重庆市渝中区老年人社区卫生需求及就医行为调查

目的 了解重庆市渝中区老年人口的社区卫生服务需求状况和就医行为,分析其影响因素,为进一步推进分级诊疗提供依据.方法 采用多阶段随机抽样方法抽取重庆市渝中区4个街道社区卫生服务中心410名60岁及以上于2015年6月就诊的老年人,通过问卷调查其人口学基本信息、社区卫生服务认知和需求、医疗费用、就医行为等并进行分析.结果 获得有效问卷402份,有效率为98.05％.402名老年人中,76.37％患病后首选社区卫生服务中心就诊;患冠心病、在社区卫生服务中心的候诊时间、每个月的医疗支出费用、社区卫生服务中心的设施和环境,以及是否用医疗保险支付费用成为影响老年人就医行为的主要因素.结论 社区卫生服务中心应充分利用自身方便快捷的优势,根据不同病种和需求的患者,提供相应的特色服务,同时增加公共卫生投入,提高综合诊疗水平,从根本上改变患者的就医习惯.     

HSV-2糖蛋白D在昆虫-杆状病毒表达系统中的表达及免疫原性分析

目的：在昆虫细胞中表达2型单纯疱疹病毒（HSV-2）糖蛋白D（gD2）胞外区基因,检测其免疫原性。方法：以HSV-2病毒基因组为模板,PCR扩增得到gD2片段,构建至杆状病毒质粒Bacmind中,转染sf9细胞,包装重组杆状病毒,收集后连续感染sf9细胞,收获第4代重组杆状病毒（P4）,通过Western blotting法鉴定蛋白表达情况,采用空斑实验检测重组病毒滴度,将P4代重组病毒作为种子大量感染sf9细胞,上清经镍柱亲和层析进行纯化,将纯化后的蛋白在第0、2和4周免疫BALB/c小鼠（gD2组）,以PBS作为阴性对照（PBS组）,ELISA检测小鼠血清中gD2特异性IgG滴度。结果：PCR鉴定和DNA测序,重组表达质粒gD2-Bacmind构建正确,空斑实验检测重组病毒滴度为2.0×10⁹ pfu·mL^-1,纯化的gD2重组蛋白在相对分子质量37000处出现目标条带,纯度达90%以上。第6周gD2组小鼠免疫血清中gD2特异性IgG抗体滴度Log10平均值达到4.34,与PBS组比较差异有统计学意义（P<0.01）。结论：利用昆虫-杆状病毒表达系统表达的gD2胞外区蛋白具有良好的免疫原性,可作为HSV-2疫苗的候选。     

丝氨酸羟甲基转移酶2在小鼠肝再生过程中的变化规律及作用

目的 探索丝氨酸羟甲基转移酶2(serine hydroxymethyl transferase 2,SHMT2)在小鼠肝再生过程中的表达规律,以及其对小鼠肝再生是否有促进作用.方法 SPF级C57BL/6小鼠120只分为肝切除组(2/3 PH)、假手术组(SHAM)、腺病毒干扰组(siSHMT2)及注射生理盐水对照组(Control),每组30只;肝切除组下设1、3、5、7、9d5个时相点,每个时相点6只.小鼠肝切除之后分别取1、3、5、7、9d的肝脏组织及血清,采用qPCR、Western blot和免疫组化检测SHMT2及其下游分子甘氨酸脱氢酶(glycine dehydrogenase,GLDC)的变化规律、血清中丙氨酸转氨酶(alanine transaminase,ALT)和谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST)的浓度.取注射腺病毒干扰SHMT2第5天的肝脏组织,通过Westernblot和观察荧光强度,确定转染效果,并检测血浆中ALT和AST水平,免疫组化检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA).结果 SHMT2及其下游分子GLDC在小鼠肝再生的后第5、7天表达最高,qPCR检测结果显示,SHMT2第5天的表达量是第1天的1.63倍(P＜0.05).在干扰SHMT2之后,小鼠第5天再生肝脏的质量由(0.79±0.13)g降低至(0.63 ±0.ll)g(P ＜0.05),再生度由(36.37±2.21)％降低至(31.33±1.92)％,肝指数由(3.76±0.44)％降低至(3.13±0.29)％,并且肝功能指标ALT由(70.00±9.52) U/L升高至(154.15±16.49) U/L,AST由(140.09±32.85) U/L升高至(403.41±68.63) U/L(P＜0.05),PCNA阳性率从(53.6±2.3)％降低至(39.0±3.2)％(P＜0.05).结论 SHMT2在肝脏再生的后期高表达,促进残肝的再生,其机制可能与增强肝脏对缺血、缺氧的耐受,提高三磷酸腺苷水平有关.     

一例染色体复杂易位致胎儿多发畸形的遗传学诊断

目的: 对一例染色体复杂易位致多发畸形胎儿进行遗传学分析和诊断。方法: 对一例多发畸形胎儿行G显带染色体核型分析、单核苷酸多态性微阵列（SNP array）及荧光原位杂交（FISH）检测。胎儿父母行外周血染色体核型分析及FISH检测。结果: 胎儿的羊水染色体核型为46,XN,t（12;13）（q22;q32）。SNP array显示胎儿存在1q42.13q44重复（20 192 kb）及15q26.1q26.3缺失（13 293 kb）,核型分析与基因芯片结果不一致。FISH验证了SNP array的结果。母亲外周血FISH结果确认为隐匿性46,XX,t（1;15）（q42.1;q26.1）携带者,而胎儿遗传了其中一条衍生的15号染色体der（15）t（1;15）（q42.1;q26.1）。即胎儿遗传了父亲的t（12;13）（q22;q32）平衡易位及母亲的隐匿性平衡易位形成的衍生15号染色体。结论: 1q42.13q44重复和15q26.1q26.3缺失是导致本例胎儿畸形的遗传学病因,产前诊断时多种遗传学技术联合应用可为临床提供准确的诊断。     

慢性丙型肝炎患者胎球蛋白A变化及其与胰岛素抵抗关系研究

背景　丙型肝炎病毒（HCV）感染引起的慢性感染性肝脏疾病与胰岛素抵抗（IR）存在一定联系,但胎球蛋白A（fetuin-A）在慢性丙型肝炎（CHC）患者发生IR的研究却鲜见报道。目的　探究CHC患者fetuin-A变化及其与IR的关系。方法　回顾性选取2009年6月—2011年2月温州医科大学附属第一医院收治的符合研究标准的CHC患者315例,作为CHC组;并依据BMI将CHC组患者分为BMI正常亚组（BMI：18~25 kg/m2,n=78）和BMI升高亚组（BMI>25 kg/m2,n=237）。选取同期在本院体检健康者100例为健康对照组。收集CHC组及健康对照组的一般资料（包括性别、年龄、体质量、身高、BMI）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、γ-谷氨酰转肽酶（GGTP）、HCV-RNA、总胆红素、血红蛋白、白细胞计数、血小板计数、清蛋白（Alb）、总蛋白（TP）、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、三酰甘油、空腹血糖、空腹胰岛素、空腹C肽、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、胰岛素B细胞功能指数（HBCI）、空腹B细胞功能指数（FBCI）、胰岛素敏感指数（IAI）、fetuin-A、AST/ALT（AAR）、AST/血小板计数（APRI）。结果　CHC组ALT、AST、空腹胰岛素、空腹C肽、HOMA-IR、fetuin-A、AAR、APRI高于健康对照组,HDL-C低于健康对照组（P<0.05）。BMI正常亚组空腹胰岛素、HOMA-IR、HBCI、FBCI、fetuin-A低于BMI升高亚组（P<0.05）。CHC患者fetuin-A与BMI（r=0.210,P=0.031）、HOMA-IR（r=0.389,P=0.023）呈正相关,与ALT、AST、GGTP、空腹胰岛素、空腹C肽、HDL-C、空腹血糖、HBCI、FBCI、AAR、APRI无线性相关关系（r值分别为0.102、0.184、0.276、0.162、0.151、0.123、0.179、0.015、0.049、0.017、-0.038,P值分别为0.335、0.181、0.104、0.124、0.154、0.337、0.327、0.883、0.645、0.923、0.830）。结论　CHC患者体内存在IR和部分血脂代谢紊乱,fetuin-A升高,且fetuin-A与IR关系密切。     

BC200通过介导脑胶质瘤细胞干性的维持抑制替莫唑胺的促凋亡作用

目的：探讨血清长链非编码RNA BC200在脑胶质瘤干细胞（GSCs）中的作用及相关作用机制。方法：神经干细胞培养液培养脑胶质瘤U87 MG细胞,并提取成球生长的GSCs;采用免疫荧光法检测GSCs干细胞标志性分子CD133和Nestin;小分子RNA（siRNA）转染沉默GSCs中BC200表达;替莫唑胺（TMZ）200 μmol·L-1处理GSCs 24 h,光镜下观察TMZ对GSCs悬浮细胞球形态的影响;采用Western blot方法检测CD133、Bax、Bcl-2和cleaved caspase-3的表达变化。结果：分离提取的GSCs球状生长,细胞球表面CD133和Nestin呈阳性表达。TMZ处理GSCs 24 h,GSCs成球能力略微下降,未见细胞球状状态明显离散,Bax、cleaved cas-pase-3、Bcl-2未有明显变化（均P＞0.05）。沉默BC200后GSCs CD133表达显著下降（P＜0.05）。BC200沉默后,TMZ处理GSCs发现其成球能力明显减弱、细胞分散;cleaved caspase-3和Bax分别上调（45.36%±4.25%）和（63.23%±5.12%）,Bcl-2下调（31.22%±3.80%）,均P＜0.01。结论：BC200能够维持脑胶质瘤U87 MG细胞的干性,该效应可促进细胞对TMZ诱导凋亡的抵抗。     

4～13岁儿童干眼患病现状及影响因素分析

目的 探讨延安市人民医院眼科门诊儿童干眼的患病情况及影响因素。方法 随机选择在我院眼科门诊就诊的318例延安市区4～13岁儿童,对其行眼部专科检查及问卷调查。运用Logistic回归法分析儿童干眼发病的危险因素。结果 参与调查的318例儿童分两组,每组159例,其中总的干眼患病为18.9%,其中9～13岁儿童与4～8岁干眼患病无统计学差异(22.6% vs 15.1%,χ²=2.958,P=0.089)。患有干眼的儿童临床症状以瞬目异常最常见(80%),其次为畏光(30%)、视物模糊(20%)、眼痛(10%)。回归分析结果为:每日使用视频终端3 h以上、屈光不正、长期暴露在有风环境下以及过敏性结膜炎是该地区儿童干眼发病的危险因素。结论 儿童人群中合并干眼的人数较多,其发生与长时间使用视频终端设备、屈光不正等因素相关。此现象应引起家长及医疗机构重视,应加强预防儿童干眼发生相关知识的宣传。     

常染色体显性遗传性脑动脉病伴皮质下梗死和白质脑病家系的临床随访研究

目的通过3个常染色体显性遗传性脑动脉病伴皮质下梗死和白质脑病(CADASIL)家系的临床随访,分析CADASIL表型差异。方法选择2012～2015年徐州医科大学附属医院就诊的3个CADASIL家系的7例患者,进行NOTCH3基因的检测,分析临床症状及影像学检查结果,并完成3年左右的随访。结果家系1(p. C67S)的首发症状多为无先兆偏头痛,并可在头痛10年后发生缺血性卒中;家系2(p. G149V)均为头晕起病,早期即出现认知障碍及球麻痹;家系3(p. R182C)表现为缺血性卒中反复发作。随访发现影像学表现与病情进展基本一致,但个体化特征明显。结论 CADASIL早期症状无特异性易被误诊,家系间及家系内患者的表型及病程演变各有不同,影像学检查对早期诊断敏感性高,却不能完全反映病情的变化。     

非线性动力学方法可预警直立倾斜试验中血管迷走性晕厥的发生

目的 量化评价血管迷走性晕厥血压下降过程中的脑血流自动调节功能,用于在晕厥相关症状出现前预测其发生。方法 选取20位直立倾斜试验证实的血管迷走性晕厥患者,另选取20名正常对照者。所有被试在直立倾斜试验前都要平卧30 min,同时使用TCD 2 MHz Doppler监测探头监测双侧大脑中动脉血流速度,心电监护监测心率,使用连续每搏血压监测指端无创连续血压。在进行10 min基线数据采集后,被试继续进行70°直立倾斜试验,每位被试至少直立30 min,或在30 min内出现晕厥发作或晕厥前兆时或当被试出现突发血压下降≥20 mmHg时终止检查。利用多模态血流血压分析(multimodal pressure-flow analysis,MMPF)的非线性动力学方法对不同时相的脑血流自动调节功能进行分析。利用信号分析的方法将脑血流信号记录中的重搏切迹深度量化测量,定义新的预测参数晕厥指数(syncope index,SI)用于评估血压变化时的脑血管张力。结果 病例组在血管迷走性晕厥发生时的晕厥指数与倾斜试验开始时的基线数值相比存在明显下降(0.16±0.10 vs. 0.27±0.10,P<0.01), 而对照组在倾斜试验结束时的晕厥指数与倾斜试验开始时的基线数值相比差异无统计学意义。对于血管迷走性晕厥组的患者,在晕厥发生前3 min,搏动指数与基线数据相比未见明显变化(P>0.05),但晕厥指数已出现明显下降(0.23±0.07 vs.0.29±0.07,P<0.01)。结论 当血管迷走性晕厥发生时脑血流动态调节功能衰竭,小血管张力的丧失与脑血流自动调节功能的丧失是相关的;晕厥指数可以作为提前预测血管迷走性晕厥发生的一个有用的参数。     

客观结构化临床考试在影像技术专业本科生实习考核中的应用

目的探讨客观结构化临床考试(OSCE)在影像技术专业本科生实习考核中的应用价值。方法以2016级影像技术专业在放射科实习的26名本科生为研究对象,开展OSCE,对考核难度系数、信度、效度、成绩及学生对OSCE的认同情况进行分析。结果考核难度系数平均为0.87,信度α=0.882,效度系数r=0.963,参与考核的学生成绩为(83.6±6.7)分,参与考核的学生普遍认为OSCE能够促进自己不断更新知识,提高操作水平。结论 OSCE在影像技术专业实习考核中的应用,能够客观、有效地反映学生专业能力,有利于提高人才培养质量。