纳米血管生成素-2小干扰RNA质粒制备及功能研究

[目的]制备血管生成素-2小干扰RNA(Ang-2siRNA)质粒纳米微粒,并观察其基因转染能力和基因沉默效果.[方法]应用分子克隆的方法构建Ang-2siRNA质粒,将其与聚乳酸、O羧甲基壳聚糖用水/油/水(W/O/W)双乳化溶剂蒸发法制备纳米微球,扫描电镜观察其形态和粒径.然后转染原代人脐带静脉内皮细胞,观察纳米Ang-2siRNA微粒干扰Ang-2基因表达的效果及其细胞保护功能.[结果]扫描电镜观察到Ang2siRNA纳米微球呈球形和椭球形,粒径150～200 nm,大小分布均匀,包封完整,分散性良好.有较强转基因能力,良好的RNA干扰效果和血管内皮细胞保护功能.[结论]成功制备纳米Ang-2siRNA微粒,并证实其载基因能力和RNA干扰效果,对血管内皮细胞损伤因素有良好保护作用,为进一步研究心肌梗死的血管修复机制奠定了坚实的基础.     

聚磷酸钙纤维和左旋聚乳酸软骨支架复合自体骨髓间充质干细胞构建组织工程化人工关节软骨

目的应用组织工程学技术，体外初步构建组织工程化人工关节软骨。方法制备三维多孔软骨支架材料CPP／PLLA，体外诱导兔MSCs向软骨细胞表型分化，免疫组织化学染色检测软骨特异性Ⅱ型胶原表达，将诱导细胞与软骨支架材料CPP／PLLA复合，体外培养构建人工关节软骨，1周后终止培养，扫描电镜观察组织工程化人工软骨的微观结构；同时将构建人工软骨移植于兔大腿皮下，3周后处死动物，甲苯胺蓝染色观察。结果扫描电镜观察可见该复合材料CPP／PLLA为高孔隙率的网状、连通、微孔结构，微孔分布均匀，孔径大小为300～400Ⅳn之间；兔MSCs经体外软骨表型定向诱导后，Ⅱ型胶原免疫组化染色阳性。诱导后的MSCs可在支架材料内良好贴附生长，细胞被分泌的胶原基质包裹；从体内获取的培养物组织切片观察可见大量的软骨细胞生成，甲苯胺蓝染色阳性。结论经软骨起源诱导后的MSCs与CPP／PLLA复合培养可以构建自体软骨移植的替代物，为应用软骨组织工程方法修复关节软骨缺损和功能重建提供一种新材料，具有较大的潜在应用价值。     

与甲壳素缝线体外复合培养大鼠成肌细胞株L6细胞的形态学

目的：探讨甲壳素作为骨骼肌组织工程支架材料的可行性。 方法：实验于2002-06／12在南方医科大学应用解剖学研究所完成。大鼠成肌细胞株L6与甲壳素医用缝合线体外复合培养。倒置相差显微镜下观察细胞的形态和排列情况。并分别在体外复合培养的第1，2，3，4，5，6天，取出细胞支架复合体，扫描电镜观察成肌细胞的形态和排列情况。 结果：①扫描电子显微镜观察显示，甲壳素医用可吸收缝线的表面比较粗糙。②倒置相差显微镜下可见大鼠L6细胞与甲壳素制备的医用可吸收缝合线间黏附良好，细胞沿缝线排列呈现串珠样，并可以见到细胞聚集现象。③扫描电子显微镜观察，接种24h后，细胞主要为圆球形，随后细胞迁移、伸展、并见突起；第3天，成肌细胞主要为梭形，并见融合趋势；4d后，细胞沿材料纵轴排列并相互融合，并见肌小管样结构形成及细胞外基质分泌。 结论：甲壳素具有作为支架以构建组织工程化骨骼肌的潜能，支架的平行排列有助于工程化骨骼肌纤维良好方向性的形成。     

乳腺良恶性肿块的高频彩色多普勒超声分析

目的:探讨彩色多普勒多参数分析对乳腺良、恶性肿块鉴别诊断的价值。材料和方法:应用高频彩色多普勒对96例104个乳腺实质肿块进行扫查,观察肿块的彩色多普勒血流信号及多普勒血流频谱形态,与手术病理结果对照分析。结果:64.4%的良性肿块可检出血流信号,血流信号多为Ⅰ~Ⅱ级,良性肿块中血流频谱以低阻力搏动型及静脉型多见,91.1%的乳腺恶性肿块可检出血流信号,血流信号多为Ⅱ~Ⅲ级,恶性肿块的血流频谱形态较多样化,即同时有多种血流频谱,且以高阻力搏动型和湍流型为多见。结论:高频彩色多普勒超声多参数综合分析有助于临床对乳腺肿块的诊断及鉴别诊断。     

血管内超声显像在冠心病支架植入术中的应用

目的探讨血管内超声在冠心病支架植入中的作用。方法50例患者的52处病变在支架植入前后分别用血管内超声进行定量和定性分析,并根据血管内超声标准决定支架的直径以及植入的终点,分析CAG和IVUS对支架植入终点判断的差异和最终获得的管腔面积大小的差别以及支架后管腔面积增大的机制。结果IVUS比CAG判断的平均支架直径大[(3.48±0.29)mmvs(3.36±0.33)mm,P=0.011],支架囊的最终峰值压力明显增大[(17.7±2.9)atmvs(12.8±2.4)atm,P<0.001],QCA测得的支架面积狭窄百分比减小(13.2%±6.6%vs16.6%±9.1%,P=0.044);首次高压扩张后支架满意率CAG达96.2%,而IVUS只有37.7%。IVUS指导后最终的球囊压力更高[(16.13±1.87)atmvs(12.62±2.61)atm,P<0.001],获得的管腔直径更大[(3.64±0.53)mmvs(3.31±0.57)mm,P<0.001],管腔面积也更大[(9.90±2.05)mm2vs(8.84±1.67)mm2,P<0.001],面积狭窄百分比更小(49.15%±9.03%vs54.24%±10.05%,P<0.001];所有患者支架的近段和远段CAG均未发现明显的狭窄。而IVUS却发现支架近段血管有39例(75.0%),远段血管有23(44.2%)例存在动脉粥样硬化斑块;支架植入后非脂质斑块较脂质斑块获得的管腔面积更大[(4.50±1.67)mm2vs(3.68±0.97)mm2,P<0.001],其中脂质斑块血管面积增大较非脂质斑块小1.30mm2,斑块压缩程度却增加0.48mm2。结论IVUS较CAG能更好地判断病变的性质,指导支架更好地选择,可获得更大的管腔面积,更小的面积狭窄百分比。     

DA→LEW大鼠肝脏急性排斥反应模型的技术改进与评价

目的:建立大鼠肝脏移植急性排斥反应模型并改进其手术技巧,对所建模型进行评价。方法:采用近交系雄性DA大鼠60只,Lewis大鼠120只,分为两组,其中A组30例:Lewis大鼠为供体(n=30),Lewis大鼠为受体;B组60例:DA大鼠为供体(n=60),Lewis大鼠为受体。采用改良“二袖套”法建立肝脏移植模型,观察手术成功率、平均存活时间、术后第1、3、5、7和10 d各时相点血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(TBIL)水平以及移植肝脏的病理学变化。结果:手术成功率为93.3%(84/90);总耗时(90.0±15.0)min;无肝期时间(14.2±2.6)min;平均存活时间A组超过100d,B组(16.2±1.4)d;术后第5 d B组血清ALT和TBIL升高,与A组比较差异非常显著(P<0.01);B组移植肝脏病理检查有明显的排斥反应,而A组没有。结论:DA→LEW(Lewis)大鼠的品系组合是稳定的肝脏移植急性排斥反应模型;通过改进手术技巧提高了手术成功率,为进一步研究提供技术保障。     

Foot Polydactyly and Polysyndactyly: Genetic Implications in Two Families

The purpose of this study was to determine the genetic characteristics of foot polydactyly and identify its inheritance pattern by analyzing familial pedigree. Five cases from 2 Korean families were studied: 1 is a family whose members have been affected for 4 generations and the other for 2 generations. Using peripheral blood samples, we performed chromosomal analysis using the banding technique with Giemsa stain and karyotyping. We investigated the shape and structure of 46 chromosomes, looking for translation, deletion, inversion, ring chromosome, and isochromosome abnormalities. All peripheral blood samples demonstrated no chromosomal abnormalities, though the genetic nature of foot polydactyly and a new genetic locus was identified recently by other studies. Familial pedigree analysis suggested that polydactyly was inherited as an autosomal dominant trait in the first family. The mode of inheritance for the second family could not be determined due to an insufficient number of family members. The result of this study brought us to the conclusion that, while genetic factors play a major role in polydactyly, other factors may contribute to its occurrence.     

刺血拔罐治疗第三腰椎横突综合征28例

笔者用刺血加拔罐的方法治疗第三腰椎横突综合征28例，取得较好疗效，现报道如下。     

电视胸腔镜辅助胸腺切除术

目的探讨电视胸腔镜辅助胸腺切除的临床应用价值. 方法 2002年9月～2004年6月,18例胸腺疾病和重症肌无力(myasthenia gravis,MG)行胸腔镜辅助下胸腺切除手术,其中胸腺全切7例,11例MG行胸腺扩大切除. 结果 17例在胸腔镜辅助下完成, 1例中转小切口(7 cm)开胸手术.3例MG术后须短暂呼吸机辅助通气(<12 h),二次气管插管1例,余无严重并发症,无手术死亡.手术时间47～115 min,平均95 min;胸腔引流时间1.2～2.6 d,平均2 d;术后住院时间4～9 d,平均5.5 d.9例良性胸腺瘤或胸腺囊肿随访3～20个月,平均13个月,无复发.11例MG随访3～19个月,平均10个月,4例症状完全缓解,7例都分缓解. 结论胸腔镜辅助下胸腺切除手术,具有创伤小、恢复快等优点,胸腔镜下胸腺扩大切除治疗重症肌无力在技术上是可行的.