人早孕绒毛组织的体外原代培养和人滋养细胞株的建立

目的:建立快速、有效的绒毛滋养细胞体外原代培养的方法以及建立人滋养细胞株和初步评价。方法:采用胰酶和胶原酶I混合消化法消化绒毛组织,用胰蛋白酶消化传代体外培养,通过光镜、透射电镜和免疫荧光激光共聚焦方法对培养出的细胞进行形态和骨架评价。结果:显微镜下可见细胞呈多边形,细胞平铺生长,有细胞融合后形成的合体滋养层细胞;透射电镜下可见细胞表面的微绒毛丰富;胞质丰富,内质网扩张明显,有丰富的糖原颗粒、髓样小体和明显的脂滴,以及细胞间紧密的桥粒样结构连接;直接免疫荧光双标记染色检测到角蛋白18和波形蛋白均为阳性。结论:采用胰酶和胶原酶I混合消化法可获得较纯的滋养细胞,通过光镜、透射电镜和免疫荧光激光共聚焦检测细胞外形和骨架,确定该体外传至56代的细胞株为滋养细胞株。     

远程胎儿监护在高危妊娠中的临床应用

目的:探讨远程胎儿监护在高危妊娠中的临床应用。方法:2004年3月至2005年6月在产科门诊诊断为高危妊娠的孕妇57例作为研究组,并于孕35周以后用远程胎儿监护终端部分(以远程胎儿监护结合胎动计数进行家庭自我监护),随机选择同期高危妊娠孕妇58例,在家中以胎动计数结合门诊常规NST检查作自我监护,作为对照组,比较两组的NST异常和围生儿不良预后发生率。结果:研究组57例孕妇中,NST异常21例,检出率为37%,对照组58例,NST异常11例,检出率为19%,两组比较差异有显著性(P<0.05),对照组58例中,发生围生儿不良预后27例,发生率为47%,研究组57例中发生围生儿不良预后12例,发生率为21%,两组比较差异有显著性(P<0.05)。结论:应用远程胎儿监护对高危妊娠的监测,可降低新生儿窒息等围生儿预后不良的发生率,为高危妊娠孕妇的自我监护和管理开辟了一条有效、实用、可行的途径。     

Immune responses against SARS-coronavirus nucleocapsid protein induced by DNA vaccine

The nucleocapsid （N） protein of SARS-coronavirus （SARS-CoV） is the key protein for the formation of the helical nucleocapsid during virion assembly. This protein is believed to be more conserved than other proteins of the virus, such as spike and membrane glycoprotein. In this study, the N protein of SARS-CoV was expressed in Escherichia coli DHSalpha and identified with pooled sera from patients in the convalescence phase of SARS. A plasmid pCI-N, encoding the full-length N gene of SARS-CoV, was constructed. Expression of the N protein was observed in COS1 cells following transfection with pCI-N. The immune responses induced by intramuscular immunization with pCI-N were evaluated in a murine model. Serum anti-N immunoglobutins and splenocytes proliferative responses against N protein were observed in immunized BALB/c mice. The major immunoglobulin G subclass recognizing N protein was immunoglobulin G2a, and stimulated splenocytes secreted high levels of gamma interferon and IL-2 in response to N protein. More importantly, the immunized mice produced strong delayed-type hypersensitivity （DTH） and CD^8＋ CTL responses to N protein.     

血管抑素3A工程蛋白的柱复性与离子交换纯化

由大肠杆菌以包涵体形式表达的一种抗内皮细胞生长工程蛋白(A nti-ang iogen ic agent,简称3A)经变性,Sephacry l S-100 HR柱复性,SP Sepharose FF离子交换吸附纯化,SephadexG-25脱盐,获得复性率为53.47%,HPLC纯度为92.52%的3A活性蛋白。以猪髋动脉内皮细胞为受检细胞,表明纯化蛋白具有抑制内皮细胞生长的特性。     

L-肉毒碱体外对人精子活率及运动参数的影响

目的：研究L-肉毒碱体外对人精子活率及运动参数的影响，分析L-肉毒碱对维持和提高精子质量的效果，并探讨其在男性不育症治疗中的作用。方法：选取10例精液质量参数正常、健康的生育男性和20例弱精子症不育患者精液，分别加入不同浓度的L-肉毒碱并于37℃孵育，镜检观察精子的形态变化，并采用计算机辅助精液分析系统检测各组精子的活率、活力（a＋b级精子百分率）、前向性（STR）、直线性（LIN）、直线速度（VSL）、曲线速度（VCL）以及平均路径速度（VAP）参数，同时对检测结果进行统计学分析。结果：正常生育男性精子体外加入L-肉毒碱后，可明显减缓精子活率、活力及VSL、VCL以及VAP的下降趋势，且随着L-肉毒碱加入浓度的增加，这种减缓作用增强。但当L-肉毒碱浓度超过1200μmol／L时，减缓作用减小。较为适宜的L-肉毒碱浓度为400μmol／L。弱精子症患者精液体外加入L-肉毒碱浓度在400μmol／L～1200μmol／L、孵育时间为30min～60min时，差异有统计学意义（P〈0．05或P（0．01）地提高体外精子的活率、活力及VSL、VCL以及VAP等参数。体外加入L-肉毒碱，能显著提高固精浆L-肉毒碱水平低下所致弱精症患者精子的活率、活力及运动参数，并可显著减缓正常生育精子活率、活力及运动参数的降低。结论：体外添加适宜浓度的L-肉毒碱，能显著提高因精浆L-肉毒碱水平低下所致弱精症患者精子的活率、活力及运动参数，并可显著减缓正常生育精子活率、活力及运动参数的降低。     

火焰原子吸收法测定生活饮用水中锰的不确定度分析

目的：给出火焰原子吸收分光光度法测定生活饮用水中锰的测量不确定度。方法：找出影响不确定度的因素，对不确足度进行分析，评估。结果：对火焰原子吸收分光光度法测定生活饮用水中锰给出了测量不确定度。结论：分析了使用标准曲线法定量的这一类型不确定度的计算方法和步骤，在实际工作中有较强的实用价值。     

浅析心肌肥厚患者左室舒张功能与冠脉循环的关系

目的探讨心肌肥厚患者冠脉血流与左室舒张功能障碍关系。方法采用彩色多普勒超声仪,行经胸超声心动图(TTE)测量40例心肌肥厚患者和20例正常人冠状窦、二尖瓣及肺静脉血流频谱。结果心肌肥厚患者冠状窦直径、前向血流和净前向血流流速积分(VTInet)明显高于正常对照组;冠状窦前向血流和VTInet与左室舒张功能障碍的多项指标存在相关关系;肺静脉舒张末期逆行血流最大流速之间均存在明显正相关。结论冠脉循环血流动力学的改变可能是心肌肥厚患者舒张功能受损的机制之一.     

多层螺旋CT灌注成像在星形细胞瘤术前分级中的应用价值及与肿瘤血管生成的相关性研究

目的:探讨CT灌注成像在星形细胞瘤术前分级及在肿瘤血管生成中的作用和价值。方法:手术病理证实且在术前1个月内做CT灌注成像的星形细胞瘤病人27例,低级星形细胞瘤13例,高级星形细胞瘤14例。测量病变区CBF值、CBV值及PS值,对低级星形细胞瘤、高级星形细胞瘤的CT灌注各参数值进行显著性分析,同时做低级与高级星形细胞瘤组的CBV值与肿瘤MVD的相关性分析,P<0.05被认为有统计学意义。结果:星形细胞瘤的CBF值、CBV值及PS值均较正常脑组织升高,低级星形细胞瘤病变区的rCBF 1.39±0.19,rCBV 2.28±0.32,rPS 6.58±2.66;高级星形细胞瘤病变区的rCBF 4.96±2.17,rCBV 4.69±1.98,rPS 19.19±9.19。2者有显著性差异。低级星形细胞瘤与高级星形细胞瘤的CBV值与肿瘤的MVD之间呈明显的正相关(r=0.809,P<0.01)。结论:CT灌注成像对星形细胞瘤术前分级有较高的临床应用价值。CT灌注CBV值与MVD相关。CT灌注CBV图是活体检测肿瘤血管生成的良好工具。     

椎动脉收缩期切迹对早期锁骨下动脉盗血综合征的诊断意义

目的：应用经颅多普勒超声（TCD）及束臂试验证实椎动脉收缩期切迹可提示早期锁骨下动脉盗血综合征（SSS）.方法：通过对椎动脉收缩期切迹组与无切迹组做束臂试验,比较束臂前后收缩期血流速度下降幅度及流速自下降至恢复的时间.结果：两组束臂前后椎动脉收缩期流速下降幅度及持续时间有显著差异（P＜0.01）.结论：椎动脉收缩期切迹是诊断早期SSS的敏感且可靠方法,能使更多的临床患者得到诊断.