曲古抑菌素A对前列腺癌LNCaP细胞雄激素受体的清除作用

目的:研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(trichostatinA,TSA)对前列腺癌细胞的抑制作用机理。方法:四甲基偶唑氮蓝(MTT)检测药物对肿瘤细胞增殖的影响;Hochest33342染色观察细胞凋亡的形态学变化;Western印迹分析雄激素受体(AR)蛋白的表达;反转录PCR检测AR转录水平的变化。结果:TSA在较低浓度即能有效抑制LNCaP细胞的增殖,EC50为125.9nmol·L-1,并诱导肿瘤细胞凋亡;药物处理后细胞周期依赖性蛋白激酶抑制剂p21表达增高,AR呈时间及剂量依赖性被清除。TSA对AR的清除是发生在蛋白水平的降解,而不影响其转录。结论:TSA能够清除对细胞生长具有重要作用的AR细胞信号通路,从而对前列腺癌LNCaP细胞发挥抑制作用。     

3L自动发酵罐中西罗莫司的发酵研究

采用美国NBS公司生产的BIOFLO3000型3L发酵罐进行西罗莫司发酵代谢过程的考察和代谢参数的累积,建立了较为适应的西罗莫司发酵条件,罐上发酵水平与摇瓶发酵水平相当.     

谷胱甘肽对汞致肾细胞凋亡影响的实验研究

目的 探讨谷胱甘肽（GSH）对汞致肾细胞凋亡的影响，进一步阐明无机汞肾损伤的分子机制。方法 昆明种小鼠24只随机分成3组，即对照组、单纯汞染毒组和GSH干预组。单纯汞染毒组小鼠腹腔注射3．0mg／kg氯化汞（HgCl2）溶液，对照组腹腔注射0．9％的氯化钠溶液，注射量为每10g体重注射0．2ml。GSH干预组于注射3．0mg／kg，HgCl2溶液前2h腹腔注射3mmol／kg谷胱甘肽溶液。24h后将小鼠颈椎错位处死，制备透射电镜标本，观察凋亡细胞形态；免疫组化法检测凋亡相关基因bcl-2和bax蛋白表达。制备单细胞悬液，用流式细胞仪进行凋亡细胞百分数分析。结果 对照组小鼠肾近曲小管细胞形态规则；单纯汞染毒组表现微绒毛排列紊乱，染色质聚集成块，核破碎释放出凋亡小体，凋亡小体被邻近细胞吞噬等典型细胞凋亡形态；GSH干预组显示接近正常的肾小管上皮细胞的形态。凋亡细胞百分数汞染毒组明显高于对照组（P〈0．01），GSH干预组明显低于汞染毒组（P〈0．01）。免疫组化检测GSH干预组bcl-2蛋白的表达明显高于汞染毒组（P〈0．01）；bax蛋白的表达显著低于汞染毒组（P〈0．01）。结论 GSH可以抵抗汞所致的肾细胞凋亡，使凋亡相关基因bcl-2蛋白的表达上调，bax蛋白的表达下调。     

天津市双口生活垃圾卫生填埋场渗沥液处理

介绍了天津市双口生活垃圾卫生填埋场渗沥液处理情况，对渗沥液处理场运行中出现的一些现象做了初步分析。     

河南省1963～2002年百日咳流行动态及控制策略分析

目的掌握河南省40年来百日咳的流行病学特征及其影响因素,为制定免疫策略和预测疫情趋势提供依据。方法对河南省不同免疫阶段的百日咳流行病学特征进行分析。结果河南省40年来共报告百日咳3 065 075例,死亡572例。大致可分4个阶段:1963~1978年,年平均发病率为293.47/10万,死亡43例;1979~1983年,年发病率为87.70/10万~17.78/10万,呈逐年下降趋势,死亡6例;1984~1990年,发病率为1.28/10万~6.73/10万,死亡1例;1990年以后发病率为0.25/10万~1.00/10万,连续10年无死亡病例。表明随着百日咳疫苗接种率的不断提高,不但大大降低了百日咳的发病率和死亡率,也改变了其流行周期。结论目前的免疫策略首先应继续做好儿童常规免疫,其次应加强百日咳疫情管理,提高疫情报告的及时性、准确性。     

卡巴胆碱对烧伤延迟复苏大鼠免疫功能的影响

Objective To explore the changing trend of Ia on monocyte, lymphocyte apoptosis rate, TNF-α and IL-6 in abdominal aorta of burned rats with delayed resuscitation and the influence of application of carbachol on them. Methods Adult male Wistar rats were randomly divided into normal control group(n =8), scald group(n =48) and scald with carbachol treatment group(n =48). In latter two groups, rats were inflicted with 30% total body surface area (TBSA) full-thickness scald and delayed fluid resuscitation. All scald rats were sacrificed at the 6th hours or 1st, 2nd, 3rd, 7th, 14th day after scald, with 8 rats at each time point. Expression of Ia antigen on monocyte and lymphocyte apoptosis rate were determined by direct immunofluorescence on a flow cytometer, and TNF-α and IL-6 was measured by ELISA. Results Expression of la on monocyte was obviously lower than that of controls. The lowest levels were recorded on the 6th hours and 1st day after scald. Subsequently, Ia was elevated gradually, but still lower than that of normal rats(P <0. 01). After administration of carbachol, Ia expression was obviously promoted, compared with the simple scald group (P <0. 01). Lymphocyte apoptosis rate, TNF-α and IL-6 was higher than that of controls(P <0. 01). After administration of cavachol, , lymphocyte apoptosis rate and TNF-α and IL-6 was obviously down-regulated on the 6th hours, 1st day, 2nd day and 3rd day after scald injury, compared with the simple scald group (P < 0. 01 or 0. 05). Conclusion After severe burn with delayed fluid resuscitation, there is a low la expression, high lymphocyte apoptosis rate and increased releasing of proinflammatory cytokine. Immune function was suppressed. Carbacho] could improve the immune function of scald rats with delayed fluid resuscitation.     

仙人掌清除·OH自由基及对DNA损伤的保护作用

目的研究野生仙人掌和食用仙人掌水提物清除·OH自由基及对DNA损伤的保护作用。方法采用现代生物化学发光技术,在CuSO4-Phen-Vc-H2O2-DNA化学发光体系中测定野生仙人掌和食用仙人掌清除·OH自由基及对DNA损伤的保护作用。采用紫外分光光度计测定野生仙人掌和食用仙人掌水提物中核酸和蛋白质的OD值。结果野生仙人掌能明显清除·OH自由基,抑制DNA的氧化损伤,对DNA氧化损伤的保护作用与其浓度之间存在正比性量效关系。食用仙人掌核酸和蛋白质的OD值为野生仙人掌的2.73倍和2.58倍,但不显示清除·OH自由基作用。结论野生仙人掌对·OH自由基引起的DNA损伤有明显的保护作用。食用仙人掌有较高的营养价值,但无抗DNA氧化损伤的作用。     

红景天属植物DALP反应体系的建立

目的 利用直接扩增片段长度多态(DALP)这一新分子标记技术建立一套稳定的红景天属植物的DALP反应体系。方法 以红景天基因组DNA为模板,对DALP反应程序的一些重要参数进行摸索和优化试验。结果 建立了一套稳定性强、可靠性高的DALP应用反应体系;经过大量重复性实验,反应体系为20μL,Mg2 浓度为2.5 mmol/L,dNTPs浓度为1.25 mmol/L,模板DNA的量为60 ng,5 pmol/L选择性引物1μL,5 pmol/L反向引物3 μL,引物浓度比为1:3,Taq酶2 U。反应过程为:95℃预变性5 min、94℃变性30 s、50℃退火30 s、72℃延伸1 min;30个循环,再72℃延伸10 min,完成整个PCR反应。结论 该体系可有效地应用于红景天属药材的分类鉴定和地道性鉴定。     

雷公藤属3种植物不同群体和个体中雷公藤甲素的研究

目的测定雷公藤属3种植物(雷公藤、昆明山海棠和黑蔓)不同群体和个体中雷公藤甲素(tripto lide),为评价雷公藤药材质量和寻找雷公藤的优质种质奠定基础。方法建立雷公藤甲素HPLC测定方法,并测定了全国主要分布区25个群体91个个体的木质部和韧皮部中的雷公藤甲素。结果黑蔓的雷公藤甲素质量分数很低;雷公藤和昆明山海棠种间的雷公藤甲素差异不明显,个体质量分数木质部为1.0×10-6~5.83×10-5;韧皮部为2.3×10-6~1.030×1-0 4。结论雷公藤和昆明山海棠不同个体雷公藤甲素质量分数最高值与最低值相差约50倍,不同居群雷公藤甲素质量分数最高值与最低值相差10多倍,不同来源的药材质量差异极大,严重影响用药的安全性;雷公藤甲素质量分数高的居群位于浙江西南部和中部、湖南新宁、贵州雷山和安徽黄山;湖南新宁、贵州雷山和浙江江山居群中有雷公藤甲素质量分数极高的个体,值得进一步研究,以寻找质量分数高的优良单株。     

三七总皂苷抗心肌肥大的作用与其影响神经体液因素的关系

目的:通过研究三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)对大鼠整体和离体模型心肌肥大的影响,探讨PNS对心肌肥大的作用机制。方法:用腹主动脉缩窄法建立大鼠整体心肌肥大模型,PNS腹腔注射给药,持续3周后,测大鼠收缩压(SBP)、全心重量/体重(HW/BW)、左室重量指数(LVI)、左室心肌纤维直径(MD);用去甲肾上腺素(NE)诱导培养的新生大鼠心肌细胞制作离体心肌肥大模型,给PNS72h后,测定细胞表面积和蛋白质含量。结果:PNS浓度依赖性地抑制腹主动脉缩窄大鼠HW/BW,LVI,MD的增加,但不能显著降低大鼠SBP;0.1-0.5g·L^-1PNS可显著抑制NE诱导的心肌细胞表面积和蛋白质含量的增加,P<0.01。结论:PNS能抑制大鼠整体和离体2种模型心肌肥大,其作用机制不是通过降低压力负荷.而是与拮抗神经体液因素NE的作用有关。