三种细菌生物被膜中超广谱β-内酰胺酶的检测

目的检测肺炎克雷伯氏菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌三种细菌的生物被膜(biofilm,BF)中超广谱β-内酰胺酶(Extended-spectrumβ-lactamases,ESBLs)的产生。方法用改良平板培养法在硅胶膜上建立肺炎克雷伯氏菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌BF的体外模型。用银染法及扫描电镜对BF进行鉴定。用双纸片试验检测ESBLs,等电聚焦电泳测定β-内酰胺酶的等电点。结果三种细菌的各30株中,BF肺炎克雷伯氏菌组(A2组)中ESBLs的产生率最高(14株,46.7%),其浮游菌组(A1组)检出8株(26.7%);BF大肠埃希氏菌组(B2组)有10株(33.3%)产生ESBLs,其浮游菌组(B1组)检出6株(20.0%);BF铜绿假单胞菌组(C2组)有3株(10%)产ESBLs,其浮游组(C1组)为2株(6.7%)。浮游菌组中ESBLs的产生率低于BF菌组,其中肺炎克雷伯氏菌及大肠埃希氏菌的BF组和浮游菌组的检出率之间有显著差异(P<0.05)。A2组共检出14株产生ESBLs,有4种ESBLs,等电点分别为8.2(4株)、7.6(8株)、6.3(1株)和5.6(1株),A1组检出8株产生ESBLs,为3种ESBLs,等电点分别为8.2(2株)、7.6(5株)和5.6(1株);B2、B1组检出2种相同等电点分别为7.6(B1组4株,B2组6株)、8.2(B1组2株,B2组4株)的ESBLs;C1、C2组检出一种等电点为6.4的ESBLs(C1组2株,C2组3株)。以pI为7.6的β-内酰胺酶的检出率最高,其     

美托洛尔两种光学异构体代谢的酶动力学研究

目的：建立一种用AUC对酶动力学模型参数进行估算的方法，用酶动力学模型对美托洛尔（Met）两种光学异构体在大鼠肝脏的药物代谢进行研究。方法：用数学方法推导参数估算法公式；用大鼠肝切片孵育技术，对Met两种光学异构体的三种不同剂量（5、10、30μmol.L^-1）的药物浓度进行分析。并用本的参数估算法求出各自的酶动力学参数。结果：两种异构体，三种不同剂量的AUC有显性的统计学意义（P＜0．01），R－（＋）－Met的Vm,Km值分别为5．7471μmol.L^-1.h^-1和6．7724μmol.L^-1，S－（－）－Met的Vm,Km值分别为6．4350μmol.L^-1.h^-1和18．3404μmol.L^-1。结论：酶动力学模型适用于脏代谢的药动学研究。两种异构体的代谢具有明显差异。存在代谢的右旋异构体选择性。     

原花青素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的：观察原花青素（procyanidin,PC）对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用，方法：结扎大鼠冠状动脉左前降支（LAD）40min，复灌120min后复制出大鼠心肌缺血再灌注损伤模型，观察PC对大鼠心肌酶学，心梗面积和脂质过氧化的影响。结果：PC能减少心肌细胞磷酸肌酶激酶（CPK）和乳酸脱氢酶（LDH）的释放，明显缩小心肌梗死面积，能显提高大鼠血清和心肌组织中超氧化物歧化酶（SOD）活性，降低心肌和血清脂质过氧化代谢产物丙二醛（MDA）含量，结论：PC对大鼠心肌缺血再灌注损伤有保护作用，其机制可能与清除自由基，抑制脂质过氧化反应有关。     

中药复方重肌灵免疫调节作用及其机制的实验研究

目的：探讨中药复方重肌灵免疫调节作用及其机理。方法：建立Lewis大鼠EAMG模型。采用3H—TdR法检测重肌灵对Cona、脂多糖(LPS)诱导正常BALB／C小鼠脾淋巴细胞增殖反应的影响，及重肌灵对ConA、N2AchR诱导EAMG大鼠淋巴结细胞增殖反应的影响。ELISA法测定重肌灵对EAMG大鼠血清中N2AchRab滴度及血清中IFN—γ水平的影响。结果：重肌灵对ConA、LPS诱导正常ALB／C小鼠脾淋巴细胞增殖反应有明显的促进作用(P＜0.05)；对ConA诱导EAMG大鼠淋巴结细胞增殖反应有明显的促进作用(P＜0．01)，而对N2AchR诱导EAMG大鼠淋巴结细胞增殖反应有明显抑制作用(P＜0．01)。重肌灵对EAMG大鼠血清中N2AchR滴度及血清IFN—γ水平有明显下调作用(P＜0．01)。结论：重肌灵防治EAMG不是通过免疫抑制，而是利用它的免疫调节作用。机理可能是通过下调IFN－γ水平，而抑制N2AchR抗原诱导特异性免疫反应，而起到治疗作用。     

E试验监测重症监护病房中400株革兰氏阴性杆菌的耐药性

目的 调查我院监护病房革兰氏阴性杆菌耐药状况及超广谱β—内酰胺酶(ESBLs)菌株的发生率，了解四年来革兰氏阴性菌对抗菌药物的耐药性变迁。方法 用E试验法测定400株革兰氏阴性杆菌对11种抗生素的最低抑菌浓度(MIC)。并用头孢他啶／头孢他啶 克拉维酸E试验酶试条检阅细菌产ESBL的情况。结果 亚胺培南对所有受试菌保持最高抗菌活性，细菌耐药率仅为7．5％；头孢哌酮／舒巴坦、阿米卡星、哌拉西林／三唑巴坦、头孢吡肟和头孢他啶仍有较高抗菌活性，耐药率分别为16．0％、20．0％、22．5％、23％和26．8％；其它抗生素耐药率在42．8％—46.8％之间。用头孢他啶／头孢他啶 克拉维酸筛选大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌ESBLs产生菌27株，检出率分别为40．9％和27．3％。体外抗菌活性最强的是亚胺培南，所有大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌ESBLs菌株都对之敏感。含酶抑制剂抗生素哌拉西林／三唑巴坦和头孢哌酮／舒巴坦对产ESBLs株保持较高体外抗菌活性，但2001年分离菌耐药率有所增加。四年资料相比，所测细菌对头孢哌酮／舒巴坦耐药率由1998—2000年的11％—14％增加至2001年的26％，大肠埃希氏菌对环丙沙星耐药率由1998—1999年的45.2％上升至2000—2001年的79.6％，细菌对其它抗菌药物耐药率变化不大。结论 亚胺培南抑菌率最高，对ESBLs产生菌有较强的抗菌活性，而抗菌药物(尤其是加酶抑制剂抗生素和喹诺酮类药物)的滥用，已造成细菌对其耐药率升高，且对付产酶耐药株感染逐渐失去优势。     

肺炎克雷伯氏菌SHV-28编码基因的克隆、测序及基因定位

以临床分离的一株肺炎克雷伯氏菌99-799株为研究对象，对其所产生的一种β-内酰胺酶编码基因的序列、亚型及基因定位进行研究。采用聚合酶链反应(PCR)，用β-内酰胺酶通用引物、blasHv引物扩增获得β-内酰胺酶及SHV型酶编码基因的片段，将SHV型酶PCR扩增产物克隆入pUCm—T载体，以双脱氧链终止法测定核苷酸序列，再通过GeneBank进行同源性检测确定其亚型和基因所在位置。肺炎克雷伯氏菌99—799株所含的一种β-内酰胺酶基因型为SHV型，与SHV-28编码基因序列完全相同，且位于细菌150bp的大质粒上，说明重庆地区有SHV-28亚型的存在。     

颈分区性清扫术治疗头颈部鳞状细胞癌的远期疗效

目的　研究颈分区性清扫术在头颈部鳞状细胞癌 (简称鳞癌 )治疗中的效果。方法　回顾性分析 1997年 1月～ 2 0 0 1年 12月在中国医学科学院肿瘤医院接受分区性清扫术的头颈部鳞癌患者 12 3例 ,其中喉癌 77例、口腔癌 2 9例、口咽癌 2例、下咽癌 15例。分区性清扫术后发现淋巴结病理阴性 (pN0 ) 99例 ,淋巴结病理阳性 (pN + ) 2 4例。随访时间中位数为 2 5个月。结果　 10 1例cN0患者行分区性清扫术后发现pN + 14例 ( 13 9% ) ;2 2例cN +患者行分区性清扫术后发现pN + 10例( 4 5 5 % )。 15 7侧分区性清扫标本中共发现 5 2枚阳性淋巴结 ,其在颈部的分布如下 :Ⅰ区 2 5 % ,Ⅱ区4 8% ,Ⅲ区 2 5 % ,Ⅳ区 2 %。根据Kaplan Meier方法计算 5年颈部复发率 ,pN0患者为 5 87% ( 95 %可信区间 0 8% ,10 9% ) ,pN +患者为 9 2 % ( 95 %可信区间 0 0 % ,2 1 5 % )。结论　颈分区性清扫术从微创观念出发 ,只要选择恰当 ,对于头颈部鳞癌患者可以取得与传统颈清扫术相当的效果。更重要的是保留了患者的功能和外观 ,提高了生活质量     

避孕药物醋酸烯诺孕酮的研究进展

哺乳期妇女出于对婴儿安全的考虑 ,对于避孕药物的选择十分谨慎。醋酸烯诺孕酮的激素特性和药代动力学特点使其在临床试验中避孕率高 ,副作用小 ,尤其对婴儿无影响 ,其皮下埋植剂有希望成为哺乳期妇女避孕的首选药物。本文就醋酸烯诺孕酮的化学结构、激素活性、药代动力学特性、临床有效率、副作用、药物作用机制以及阴道环剂型等方面作一综述。     

肺癌患者血清癌胚抗原和一氧化氮水平检测的临床意义

目的　探讨肺癌患者血清中癌胚抗原 (CEA)和一氧化氮 (NO)水平的变化。方法　应用放免法和生化法测定了 4 0例肺癌患者血清中CEA和NO含量 ,并以 35名正常健康人作比较。结果　肺癌患者血清中CEA和NO水平显著地高于正常人水平 (P <0 .0 1) ,术后CEA和NO水平下降。结论　CEA和NO参与了肺癌的发生和发展     

特异性鲎试剂分析甘露聚糖肽氯化钠注射液的细菌内毒素

目的　考察甘露聚糖肽氯化钠注射液进行细菌内毒素检查的可行性。方法　应用普通鲎试剂及特异性鲎试剂对样品进行内毒素的定性及定量检查。结果　甘露聚糖肽氯化钠注射液经 6倍稀释后对普通鲎试剂的细菌内毒素检查有明显的干扰作用 ,而对特异性鲎试剂无干扰作用 ;以特异性鲎试剂检查 6批样品其细菌内毒素含量均小于 15 0 0EU·L-1,凝胶法和动态浊度法鲎试验均证实了这一点。结论　必须应用特异性鲎试剂检查甘露聚糖肽氯化钠注射液中的细菌内毒素以排除其干扰作用