氨基胍对去卵巢大鼠主动脉晚期糖化终末产物及血脂的影响

将 6月龄雌性SD大鼠随机分为假手术组 (sham)、去卵巢组 (OVX)和去卵巢 +氨基胍组 (OVX +AG)。去除双侧卵巢 2周后用氨基胍治疗 13周。禁食 2 4h ,放血处死动物 ,取血和主动脉 ,分别测定主动脉AGEs、血脂和血清过氧化物含量。结果表明 ,与假手术组比较 ,去卵巢组主动脉AGEs、甘油三脂 (TG)、氧化低密度脂蛋白 (OX LDL)、丙二醛 (MDA)均明显升高 (分别为P <0 0 1,P <0 0 5 ,P <0 0 5和P <0 0 1) ;高密度脂蛋白 胆固醇 (HDL C)、载脂蛋白AⅠ (apo AⅠ )和超氧化物歧化酶 (SOD)活性均显著降低 (均P <0 0 1)。氨基胍组与病理组比较 ,主动脉AGEs、血清TG、MDA和OX LDL均明显降低 (分别为P <0 0 1,P <0 0 5、P <0 0 5和P <0 0 1) ;HDL C、apo AⅠ和SOD活性均显著升高 (均P <0 0 1)。提示氨基胍通过降低去卵巢大鼠主动脉AGEs含量 ,降低大鼠血清OX LDL和TG水平 ,升高HDL C、apo AⅠ水平和SOD活性 ,发挥其对心血管的保护作用     

大鼠CD4+ CD25+ T调节细胞的分离培养及其功能分析

目的:研究大鼠CD4 CD25 T调节细胞(Tr)的分离培养,并对其功能进行初步分析。方法:无菌条件下切取大鼠脾脏分离脾淋巴细胞。用免疫磁珠细胞分离系统(MACS)分选CD4 CD25 T细胞,并以流式细胞术检测其纯度后,对其进行扩增。采用混合淋巴细胞反应研究CD4 CD25 Tr细胞对CD4 CD25-T细胞的免疫抑制作用。用ELISA法检测培养上清中IL-2、IFN-γ及IL-10水平的差异。结果:MACS分离的CD4 CD25 T细胞的纯度达86%~93%。该细胞与CD4 CD25-T细胞相比能特异性地表达Foxp3基因。体外培养中能明显抑制效应T细胞增殖及其分泌IFN-γ、IL-2,但其自身能分泌Th2型细胞因子IL-10。结论:采用MACS系统阴性加阳性分选,可高效快速的获得理想纯度和免疫抑制功能的大鼠CD4 CD25 T调节细胞,该细胞对CD4 CD25-T细胞具有明显的免疫抑制作用,并能特异性的表达Foxp3基因。     

体外培养乳鼠海马神经元的扫描电镜观察

目的：研究体外培养海马神经元的表面超微结构。方法：用扫描电镜对海马培养细胞进行形态学观察。结果：体外培养的海马神经元具有梭形、锥体形、多角形等多种形态，细胞突起长短不一，粗细不匀，可见形态不同，大小不均的膨体样结构，树突上可见树突棘，突起末端可见生长锥，突起之间有连接。结论：体外培养的海马神经元具有与在体细胞相似的形态学特征。     

Identification of mutations in the Bruton's tyrosine kinase gene,including a novel genomic rearrangements resulting in large deletion,in Korean X-linked agammaglobulinemia patients

Mutations in the Bruton's tyrosine kinase (BTK) gene are responsible for X-linked agammaglobulinemia (XLA). We identified BTK mutations in six patients with presumed XLA from unrelated Korean families. Four out of six mutations were novel: two missense mutations (P565T, C154Y), a point mutation in a splicing donor site (IVS11+1G>A), and a large deletion (a 6.1-kb deletion including BTK exons 11–18). The large deletion, identified by long-distance PCR, revealed Alu-Alu mediated recombination extended from an Alu sequence in intron 10 to another Alu sequence in intron 18, spanning a distance of 6.1 kb. The two known mutations consisted of one missense (G462D) mutation, and a point mutation in a splicing acceptor site (IVS7−9A>G). This study suggests that large genomic rearrangements involving Alu repeats are few but an important component of the spectrum of BTK mutations.     

PENA方法的建立及与ELISA IgM检测CMV的比较

目的　介绍一种敏感、稳定、快速、简便的实验室检测CMV的方法 ,同时探讨该种新方法与ELISA检测CMV方法的优、缺点。方法　对 5 5 2例病人应用间接荧光免疫法测定细胞核中的特异病毒早期抗体 (PENA)和ELISA法测定IgM抗体。结果　PENA方法 :强阳性 88例 ,阳性率 15 4 9% ,弱阳性 2 73例 ,阳性率 5 9 4 6 % ;ELISA -IgM方法 :阳性 34例 ,阳性率6 16 %。结论　PENA方法操作简便 ,与ELISA方法相比较 ,可对CMV感染进行早期测定及诊断 ,并可区分既往感染和即时感染 ,具有敏感性和稳定性 ,是测定小儿CMV感染的一种较好的方法     

国人股骨假体设计的解剖学基础

目的 :为选择和设计适合中国人的髋关节假体提供参考值。方法 :对 12 9例成人股骨标本进行X线摄片 ,并对其中 2 0例标本行CT扫描 ,测量小转子及其上下 2cm平面处髓腔宽度、前倾角等参数。结果 :小转子处髓腔宽为 ( 2 4.85± 2 .94)mm ,其上 2cm处为 ( 4 2 .47± 5 .14 )mm ,其下 2cm处为 ( 17.87±3 .0 4)mm ,个体间有较大差异。CT测量值与X片测量值无明显统计学差异。结论 :股骨上段的解剖学资料 ,可为选择和设计适合国人的人工髋关节假体提供参考。     

细胞性一氧化氮供体的建立及其对肿瘤细胞凋亡的诱导效应

目的一氧化氮（ＮＯ）供体细胞系的建立及其对肿瘤细胞凋亡的诱导效应研究。方法采用３Ｈ－胍氨酸转换法进行ＮＯ合成酶（ＮＯＳ）活性测定；亚硝酸盐检测；ＤＮＡ片段的提取及凝胶电泳分析；凋亡细胞的ＤＡＰＩ染色观察；Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析。结果将ｉＮＯＳ真核表达质粒、ｐＣＭＶ／ｉＮＯＳ转染至Ｓｐ２／０骨髓瘤的变异株中，并获得能稳定表达ｉＮＯＳ和合成ＮＯ的重组细胞系（ＳＰｍｔ／ｉＮＯＳ），表达ｉＮＯＳ的效率为每升培养物含４００μｇ蛋白。利用该细胞作ＮＯ细胞性供体，成功地证实ＮＯ能诱导Ｓｐ２／０骨髓瘤细胞发生凋亡。结论所建细胞性ＮＯ供体应用于ＮＯ的生物学功能研究具有ＮＯ合成稳定；更能模拟体内细胞间ＮＯ的信息传递过程；不需任何外源刺激即可合成ＮＯ等独特优点。所建ＮＯ供体细胞可以用于肿瘤细胞凋亡的研究。     

2450MHz介质复介电常数的测量

目的测量2450MHz频率下蒸馏水和不同浓度NaCl溶液的复介电常数,用以判定系统的可靠性和稳定性.方法根据微扰法得到复介电常数的测量公式,然后通过实验对已知参数的蒸馏水和NaCl溶液进行测量,并计算其复介电常数和电导率,验证计算结果的可靠性和稳定性.结果对计算结果进行统计分析和误差分析,其均值、标准差和变异系数表明,最终结果可与M.I.T标准较好地吻合.结论这种系统可较好地测量2450MHz频率下高损耗介质的复介电常数,测量系统的主要误差是由介质体积的误差引起的,因此精确测量介质体积是测量生物组织等高损耗介质复介电常数的关键.     

Anti-thrombin is expressed in the benign prostatic epithelium and in prostate cancer and is capable of forming complexes with prostate-specific antigen and human glandular kallikrein 2

Anti-thrombin, a member of the serpin family and an inhibitor of thrombin and blood coagulation factor Xa, was recently shown to inhibit angiogenesis and tumor growth. In the present study, we examined the expression of anti-thrombin in benign and malignant prostate gland. Using immunohistochemistry, anti-thrombin was found in prostate epithelium and stroma cells. Tissue microarrays of tumors (n = 112) and three different prostate cancer cell lines (PC-3, LNCaP, and DU-145) were all positive for anti-thrombin. Abundant expression in a population of prostatic tumor cells was further evidenced by in situ hybridization experiments. The immunostaining for anti-thrombin was confined to the cytoplasm, was most intense in Gleason grade 3 tumors, and in part overlapped with that of prostate-specific antigen. Western blotting of benign and malignant tissue homogenates revealed a predominant 58-kd anti-thrombin immunoreactive component. In vitro, anti-thrombin formed complexes more readily with human kallikrein 2, particularly in the presence of heparin, and less efficiently with prostate-specific antigen. Both complexes could be recognized by polyclonal and monoclonal IgGs against anti-thrombin. We conclude that anti-thrombin is widely expressed in prostate cancer but is gradually lost in tumors of high Gleason grade. Anti-thrombin may act as a local anti-angiogenic factor, the effect of which is partially lost in poorly differentiated prostatic tumors.     

腺病毒伴随病毒表达载体表达人乳头瘤病毒18型E6E7基因构建及其转化作用的鉴定

目的：探讨人乳头瘤病毒（HPV）的E6E7基因在细胞恶性转化中所起的作用。方法：将人乳头瘤病毒（HPV）的E6E7基因克隆至腺病毒伴随病毒表达载体中，通过包装的重组病毒感染，将E6E7基因导入并整合到永生293细胞的基因组中。结果：本研究成功地构建了HPV18 E6E7 AAV病毒并感染了永生293细胞，PCR／Southern杂交分析表明E6E7基因在转化细胞293TL中确有表达，转化细胞293TC和293TL具有明显的转化表型，和亲本293细胞相比，生长速度快，接触抑制消失，集落形成率提高20倍，且集落明显增大，形成时间短。结论：成功地构建了HPV18 E6E7 AAV病毒，HPV18 E6E7基因引起永生化人上皮细胞293的恶性转化。此病毒可用于感染正常上皮细胞，研究其致癌机制。