一种简便快捷的微小病变基因变异分析方法的建立

目的建立一种简便快捷的微小病变和微量细胞基因变异的检测分析方法。方法HE染色病理诊断后,在立体显微镜或生物显微镜下对病理诊断组织细胞进行显微解剖,直接回收组织细胞,进行DNA模板抽提,以目的基因为引物,进行PCR-SSCP分析。结果1例胆石症病例,显微解剖结合PCR-SSCP法成功获得了K-ras和P53基因产物,并且检测到在过度增生胆囊上皮细胞有K-ras基因变异。结论显微解剖结合PCR-SSCP法取材少、病变部位确定,省时、省力,是分子病理研究的可靠手段。     

袋泡剂质量稳定性的实验研究

目的：选择袋泡剂的最佳包装材料。方法：恒温加速实验法。结果：四种包装材料的袋泡剂，铝箔包装的袋泡剂有效期最长。结论：最佳包装材料为铝箔。     

宫颈癌组织中HPV16E6序列多态性及同源性分析

目的探讨广东地区宫颈癌组织中HPV16肿瘤相关性抗原E6基因序列的多态性及同源性。方法采用通用引物PCR直接测序法对宫颈癌标本中的HPV分型,从含有HPV16型的标本中采用自行设计的多重引物通过巢式PCR扩增出HPV16E6,经DNA序列测定法检测其基因变异,进而分析其同源性。结果50例宫颈癌组织HPV-DNA的检出率为78%,其中HPV16和HPV18型混合感染18例,单纯HPV16型感染15例。含有HPV16型的标本34例中扩增出HPV16E625例。其中178位核苷酸变异较大,变异率为72%,其相应氨基酸均由天冬氨酸变为谷氨酸。结论HPV16E6DNA序列发生碱基替换的区域主要在氨基端94~241位,羧基端相对保守,未见变异。广东地区宫颈癌组织中HPV16E6的热点突变为Nt178。     

醒神胶囊对抗小鼠中枢及躯体疲劳的作用初探

目的:研究中药制剂醒神胶囊(茶叶、人参等)抗小鼠中枢及躯体疲劳的作用.方法:连续给药6d,分别观察第1、第6天小鼠的体重、自主活动、转棒耐力以及戊巴比妥钠对其的催眠效应.结果:醒神胶囊可以明显增加小鼠自主活动次数,延长小鼠转棒耐力时间,延长戊巴比妥钠催眠的潜伏时间、缩短其睡眠时间;其作用呈剂量依赖和时间依赖性.结论:醒神胶囊有良好的提神醒脑健体功效.     

深圳市13∽15岁正常少年超声骨密度研究

目的 :了解深圳地区 13～ 15岁少年超声骨密度状况 ;建立该年龄段少年超声骨密度正常参考值。方法 :选择13～ 15岁深圳居住的正常少年 15 8例为检测对象 ,用定量超声骨密度仪 (QU S)测定受检者足跟部骨密度 (BMD)值 ,同时测量受检者体重、身高。结果 :13～ 15岁少年 BMD值 (g/ cm2 )分别为 13岁 :男性 0 .5 2 8± 0 .0 86、女性 0 .5 4 2± 0 .117,14岁 :男性 0 .4 87± 0 .0 79、女性 0 .5 0 8± 0 .10 8,15岁 :男性 0 .5 0 1± 0 .2 2 5、女性 0 .6 0 9± 0 .2 34。身高增长速度的快与慢和BMD变化有密切关系 ,体重与 BMD呈正相关 (r=0 .82 0 ,P<0 .0 1)。 13～ 15岁女孩 BMD值高于男孩 BMD值 ;女性有月经初潮者 BMD值高于无月经初潮者。二者之间比较 ,差异均有显著性 (r=0 .978,P<0 .0 0 1;r=0 .989,P<0 .0 0 1)。结论 :13～ 15岁少年足跟部 BMD与性别有关、与身高增长快慢亦有关系 ,体重、雌激素对 BMD有明显的影响 ,在此时期应加强改善营养 ,增加补钙等干预措施。     

脑脊液免疫球蛋白及白蛋白对脑膜炎的鉴别诊断意义

目的　分析脑脊液 (CSF)免疫球蛋白 (Ig)和白蛋白 (Alb)对病毒性脑膜炎 (VM )、结核性脑膜炎 (TM )、化脓性脑膜炎(PM )的鉴别诊断意义。方法　用速率散射比浊法测定VM 5 3例 ,TM 40例 ,PM 14例患者CSFIg和Alb的含量。结果　IgG、IgM和Alb在TM和PM中均显著高于VM组 (P <0 0 0 1) ,且以PM升高最明显 ,但TM和PM间 ,Alb及比值变化无显著性意义 ;与VM相比 ,TM以IgG变化最突出 ( 75 %) ,PM以IgM变化为显著 ( 78%) ;Alb在TM和PM升高比例最高 ( 10 0 %)。PM 14例中有 12例 ( 85 .7%)、TM 40例中仅 6例 ( 15 %)符合典型CSF常规和生化改变。如果把CSFAlb >3 0 0mg/L和IgG >61mg/L作为条件 ,则TM的诊断阳性率达 3 8/ 40 ( 95 %)。结论　TM和PM血脑屏障的破坏明显大于VM ,CSFIg和Alb的含量检测弥补了CSF常规分析的不足 ,有助于颅内感染的诊断和鉴别诊断     

二甲基亚砜对培养人视网膜色素上皮细胞增殖的影响

目的　探讨细胞分化诱导剂及端粒酶抑制剂二甲基亚砜 (dimethylsulfoxide ,DMSO)对人视网膜色素上皮细胞增殖的抑制作用。方法　本研究分实验组和对照组 ,对照组弃原培养液 ,加无血清培养液继续培养 ,实验组用不同浓度的DMSO 5、10、2 0、4 0mL·L-1分别作用于人RPE细胞 2 4、4 8、72、96h ,用MTT法检测DMSO对hRPE细胞生长的影响 ,流式细胞仪检测DMSO对hRPE细胞周期的影响。结果　 10mL·L-1DMSO处理的hRPE细胞从作用 4 8h开始 ,OD值 ( 0 .5 37± 0 .0 10 )小于对照组 ( 0 .6 4 7± 0 .0 2 2 ) ,有显著性差异 (P <0 .0 0 1) ,细胞生长受到抑制 ,且随浓度增加及作用时间延长 ,抑制越显著。流式细胞仪检测 2 0mL·L-1DMSO作用 72h细胞周期发生明显变化 ,G1期细胞由4 1 31%增加至 5 9.6 5 % ,S期由 32 .0 9%减至 2 1.2 1% ,G2 期由 2 6 .6 5 %减至 19 14 % ,细胞生长被阻滞在G1期 ,生长受到抑制。结论　DMSO能阻滞hRPE细胞于G1期 ,抑制hRPE细胞增殖且呈剂量依赖性。     

两种膨润土细胞毒性的体外试验研究

Objective To study comparatively the cytotoxicity induced by acid bentonite and organic bentonite.Methods The cytotoxicity of two kinds of bentonite was detected using CCK8 assay,neutral red uptake(NRU) assay,lactate dehydrogenase(LDH) leakage assay,apoptosis assay and hemolysis assay.In hemolysis assay human erythrocytes served as target cells and were exposed to the two kinds of bentonite at the doses of 0,0.3125,0.6250,1.2500 and 2.5000 mg/ml for ten min.In other four assays,human B lymphoblast cells (HMy2.CIR) served as target cells and were exposed to the two kinds of bentonite at the doses of 0,10,20,30,60,120 and 180 μg/ml for four h.Results In hemolysis assay,the hemolysis rates induced by two kinds of bentonite at all doses were significantly higher than that of control (P＜0.05);in CCK-8 assay,the cellular activities in acid bentonite group at the doses ≥30 μg/ml and in organic bentonite group at the doses ≥20μg/ml were significantly lower than that of control (P＜0.01);the similar results appeared in NRU assay and LDH assay,and the dose-effect relationship was observed in above 4 assays.In apeptosis assay,the early apoptosis cell rates in acid bentonite group at the dose of 180 μg/ml and in organic bentonite group at the doses of 120,180 μg/ml were significantly higher than that of control (P＜0.05).Moreover,the results of five in vitro assays indicated the eytotoxicity induced by organic bentonite was higher than that induced by acid bentonite.Conclusion Two kinds of bentonite could induce cytotoxicity,such as apoptosis and damage of cell membrane.The cytotoxicity of organic bentonite is higher than that of acid bentonite due to the different industrial treatment and characteristics of two kinds of bentonite particles.     

特发性黄斑裂孔玻璃体切割术后白内障超声乳化人工晶状体植入术

目的　评价特发性黄斑裂孔玻璃体切割术后并发性白内障的超声乳化人工晶状体植入术的临床疗效。方法回顾性分析 4 5例 4 5眼特发性黄斑裂孔玻璃体切割术后并发性白内障患者采用白内障超声乳化人工晶状体植入术 :2 5例 2 5眼行巩膜隧道切口超声乳化术 ,2 0例 2 0眼行透明角膜切口超声乳化术 ,观察术中、术后并发症及患眼视力、黄斑变化情况。结果　术后 3月 ,所有患眼视力均有不同程度的提高 ,最佳矫正视力 0 .0 1～ 0 .1者 6眼 ,0 .2～ 0 .3者 18眼 ,0 .4～ 1.0者 2 1眼 ,术后早期并发症为角膜水肿 3眼 ,黄斑区视网膜水肿 3眼 ,术后远期并发症为后发性白内障 11眼 ,需Nd :YAG激光治疗 ,黄斑裂孔重新裂开 2眼。结论　对于特发性黄斑裂孔玻璃体切割术后并发性白内障 ,超声乳化人工晶状体植入术操作安全、临床效果好、术后并发症轻微 ,是目前最为理想的治疗方法     

先天性肛门直肠畸形Hoxc-8基因表达的研究及其意义

目的　对先天性肛门直肠畸形 (congenitalanorectalmalformations,CAM )末端直肠组织Hoxc 8基因表达水平的测定以探讨其分子水平的发病机制。方法　应用RT PCR(逆转录 聚合酶链反应 )技术检测 32例CAM的末端直肠组织及 8例对照组直肠标本的Hoxc 8基因表达 ,以 β actin基因 (是一种在组织中表达稳定的基因 )作为阳性内对照 ,观察Hoxc 8基因的表达水平。结果　CAM组Hoxc 8表达的相对比值为 0 .892± 0 .0 6 8,对照组则为 1.0 0 6± 0 .0 82。Hoxc 8在CAM组的表达与对照组比较差异有非常显著性意义 ,P <0 .0 1。结论　CAM的发生与Hoxc 8基因密切相关 ,该基因在肛门直肠组织中表达减弱可能参与导致其相应的靶器官发育异常而产生畸形。