金复康口服液对吉非替尼耐药人肺腺癌PC9/R的增敏作用和机制研究

目的 研究金复康口服液对人肺腺癌PC9细胞及耐药PC9/R细胞的吉非替尼增敏作用及机制。方法 金复康口服液20 mg/mL联合不同浓度的吉非替尼（40、20、10、5、2 μmol/L）作用于PC9/R细胞,CCK-8法检测细胞增殖;培养PC9、PC9/R细胞,分为对照组、金复康口服液组、吉非替尼组、联合用药组,流式细胞术检测PC9、PC9/R细胞周期和凋亡。在BALB/c裸鼠右前肢腋窝皮下接种PC9/R细胞建立裸鼠移植瘤模型,观察金复康口服液联合吉非替尼的体内抑瘤作用;对AKT、p-AKT、PTEN、PDCD4蛋白表达的影响和对miRNA-21表达的影响。结果 与吉非替尼（2、5、10、20 μmol/L）组比较,吉非替尼（2、5、10、20 μmol/L）+金复康口服液（20 mg/mL）组的PC9/R细胞抑制率显著增加（P<0.01）;与吉非替尼组比较,联合用药可以通过显著增加早期凋亡细胞比例诱导PC9及PC9/R细胞凋亡,并使PC9、PC9/R细胞停滞在DNA合成前期,从而抑制细胞增殖,差异均具有统计学意义。体内实验表明,与吉非替尼组比较,联合用药显著抑制裸鼠PC9/R移植瘤的生长（P<0.05）,且能显著降低裸鼠PC9/R组织p-AKT表达（P<0.05）,增强PTEN、PDCD4的表达（P<0.05）,联合用药组裸鼠PC9/R瘤组织miRNA-21的表达显著降低（P<0.05）。结论 金复康口服液能提高人肺腺癌PC9/R细胞对吉非替尼的敏感性,其作用的可能机制为通过降低miRNA-21的表达从而增强PTEN、PDCD4的表达以抑制AKT通路活性。     

中药抗呼吸道合胞病毒实验研究进展

中药具有高效低毒的特点,分别从抗呼吸道合胞病毒(RSV)复方和单味中药提取物2个方面,总结中药对RSV的实验抑菌作用及其作用机制,期待为临床治疗提供理论依据,并为进一步挖掘和深入研究中药抗病毒成分提供新的思路。同时指出了单味中药提取物虽然可以较为清晰地说明治疗机制和作用靶点,但目前多数尚停留在物质分析、鉴定和少数动物细胞实验阶段。     

双相障碍患者心理弹性的研究现状及展望

随着积极心理学的兴起和发展,与积极心理学密切相关的心理弹性也逐渐成为一个研究热点,并被应用到精神疾病的研究中.该文在介绍心理弹性的概念、理论模型及测量工具基础上,综述了双相障碍患者的心理弹性水平及其相关影响因素,就其现存问题及下一步研究提出建议,期望为临床针对双相障碍患者的心理弹性制定系统、高效、个性化的干预措施提供科学依据.     

脂质运载蛋白-2在急性心肌梗死发病过程中的变化及临床意义

目的探讨脂质运载蛋白-2(lipocalin-2,Lcn-2)在急性心肌梗死(AMI)过程中的变化及其临床意义。方法分别采集100例AMI患者行经皮冠状动脉介入(PCI)治疗前及PCI治疗后24 h、72 h外周血,30例健康受试者外周血作为对照。分离血浆及中性粒细胞;分别采用酶联免疫吸附法(ELISA)及RT-q PCR法检测血浆及中性粒细胞中Lcn-2水平。选取12周龄25~30 g的C57BL/6雄性小鼠(北京维通利华) 16只用于制备AMI模型。通过开胸结扎左冠状动脉前降支建立小鼠AMI模型(n=8)。分别取模型组小鼠结扎前及结扎1 h、24 h外周血,检测血浆及外周血中性粒细胞Lcn-2水平。此外,采用Lcn-2抗体对该模型进行干预,对结扎24 h后小鼠进行心功能检测,并采用TUNEL法和免疫荧光检测心脏梗死区心肌凋亡情况及中性粒细胞浸润情况。结果与健康受试者比较[血浆Lcn-2(20.35±8.51) ng/m L,中性粒细胞Lcn-2(1.03±0.16)倍],AMI患者PCI治疗前Lcn-2水平[血浆(113.55±22.73) ng/m L,中性粒细胞(16.81±3.83)倍]明显升高,PCI治疗后24 h[血浆(74.26±14.36) ng/m L,中性粒细胞(10.86±2.71)倍]、72 h[血浆(46.81±12.83) ng/m L,中性粒细胞:(6.15±1.92)倍]依次明显下降。在小鼠模型上,与结扎前比较[血浆Lcn-2(8.14±2.33) ng/m L,中性粒细胞Lcn-2(1.01±0.08)倍],小鼠结扎1 h Lcn-2水平[血浆(17.33±6.19) ng/m L,中性粒细胞(12.86±5.66)倍]、24 h[血浆(35.15±10.44) ng/m L,中性粒细胞(20.17±7.14)倍]依次明显升高。与模型组比较[左心室舒张末期容积(LVEDV)(143.25±10.29)μL,左室射血分数(LVEF)(40.35±5.10)%,左室缩短分数(LVFS)(20.16±2.64)%],Lcn-2抗体干预明显改善了小鼠的心功能[LVEDV(123.25±9.35)μL,LVEF(49.37±6.69)%,LVFS(24.79±3.40)%]。此外,Lcn-2抗体干预明显抑制心肌细胞凋亡。结论血浆及中性粒细胞中Lcn-2水平与AMI发生相关,靶向抑制Lcn-2对AMI有明显的保护作用。     

超声作用下CTGF-siRNA对大鼠肝纤维化基因治疗的实验研究

目的探讨利用超声微泡造影剂介导携带结缔组织生长因子-小干扰RNA(CTGF-siRNA)真核表达质粒转染大鼠肝细胞的有效性。方法 (1)构建CTGF-siRNA真核表达质粒;(2)将40只实验大鼠随机分为7组:正常组,实验对照组,CTGF-siRNA质粒组,超声联合微泡组,超声联合微泡介导基因低、中、高剂量组;(3)建立肝纤维化模型,基因治疗4周后处死大鼠,超声及病理切片HE染色评价肝纤维化程度,masson染色观察胶原纤维含量,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝组织中CTGF、Ⅰ型和Ⅲ型胶原的mRNA表达。结果 (1)CTGF-siRNA基因治疗后超声及病理切片显示干预组纤维化程度降低;(2)masson染色显示超声介导微泡基因组胶原纤维含量表达量随着剂量增高而降低(P<0.05);(3)RT-PCR显示超声介导微泡基因组CTGF、Ⅰ型和Ⅲ型胶原的mRNA表达明显低于其他组,且随着质粒剂量增大而减少(P<0.05)。结论超声微泡作用下CTGF-siRNA基因能特异地作用于靶位点,有效抑制肝纤维化进程,提高对肝纤维化干预的特异度。     

Atractylenolide I enhances responsiveness to immune checkpoint blockade therapy by activating tumor antigen presentation

One of the primary mechanisms of tumor cell immune evasion is the loss of antigenicity, which arises due to lack of immunogenic tumor antigens as well as dysregulation of the antigen processing machinery. In a screen for small-molecule compounds from herbal medicine that potentiate T cell–mediated cytotoxicity, we identified atractylenolide I (ATT-I), which substantially promotes tumor antigen presentation of both human and mouse colorectal cancer (CRC) cells and thereby enhances the cytotoxic response of CD8⁺ T cells. Cellular thermal shift assay (CETSA) with multiplexed quantitative mass spectrometry identified the proteasome 26S subunit non–ATPase 4 (PSMD4), an essential component of the immunoproteasome complex, as a primary target protein of ATT-I. Binding of ATT-I with PSMD4 augments the antigen-processing activity of immunoproteasome, leading to enhanced MHC-I–mediated antigen presentation on cancer cells. In syngeneic mouse CRC models and human patient–derived CRC organoid models, ATT-I treatment promotes the cytotoxicity of CD8⁺ T cells and thus profoundly enhances the efficacy of immune checkpoint blockade therapy. Collectively, we show here that targeting the function of immunoproteasome with ATT-I promotes tumor antigen presentation and empowers T cell cytotoxicity, thus elevating the tumor response to immunotherapy.     

FXR信号通路介导何首乌导致脂质沉积的作用及机理研究

目的 探索何首乌对肝细胞脂质沉积的影响及其机制。方法 利用永生化肝细胞系LO2,采用1 mmol/L游离脂肪酸（FFA）处理,建立脂肪肝沉积细胞模型。同时加入不同浓度的何首乌提取物处理（0、2.5、5、10 μg/mL）,采用油红O染色以观察何首乌对LO2细胞脂肪沉积的作用;采用实时荧光定量PCR进行实验组LO2细胞内法尼酯X受体（FXR）基因及其下游通路胆盐输出泵（BSEP）、小分子异源二聚体伴侣（SHP）、胆固醇7α-羟化酶1（CYP7A1）关键基因的检测;并采用蛋白免疫印迹法检测FXR及其下游通路关键蛋白的表达水平。结果 何首乌处理后的LO2细胞中,油红O的染色量会随着药物浓度增加而增加;FXR的mRNA表达下降,而FXR蛋白诱导促进的下游基因BSEP、SHP的表达相应下降,而其下游抑制基因CYP7A1的表达则上升（P均<0.05）。何首乌处理的LO2肝细胞中,FXR的蛋白水平明显降低,蛋白激酶C （PKC）蛋白磷酸化水平明显降低,而PKC总蛋白表达水平无明显改变,SHP的蛋白水平也明显下降。结论 何首乌可通过抑制FXR-PKC/SHP信号转导通路,从而促进LO2肝细胞内的脂质沉积。为何首乌导致胆汁淤积所引起的肝损伤的治疗提供新的理论依据。     

A large congenital atrial septal defect in an adult with delayed therapy

Patients with a large congenital atrial septal defect (ASD) traditionally have the ASD repaired at the preschool age. Unfortunately, insufficient education of patients regarding medical science and clinical recommendations can lead to delayed therapy, resulting in complications during adulthood. We report a rare case of a large congenital ASD in a 20-year-old man. Echocardiography showed a 67-mm ostium secundum defect and moderate mitral and tricuspid regurgitation. The patient underwent transthoracic ASD repair along with mitral and tricuspid valvuloplasty. This report emphasizes the importance of educating patients about congenital malformations and potential interventions in developing countries, particularly in rural communities.     

苏尼特左旗自毙鼠琥珀葡萄球菌分离株检测研究

  目的   拟通过实验室检测,探究2019年内蒙古自治区锡林郭勒盟苏尼特左旗长爪沙鼠成批死亡的原因。  方法   将所有自毙鼠解剖后,取其脏器接种到赫氏培养基和半胱氨酸心琼脂血培养基上。 对于分离菌株先排除鼠疫菌后,再接种到含有抗生素的半胱氨酸心琼脂血培养基上,同时进行土拉弗朗西斯菌（土拉菌）特异抗原乳胶凝集检测。 其次,对于所有分离菌株提取核酸后,采用16S rRNA基因通用引物进行扩增、测序和同源性比对,并与网上已公布的琥珀葡萄球菌16S rRNA基因序列进行系统进化分析。 另外,用琥珀葡萄球菌悬液感染实验小鼠,在14 d内观察实验小鼠的精神和身体状况。  结果   分离的所有菌株在土拉菌选择性培养基上均不生长,土拉菌特异抗原乳胶凝集检测均为阴性,由此可以排除土拉菌。 经过16S rRNA基因测序和比对,所有分离菌株鉴定为4株琥珀葡萄球菌、1株罗伊乳杆菌、1株阴道乳杆菌和1株粪肠球菌。 系统进化分析显示,本研究获得的3株琥珀葡萄球菌,与9株来自世界其他国家的琥珀葡萄球菌聚在主要谱系分支上。 另外1株琥珀葡萄球菌和来自新疆的琥珀葡萄球菌聚在一个分支上。 实验小鼠感染模型得出,琥珀葡萄球菌的最小致死量为5×108 CFU/mL,亚致死量为108 CFU/mL。   结论   首次发现苏尼特左旗自毙长爪沙鼠体内含有琥珀葡萄球菌,推测琥珀葡萄球菌感染可能是当地长爪沙鼠成批死亡的原因。