Cross-host evolution of severe acute respiratory syndrome coronavirus in palm civet and human

The genomic sequences of severe acute respiratory syndrome coronaviruses from human and palm civet of the 2003/2004 outbreak in the city of Guangzhou, China, were nearly identical. Phylogenetic analysis suggested an independent viral invasion from animal to human in this new episode. Combining all existing data but excluding singletons, we identified 202 single-nucleotide variations. Among them, 17 are polymorphic in palm civets only. The ratio of nonsynonymous/synonymous nucleotide substitution in palm civets collected 1 yr apart from different geographic locations is very high, suggesting a rapid evolving process of viral proteins in civet as well, much like their adaptation in the human host in the early 2002–2003 epidemic. Major genetic variations in some critical genes, particularly the Spike gene, seemed essential for the transition from animal-to-human transmission to human-to-human transmission, which eventually caused the first severe acute respiratory syndrome outbreak of 2002/2003.     

克山病病区粮食和酱块对鸡骨关节和心脏的影响

目的探讨克山病病区低硒玉米和酱块对鸡骨关节和心脏病理损伤的影响。方法将“京白905”鸡雏80只,按体重随机分为4组,以克山病病区玉米及酱块为原料,配比不同氨基酸合成饲料喂养。饲养4个月后处死,光镜下观察鸡骨关节和心脏病理改变。结果鸡骨关节病变实验组检出率分别为33．33％、22．22％、22．22％,对照组检出率33．33％。组间差异无统计学意义（x2=0．825,P〉0．05）。心肌病变实验组检出率分别为6．67％、11．11％、11．11％,对照组无病变。组间差异无统计学意义（x2=0．543,P〉0．05）。结论克山病病区粮食可导致鸡骨关节和心肌出现病理性损伤。克山病病区酱块可能为保护因素。     

主动脉内球囊反搏临床应用时机的选择与效果分析

目的:探讨主动脉内球囊反搏(IABP)在危重心脏病患者中应用时机的选择对治疗效果的影响。方法:分析48例危重心脏病患者并发心源性休克或低心排血量综合征(低心排)时应用IABP辅助治疗的临床效果以及影响预后的因素。结果:48例患者在应用IABP后血流动力学均有一定的改善;其中早期安装IABP的31例患者,死亡3例,病死率9.7%;手术或介入治疗后常规药物治疗(晚期)12～24 h后安装IABP的17例患者中有8例死亡,病死率47.1%。结论:IABP是一种简单有效的循环辅助手段,对危重心脏病患者改善血流动力学有一定效果,但安装时机的选择对治疗效果有明显的影响。IABP的安装应宁早勿晚。     

克山病患者肝炎及柯萨奇病毒感染的观察

目的 通过测定慢型、潜在型克山病患者血清中肝炎及柯萨奇病毒抗体的水平，探讨克山病病毒感染学说。方法 选择黑龙江省富裕县克山病病区慢型、潜在型克山病患者34例，健康人32例。病毒抗体的测定采用ELISA方法，统计学使用病例对照研究的方法。结果 C型肝炎抗体(HCV—IgM)阳性的OR是9．54(95％信赖区间1．07～∞)，有统计学意义。结论 从C型肝炎病毒抗体(HCV—IgM)的阳性率在克山病患者中明显增高的这一结果推测，C型肝炎病毒的感染可能在克山病的发生、发展中起一定的作用。     

抗环瓜氨酸肽抗体检测在类风湿关节炎中的诊断及预后意义探讨

目的 评价抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体和类风湿因子(RF)在鉴别类风湿关节炎(RA)和其他风湿性疾病中的意义．探讨RA骨侵蚀与上述两种抗体之间的相关性。方法采用横断面研究，在125例RA．56例其他风湿性疾病，55例非风湿性疾病中检测上述两种抗体，其中抗CCP抗体采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法．IgM-RF采用速率比浊法。分析RA骨侵蚀与上述两种抗体之间的相关性。结果IgM-RF诊断RA的敏感性较抗CCP抗体高(RF58．4％，抗CCP抗体54．4％)(P=0．57)；但抗CCP抗体有更高的诊断特异性(抗CCP抗体94．6％，IgM-RF84．7％)(P=0．015)，且两种检测方法之间无相关性。联合检测抗CCP抗体和IgM-RF有很高的特异性98．2％．较单独检测IgM-RF有更高的阳性预测值(PPV)95．7％(P=0.019)．阴性预测值(NPV)有下降57.7％(P=-0.213)。抗CCP抗体阳性、IgM-RF阳性与RA骨侵蚀相关。结论抗CCP抗体与IgM-RF比较对RA有良好的诊断敏感性与特异性．可视为RA新的血清学诊断指标。抗CCP抗体与RA骨侵蚀的关系值得进一步研究。     

催老小鼠重要脏器氧化水平和抗氧化能力的变化

目的　研究D 半乳糖催老小鼠心、肝、脑、肺、肾等重要脏器氧化水平和抗氧化能力的改变 ,并对其进行比较。　 方法 　 2 0只 2月龄雄性小鼠随机分为催老组和正常对照组 ;催老组每日皮下注射D 半乳糖 10 0mg·kg-1,正常对照组每日皮下注射等量生理盐水 ,持续 42d。以丙二醛 (MDA)含量反映氧化水平 ,超氧化物歧化酶(SOD)活性反映抗氧化能力。　 结果 　与正常对照组相比 ,D 半乳糖催老组小鼠心、肝、脑、肺、肾等重要脏器MDA含量明显增加 (P <0 0 1) ;肝、脑、肺和肾的SOD活性显著降低 (P <0 0 5 ) ,而心脏SOD活性无明显变化。　 结论　D 半乳糖催老小鼠心、肝、脑、肺、肾等重要器官氧化水平增加 ;肝、脑、肺、肾等器官抗氧化水平下降 ;各器官在改变程度上存在一定差异     

老年急性冠脉综合征患者炎症负荷指标与可溶性CD40L表达分析

目的分析老年急性冠脉综合征（ACS）患者炎症负荷指标与可溶性CD40配体（CD40L）表达的相关性。方法连续选择近期来我院就诊的老年胸痛患者149例,均接受选择性冠状动脉造影检查,结合临床表现分为急性心肌梗死组（AMI,39例）、不稳定型心绞痛组（UAP,45例）、稳定型心绞痛组（SAP,30例）和排除冠心病组（对照组,35例）,同时抽血检测血清CD40L和高敏C反应蛋白（hsCRP）水平。结果老年UAP和AMI患者血清CD柏L和hsCRP水平均高于SAP组和对照组（P均〈0．05～0．01）,老年ACS患者血清CD40L和hsCRP水平存在明确相关性（P〈0．01）。结论老年ACS患者存在显著的炎症负荷指标与可溶性CD40L水平增高,两者血清浓度表达明显相关;CD40L通路可能是传递炎症负荷信息的重要途径。     

二十二碳六烯酸增加大鼠冠状动脉平滑肌细胞大电导钙离子激活钾离子流的机制

Objective To investigate the mechanism of enhanced large conductance calciumactivated potassium channel currents (BK) in coronary smooth muscle cells (SMCs) by docosahexaenoic acid (DHA). Methods Coronary SMCs were isolated by enzyme digestion. Potassium channels in coronary SMCs were identified by applications of different potassium blockers. Effects of DHA and its metabolite 16,17-epoxydocosapentaenoic acid (16,17-EDP) on BK channels in the absence and presence of cytochrome P450 epoxygenase inhibitor SKF525A were studied by patch clamp in whole-cell configuration. Results BK channels were widely distributed in SMCs, and BK currents in normal SMCs accounted for (64.2±2.7)%of total potassium currents(n =20). DHA could activate BK channels, and its 50% effective concentration (EC50) was (0.23±0.03)μmol/L, however, the effect of DHA on BK channels was abolished after SMCs were incubated with cytochrome P450 epoxygenase inhibitor SKF525A. 16,17-EDP, a metabolite of DHA, could reproduce the effects of DHA on BK channels, and its EC50 was (19.7± 2.8) nmol/L.Conclusion DHA and metabolites can activate BK channels and dilate coronary arteries through activating cytochrome P450 epoxygenase pathway.     

过氧化还原蛋白6对细菌脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤氧化应激的保护作用

目的探讨过氧化还原蛋白Peroxiredoxin(Prdx)6对细菌脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤氧化应激的作用及机制。方法应用PCR法对Prdx6基因敲除小鼠行基因型鉴定并应用免疫组织化学法测定Prdx6蛋白在肺脏的表达。将雄性Prdx6基因敲除型小鼠（18只）按随机数字表法分入Prdx6敲除型对照组（9只）、Prdx6敲除型LPS 24 h组（9只）;将雄性野生型C57BL/6J小鼠（18只）按随机数字表法分入野生型对照组（9只）、野生型LPS 24 h组（9只）。各LPS组小鼠气管滴注LPS(5 mg/kg)制备急性肺损伤模型,于给药后24 h分别行肺脏病理检测,BCA法测定BALF内蛋白浓度,比色法测定肺脏总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力和过氧化氢、羰基化蛋白和总抗氧化能力(TAOC),TBA法测定丙二醛的表达。结果Prdx6基因敲除小鼠肺组织免疫组织化学法未检测到Prdx6蛋白表达。两种属小鼠LPS组肺脏病理可见炎症细胞浸润、肺泡间隔增厚及肺泡内出血,Prdx6敲除型较野生型小鼠病理损伤更重。LPS刺激后,野生型LPS 24 h组BALF内的蛋白浓度为(441±54) mg/L,高于野生型对照组的(168±20) mg/L(t=-4.71,P＜0.01);Prdx6敲除型LPS 24 h组为(770±66)mg/L,高于野生型LPS 24 h组（t=-3.69,P＜0.01）。野生型LPS 24 h组T-SOD为(16.0±1.2) U/mg,低于野生型对照组的(26.5±3.9) U/mg(t=-6.22,P＜0.01);Prdx6敲除型LPS24 h组为(14.5±5.3)U/mg,与野生型LPS 24 h组差异无统计学意义（t=-0.56,P=0.60）。野生型LPS 24 h组肺脏过氧化氢和丙二醛[分别为(52.3±7.8)nmol/g和(3.3±0.5)nmol/mg]高于野生型对照组[分别为(29.5±3.2)nmok/g和(1.6±0.8)nmol/mg],差异有统计学意义（t值分别为-4.25和-5.94,均P＜0.01）,Prdx6敲除型LPS 24 h组[分别为(73.5±12.4)nmol/g和(5.9±0.9)nmol/mg],均高于野生型LPS24 h组（t值分别为-3.01和-6.01,均P＜0.05）。野生型LPS24 h组肺脏蛋白羰基为(6.9±1.2)nmol/mg,与野生型对照组的(6.1±0.9)nmol/mg差异无统计学意义(t=-1.62,P=0.15);Prdx6敲除型LPS 24 h组为(8.9±0.9)nmol/mg,高于野生型LPS 24 h组(t=-2.76,P＜0.05)。野生型LPS 24 h组肺脏TAOC为(4.7±0.6) U/mg,低于野生型对照组的(6.5±0.4) U/mg(t =3.35,P＜0.01);Prdx6敲除型LPS 24 h组为(3.9 ±0.4) U/mg,低于野生型LPS24 h组(t =2.44,P=0.04)。Prdx6敲除型对照组与其野生型对照组以上参数表达差异无统计学意义。结论在LPS诱导的肺损伤中,Prdx6基因缺失增加了活性氧的产生,加重了氧化应激反应,从而使肺损伤恶化。     

转化生长因子-β1对大鼠脑膜间皮细胞结缔组织因子表达的影响

目的 观察转化生长因子-β1（TGF-β1）对大鼠软脑膜间皮细胞（RLMCs）结缔组织生长因子（ CTCF）表达的影响.方法 体外培养RLMCs,并将其分为4组：（1）0组（正常对照组）：用无血清培养基（FSM）培养细胞;（2）1组：用含TGF-β11 ng/ml培养细胞;（3）2组：用含TGF-β1 2 ng/ml培养细胞;（4）3组：用含TGF-β14 ng/ml培养细胞;各组分别在TCF-β1刺激6、12及24 b后,采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法测定CTCF mRNA水平;蛋白免疫印迹（Westem blot）测定CTCF蛋白表达.数据以平均值±标准差（-χ±s）表示,各个浓度点组间比较采用单因素方差分析（One-way ANOVA）,两两比较采用最小显著法（LSD）检验,以P〈0.05有统计学意义.结果 在6、12及24 h分别以TCF-β1 1ng/mL、2 ng/mL、4 ng/mL处理,CTGF mRNA表达水平与对照组比较,差异有显著性（F6h=46.549、F12h= 287.098、F24h=109.202,P均〈0.001）,呈剂量依赖性,以TGF-β1处理12 h组CTGF mRNA表达差异明显.western blotting：正常对照组RLMCs细胞和不同浓度的TGF-β1刺激后均表达CTGF蛋白,在TGF-β1刺激6、12及24 h后,各组均随着浓度的增加而增加,差异有显著性（F6h= 52.988、F12h= 95.331、F24h=157.107,P均〈0.001）,呈剂量依赖性,以TGF-β1处理6h组CTGF蛋白表达差异明显.结论 TGF-β1能诱导RLMCs中CTGF通路激活.TGF-β1刺激RLMCs中CTGF mRNA和蛋白的表达,而且随浓度增加而显著.CTGF可能作为神经系统疾病中抑制脑膜纤维化的靶点而进一步研究.