表达时人的胃癌细胞SGC-7901中差异表达的miRNA并预测其靶基因,并观察其对胃癌细胞生物学行为的影响.方法:提取瞬时转染48 h后空载体组(转染P E G F P-N1组)和转染组(转染P E G F P-N1-C D X2组)细胞的总R N A,应用m i R N A芯片检测差异表达的miRNA,并通过Miranda、TargetScan、Mirtarget2软件预测其靶基因,通过Gene Ontology(GO)和KEGG pathway分析了解靶基因功能.CCK8法检测细胞增殖能力,划痕试验、Transwell小室、细胞黏附实验检测各组细胞体外迁移黏附能力.结果:PEGFP-N1-CDX2组较空载体组有59种差异表达的miRNA,其中25种miRNA发生2倍以上表达上调,34种miRNA发生2倍以上表达下调.通过Gene Ontology(GO)和KEGG pathway分析得到部分miRNA靶基因功能,这些靶基因参与了肿瘤的发生、发展、转移及预后.与对照组相比,PEGFP-N1-CDX2组的胃癌细胞生长、迁移和黏附能力均明显受到抑制(P<0.05).结论:上调CDX2基因表达可明显抑制人胃癌细胞SGC-7901的生长,抑制其迁移黏附能力,CDX2基因的抗肿瘤作用可能与miRNA有关.     

RNA干扰沉默增殖诱导配体基因对结肠癌细胞周期的影响

目的 探讨沉默增殖诱导配体(a proliferation-inducing ligand,APRIL)基因对人结肠癌SW480细胞增殖及细胞周期的影响.方法 将APRIL基因的小干扰RNA质粒载体(siRNA-APRIL)转染结肠癌SW480细胞株,以非特异性序列载体转染组(nontargeting control)及未转染组(nontransfected control)作为对照.Real-time PCR和Western blot评价APRIL沉默效率;CCK-8(cell counting kit-8)法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞周期变化;RT-PCR检测细胞周期调控基因p21及p27的表达.结果 与非特异性序列载体转染组及未转染组相比,siRNA-APRIL显著抑制APRIL mRNA及蛋白的表达(P＜0.05);siRNA-APRIL转染SW480细胞48 h、72 h和96 h后细胞增殖能力明显下降(P＜0.05);转染48 h,siRNA-APRIL组G0/G1期细胞比例增高,S期及G2/M期细胞比例减少,细胞凋亡的数量增加,同时p21及p27 mRNA的表达上调(P＜0.05);而上述指标两对照组之间比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 siRNA-APRIL能特异性抑制结肠癌SW480细胞APRIL的表达,并抑制细胞增殖,使细胞周期出现G0/G1期阻滞,其机制可能与上调p21和p27的表达有关.     

15例胸腺瘤的诊疗体会

目的：探讨胸腺瘤的诊断方法和合理治疗措施。方法：回顾分析1992至2000年间收治的15例胸腺瘤病例,结果：胸腺瘤除伴重症肌无力多无特异性临床症状和体征,所有病例均由辅助检查确诊。肿瘤获完全手术切除治疗效果良好,肿瘤未能完全切除或已无法手术病例则预后不良。结论：胸腺瘤的诊断主要依据胸部X线、CT扫描,术中所见及术后病理检查,手术切除是主要治疗方法,放、化疗有一定疗效。     

靶向增殖诱导配体的RNA干扰对人结直肠癌裸鼠移植瘤的影响

目的 利用RNA干扰(RNAi)技术观察增殖诱导配体(APRIL)siRNA(pGC-shAPRIL重组干扰质粒)对裸鼠SW480移植瘤的影响.方法 建立裸鼠人结直肠癌移植瘤模型,待皮下瘤块长到一定体积,全部裸鼠分为APRIL siRNA组、空载体组和磷酸盐缓冲液(PBS)组,分别进行瘤块内注射.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测移植瘤APRIL mRNA水平;瘤块和裸鼠肝肺苏木素-伊红(HE)染色病理检测;免疫组织化学法检测APRIL、核增殖抗原(Ki-67)、基质金属蛋白酶(MMP)-2蛋白表达.结果 APRIL siRNA组,与空载体组和PBS组比较,APRIL mRNA[(1.36±0.03)×10~7、(1.05±0.02)×10~8、(1.04±0.01)×10~8 copy/ml]和蛋白表达得分(2.00±0.40、7.00±0.45、8.00±0.40)明显降低(P<0.05);瘤块体积显著减小[(0.78±0.04)、(1.60±0.07)、(1.66±0.06)cm~3](P<0.05);与之相应Ki-67(2.00±0.45、8.00±0.54、7.00±0.44)和MMP-2(3.00±0.44、7.00±0.45、7.00±0.55)蛋白表达显著减弱(P<0.05).结论 RNAi敲低APRIL基因表达,抑制了裸鼠SW480移植瘤的生长和转移,打靶APRIL基因的RNAi技术有望成为人结直肠癌的治疗途径.     

Argonaute蛋白在染色质隔离子形成中的作用

RNA干扰(RNAi)是一保守的沉默机制,可以改变染色质结构发挥沉默效应。其中RISC(RNA-induced silencing complex)和miRNP（microRNA effector ribonucleoprotein）是RNA干扰和microRNA途径发挥沉默效应的关键,其核心成分是Argonaute蛋白。染色质隔离子是真核生物基因组表达基因与非表达基因的边界序列,能促进形成更高级核结构,所形成的DNA功能区可行使不同的转录调控作用。最近研究证实Argonaute蛋白影响染色质隔离子的核结构并可能作为核结构的调节者影响基因表达的整体改变。     

痰中增殖诱导配体mRNA定量测定对非小细胞肺癌的诊断价值

目的 建立实时荧光定量聚合酶链反应(RFQ-PCR)检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者痰中增殖诱导配体(APRIL)mRNA含量的方法,探讨痰脱落细胞APRIL mRNA表达在NSCLC诊断中的意义.方法 对2007年8月至2008年5月南通大学附属医院71例NSCLC患者和62例肺部良性病变患者痰中APRIL mRNA进行检测,同时取65名健康成人痰做对照.用RFQ-PCR技术实时检测PCR产物的荧光强度,由软件自动计算出待测样本中靶基因mRNA的准确含量,以靶基因和内参β2-微球蛋白(β2-M)mRNA含量的比值作为评价其表达水平的指标,并与细胞学检查结果进行比较.计量资料采用t检验,所得结果用x±s表示;对计数资料采用X2检验.结果 RFQ-PCR法检测APRIL mRNA含最的线性范围为38～3.8×106copies/ul,批内和批间变异系数(CV)分别为8.5%和13.6%.NSCLC组痰中APRIL mRNA表达水平显著高于肺部良性病变组和健康对照组(t值为10.50和11.32,P<0.01);良性病变组与健康组比较差异无统计学意义(t=0.379,P>0.05).以健康组APRIL mRNA的x±2s为cut-off值,肺癌组APRIL mRNA表达的阳性率为81.7%(58/71),明显高于肺部良性病变组的3.2%(2/62)和健康对照组的1.5%(1/65).NSCLC组痰中APRIL mRNA的表达与性别、年龄、吸烟史、TNM分期及淋巴结转移尤关(t值分别为1.700、1.014、1.484、1.298及1.186,均P>0.05),与病理分型和肿瘤部位有关(t值为1.650和1.873,均P<0.05).RFQ-PCR阳性率为82%(58/71),高于细胞形态学阳性率的14%(10/71),差异有统计学意义(X2=67.68,P<0.01).结论 RFQ-PCR检测痰中APRIL mRNA含量具有较高的敏感度和特异度,有助于NSCLC的临床诊断.     

机械呼吸致2例儿童气管疤痕狭窄的外科治疗

气管疤痕狭窄为临床难治病症 ,治疗较为棘手 ,尤其对于儿童病例。我院于 2 0 0 1年 7月至 11月 ,为 2例气管插管 (经口腔或气管切开插管 )机械呼吸治疗后并发气管疤痕性狭窄的患儿进行了手术治疗 ,取得了较好的临床效果 ,报道如下。临床资料　例 1,女 ,14岁。因敌敌畏中毒 ,于 2 0 0 1年 7月 2 5日急诊入院。入院时已发生急性呼吸功能衰竭而紧急经口气管插管 ,行机械呼吸及解毒、维护机体器官功能等综合治疗。病情明显好转于 7月 31日脱机拔出气管插管 ,1周后出院。出院后 4日即出现呼吸困难、喘鸣 ,在门诊行抗炎、口服强的松等治疗 ,症状无…