脊髓源星形胶质细胞GFAP表达抑制真核表达载体构建及最佳短发夹样RNA分子筛选

目的构建并筛选大鼠胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）表达抑制短发夹样RNA（shRNA）真核表达载体。方法针对GFAP基因全编码序列设计并合成三对9bp茎环结构、19bp干扰序列特异性shRNA模板，体外定向克隆构建特异性重组质粒真核表达载体；通过体外大鼠脊髓源星形胶质细胞GFAP表达抑制模型，脂质体介导RNA干扰分子转染，实时荧光定量RT—PCR及Wesem blot技术观察RNA干扰后原代星形胶质细胞GFAP表达抑制效果．筛选最佳GFAP表达干扰抑制真核表达载体。结果序列测定证实GFAP—shRNA重组质粒真核表达载体构建成功，三对shRNA模板在mRNA及蛋白表达水平抑制靶基因表达效率分别为81％、63％、56％。结论高效率的GFAP—shRNA真核表达载体在大鼠原代星形胶质细胞GFAP表达抑制模型中能高效抑制GFAP基因表达，为后续多靶点RNA干扰技术在脊髓损伤胶质瘢痕抑制基因治疗中的应用奠定了前期基础。     

血管生成素-2在食管鳞癌中的表达及意义

目的初步探讨血管生成素-2(Angiopoietin-2,Ang-2)在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其与肿瘤病理分级、浸润和转移的关系。方法采用S-P免疫组织化学方法,对85例食管鳞癌及22例正常食管组织中的Ang-2表达水平进行检测,并与肿瘤病理分级、浸润深度及淋巴结转移情况进行统计学分析。结果85例食管鳞癌组织中,57例Ang-2表达呈阳性,阳性率为67.06%,显著高于Ang-2在正常食管组织中的表达(P<0.05)。Ang-2表达与肿瘤病理分级和淋巴结转移显著相关(P<0.05)。结论Ang-2的表达与食管鳞癌的临床分期及病理分级呈正相关,提示Ang-2促进肿瘤新生血管形成,参与食管鳞癌的发生和发展,可作为反映食管癌进展的生物学指标。     

山莨菪碱和无创面罩正压通气治疗急性呼吸窘迫综合征的临床观察

目的比较山莨菪碱联合无创正压面罩通气（654-2＋NIPPV）和传统机械通气（CMV）治疗急性呼吸窘迫综合征（ARDS）的临床效果，评估山莨菪碱联合无创正压通气在ARDS治疗中的作用。方法将各种原因所致ARDS患者42例随机分为654-2＋NIPPV组（21例）和CMV组（21例），在给予病因治疗同时分别实施654-2＋NIPPV和CMV。观察分析两组患者在治疗过程中动脉血气变化、并发症的发生率及治疗效果。结果654-2＋NIPPV组有8例（38．1％）治疗失败转为气管插管实行CMV，其中6例（28．6％）死亡。CMV组死亡7例（33．3％），两组病死率无显著差异（P〉0.05）。两组治疗有效的患者在分别接受654-2＋NIPPV和CMV治疗后1h和6h动脉血气有相似的显著改善。654-2＋NIPPV组患者机械通气时间和住院时间短于CMV组（P〈0.05）。654-2＋NIPPV组的并发症发生率低于CMV组（P〈0.05）。结论在经过选择的ARDS患者中，应用654-2＋NIPPV治疗的临床效果与CMV相似。实施654-2＋NIPPV可缩短机械通气和住院时间，减少并发症。654-2＋NIPPV可作为经过选择的ARDS患者首选的通气支持治疗手段。     

人骨形态发生蛋白-2基因转染脂肪源性间充质干细胞的成骨研究

目的 探讨人骨形态发生蛋白-2（hBMP-2）基因修饰的人脂肪源性间充质干细胞（ADSCs）的成骨能力及基因转染对ADSCs成骨分化的生物学调控。方法 流式细胞技术鉴定从人脂肪组织中提取的细胞为间充质来源的干细胞。将ADSCs转染hBMP＋2基因，免疫沉淀＋Western blotting法和酶联免疫吸附试验（ELISA）检测hBMP-2表达，确定hBMP-2表达量及表达稳定性，碱性磷酸酶（ALP）染色、ALP定量测定、钙结节染色及RT—PCR分析hBMP-2基因转染对ADSCs向成骨细胞转化的调控，并将转基因细胞注入裸鼠股部肌内，通过X线及组织学检查观察体内成骨情况。结果 流式细胞术证实从脂肪中提取的细胞为间充质来源的干细胞。转基因后免疫沉淀＋Western blotting法和ELISA法显示转染hBMP-2的ADSCs具有较高且稳定的hBMP-2的表达，转染21d后表达量无明显降低。ALP染色、ALP定量测定、钙结节染色及RT—PCR发现转基因ADSCs向成骨细胞方向发生分化。裸鼠肌内注射转基因细胞后2周即显示有异位骨形成，4周明显增多，对照组无骨组织形成。结论 转染hBMP-2基因的ADSCs在持续稳定高表达目的蛋白的同时，自身向成骨细胞发生分化，并在裸鼠体内形成异位骨。因此，ADSCs有望作为新的基因工程种子细胞。     

多层螺旋CT对肝移植术后并发症诊断价值评价

1963年Starzl成功开展了世界上第1例肝移植术（1iver transplantation，LT），自此揭开了治疗终末期肝病的新篇章。截止2001年底，全世界共有100179例病人接受了LT；至2002年底，国内的LT数也已累计达到1840例。然而，随着LT在国内外的蓬勃开展，不可避免地会带来各种类型的术后并发症。为了进一步提高LT术患者后近远期的存活率，及早发现并干预各型并发症就显得尤为重要。     

角膜重度碱烧伤羊膜移植治疗实验研究

目的 探讨羊膜移植治疗兔眼重度碱烧伤的机理，为其临床应用提供基础理论依据。方法建立兔眼角膜碱烧伤模型，分别以生理盐水、氯霉素眼药水、氯霉素眼药水和0．1％地塞米松及羊膜移植进行治疗，取伤后1d，3d，7d，14d房水检测TNF-α、IL—1。结果各时段氯霉素眼药水和0．1％地塞米松组和羊膜移植治疗组与生理盐水组和氯霉素眼药水组TNF—α、IL—1的活性和含量明显受到抑制。结论抑制TNF—α和IL—1的生物合成和释放可能是羊膜移植治疗角膜碱烧伤的机理之一。     

健康相关生命质量评价研究与应用现状

健康相关生命质量(HRQOL)是近年来发展起来的一种全新的医学概念,在国外已得到广泛的应用。着重介绍了健康相关生命质量的概况、研究与应用进展,阐述了健康相关生命质量的研究背景,以及新近发展的有关健康相关生命质量的观点和测评工具。对健康相关生命质量评价研究的前景和启示作了相关探讨。     

低分子肝素治疗不稳定型心绞痛41例临床观察

目的:探讨低分子肝素治疗不稳定型心绞痛(UA)的临床疗效。方法:对41例不稳定型心绞痛病例,治疗前均常规治疗。在此基础上低分子肝素(体重≤60 kg为5 000 U,体重>60 kg为7 500 U),12 h 1次皮下注射,连用7~14 d,分别于用药前30 min,用药后48 h采血测定活化部分凝血活酶时间(APTT),凝血酶原时间(PT)。结果:显效9例,有效24例,总有效率80.5%。结论:低分子肝素具有高比例的抗因子Xa和抗因子Ⅱa活性,由于其分子量小,与血浆蛋白和内皮细胞结合减少,所以生物利用度高,血浆半衰期长。疗效可取得与肝素同样甚至更高抗凝血酶效果,并且有发生严重出血事件低的优点。     

血管紧张素Ⅱ2型受体研究进展

血管紧张素Ⅱ作为肾素-血管紧张素系统的主要活性肽,根据其与肽类和非肽类的选择性亲和力可分为两个亚型,分别命名为AT1-R和AT2-R。AT1-R可被特异的非肽类拮抗剂所阻断,如沙坦类;AT2-R拮抗剂包括非肽类化合物PD 123317和PD 123319,还有一部分AT2-R的配体是肽类激动剂,如CGP 4221等,这些肽类配体在炎症过程中也可以和非血管紧张素位点结合〔1〕。AT1-R在调节心血管效应、体液和电解质的平衡、激素释放和饮水行为方面的作用已被确认,部分AT1-R拮抗剂已经用于高血压的治疗,而AT2-R的生理功能尚不清楚。1 AT2-R的结构AT2-R分子结…     

成分输血在临床中的应用

成分输血是现代输血学的重要标志之一。临床医生要了解成分输血的知识,遵循科学用血、合理用血、节约用血的原则,根据病情有针对性地开展成分输血。成分输血的重点,应当是血液的有形成分,即以红细胞和血小板为主的成分输血。本文就成分输血的特点与临床应用等有关问题进行综述。