沉默B7-H3基因抑制人恶性血液病裸鼠移植瘤的体内成瘤和转移

目的：探讨靶向B7 H3基因沉默对人恶性血液病细胞株在裸鼠体内成瘤和转移的影响及机制。方法： 应用实时荧光定量PCR（real-time quantitative polymerase chain reaction,qPCR）和流式细胞术（flow cytometry,FCM）检测13株恶性血液病细胞中B7 H3分子的表达水平,筛选高表达的U937、Maver和Z138细胞。分别利用慢病毒转染技术靶向敲减B7-H3,建立稳定低表达细胞株,应用qPCR和FCM验证基因沉默效果。将U937、Maver和Z138各自分为空白对照组（non-infected control group,CON）、靶向B7-H3敲减组（B7-H3 knockdown group,KD）和阴性无关序列对照组（negative nontargeted control infected group,NC）,将以上9组分别构建裸鼠皮下移植瘤模型,比较肿瘤生长和转移情况,免疫组织化学（immunohistochemistry,IHC）染色检测Ki-67表达,蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测基质金属蛋白酶2（matrix metalloproteinase 2,MMP-2）水平。结果： 筛选B7-H3分子高表达的U937、Maver和Z138细胞进行靶向敲减B7-H3,成功建立稳定低表达细胞株。U937、Maver和Z138细胞各自的KD组与NC组比较,观察终点的平均肿瘤生长抑制率分别为61.83%（F=43.78,P<0.05）、59.12%（F=36.51,P<0.05）和67.37%（F=40.29,P<0.05）,而各自NC组与CON组相比,肿瘤体积增长趋势差异无统计学意义（P>0.05）。在所有移植瘤裸鼠模型中肝转移最常见,KD组裸鼠的远处转移较相应NC组明显降低。3种细胞各自KD组的Ki-67指数均较相应NC组显著下降(U937移植瘤：40.3%±5.2% vs. 79.1%±6.3%, q=30.31,P<0.05;Maver移植瘤：35.2%±6.4% vs. 69.6%±5.1%, q=24.82,P<0.05;Z138移植瘤：38.4%±7.1% vs. 75.7%±4.8%, q=28.07,P<0.05）, 而NC组与CON组Ki 67表达差异无统计学意义（P>0.05）。3种细胞各自KD组肿瘤组织的MMP-2蛋白表达显著降低（U937移植瘤：q=14.59,P<0.05;Maver移植瘤：q=9.25,P<0.05;Z138移植瘤：q=11.04,P<0.05）, NC组与CON组MMP-2表达差异无统计学意义（P>0.05）。结论： 靶向B7-H3基因沉默能够抑制人恶性血液病细胞在裸鼠体内的成瘤和转移能力,其机制可能与Ki-67和MMP-2的表达下调有关。     

年龄相关性白内障患者眼轴长度与角膜曲率、角膜散光、前房深度和眼压的关系

目的 探讨年龄相关性白内障患者眼轴长度与角膜曲率、角膜散光、前房深度和眼压的关系.方法 本次研究对象为在武汉大学中南医院行白内障手术的年龄相关性白内障患者368例(368眼).患者的眼轴长度、角膜曲率、角膜散光和前房深度均应用IOL-Master(德国蔡司公司)进行测量,眼压采用iCare眼压计测量.使用随机抽样法从不同眼轴长度患者中随机抽出80例(80眼),分别为短眼轴组、中眼轴组和长眼轴组.各组间比较采用单因素方差分析.眼轴长度和角膜曲率、角膜散光、前房深度及眼压的关系采用Spearman相关分析.结果 眼轴长度与角膜曲率(r=-0.424,P＜0.001)、眼轴长度与角膜散光(r=0.138,P=0.008)、眼轴长度与前房深度(r=0.561,P＜0.001)均相关.其中,眼轴长度与角膜曲率呈负相关,与角膜散光和前房深度呈正相关,但与角膜散光相关性较弱,而与角膜曲率和前房深度中度相关.眼轴长度与眼压无相关性(r =0.064,P=0.326).中眼轴组和长眼轴组角膜曲率与短眼轴组比较,差异均有统计学意义(均为P＜0.001);而中眼轴组与长眼轴组差异无统计学意义(P =0.438).中眼轴组与短眼轴组的角膜散光差异无统计学意义(P=0.333),同样中眼轴组与长眼轴组的角膜散光差异亦无统计学意义(P =0.718),但是短眼轴组与长眼轴组的角膜散光差异有统计学意义(P =0.042).短眼轴组的前房深度与中眼轴组(P=0.001)和长眼轴组(P＜0.001)比较差异均有统计学意义,中眼轴组与长眼轴组的前房深度差异亦有统计学意义(P ＜0.001).3组眼压两两比较差异均无统计学意义(均为P＞0.05).结论 角膜曲率与眼轴长度呈负相关;角膜散光与眼轴长度相关性弱,只有眼轴长度明显增长,才有可能表现出角膜散光度数增加;前房深度与眼轴长度中等相关,并随眼轴增长而加深;眼轴长度与眼压无相关性.     

伴恶性高血压的原发性IgA肾病临床、病理及中医证候特征研究

背景 IgA肾病（IgAN）是全世界最常见的原发性肾小球疾病,同时也是引起肾实质恶性高血压（MHT）的主要原因之一。既往研究认为伴MHT的IgAN临床病情和肾脏病变程度均比无MHT的IgAN严重,但尚不清楚IgAN患者发生MHT的中医证候特点。 目的 分析原发性IgAN患者发生MHT的中西医相关因素,探索其中医证候特点。 方法 纳入2013年12月至2021年9月在中国人民解放军总医院第一医学中心经肾穿刺活检确诊的518例原发性IgAN患者为研究对象,应用PASS 15.0软件中的变量相关性检验进行样本量估算,最终纳入伴MHT的IgAN患者17例作为IgAN-MHT组,按照1∶5比例随机抽取同时期85例无MHT的IgAN患者作为IgAN组,比较两组临床、病理及中医证候的差异。采用Lasso回归对93个中医证候信息进行筛选降维,进一步采用多因素Logistic回归分析探讨伴MHT的IgAN的中医证候相关因素。 结果 IgAN-MHT组首发临床表现为头痛头晕或恶心呕吐比例,临床诊断为肾病综合征比例,入院时平均动脉压、最高收缩压、最高舒张压、血尿素氮、血肌酐、血无机磷、血镁、24 h尿蛋白定量水平、慢性肾脏病（CKD） 3~5期的比例、血瘀证比例,气虚证中神疲乏力、四肢倦怠、胫酸腿软、头目眩晕、头痛、恶心、呕吐症状的比例,阴虚证中视物模糊、飞蚊症症状的比例,血瘀证中爪甲青紫、舌色紫暗症状的比例,肾内动脉硬化比例高于IgAN组;而首发临床表现为尿检异常比例、高血压病史比例、临床诊断为慢性肾炎综合征的比例、血IgM、血IgG水平、估算肾小球滤过率（eGFR）水平低于IgAN组（P<0.05）。两组伴肾小管萎缩/间质纤维化病变（T病变）比例比较,差异有统计学意义（P<0.05）。IgAN-MHT组的常见中医证型为气阴两虚兼血瘀证。IgAN-MHT和血瘀证呈正相关（P<0.05）,IgAN-MHT患者男性比例、24 h尿蛋白定量水平和气虚证呈正相关（P<0.05）,无机磷、血钾和阴虚证呈负相关（P<0.05）,IgAN-MHT患者肾小管萎缩/间质纤维化和血瘀证呈正相关（P=0.040）。多因素Logistic回归分析结果显示,头痛〔OR=7.895,95%CI（1.643,37.935）,P=0.010〕、视物模糊〔OR=5.499,95%CI（1.207,25.053）,P=0.028〕、口干喜饮〔OR=10.079,95%CI（2.289,44.373）,P=0.002〕、爪甲青紫〔OR=18.312,95%CI（2.179,153.884）,P=0.007〕是伴MHT的原发性IgAN的影响因素。 结论 （1）伴MHT的原发性IgAN患者肾功能更差,肾脏病理损伤更重。（2）伴MHT的原发性IgAN的常见中医证型为气阴两虚兼血瘀证。（3）伴MHT的原发性IgAN患者临床、病理指标与中医气虚证、阴虚证和血瘀证具有一定相关性。（4）中医证候中头痛、视物模糊、口干喜饮、爪甲青紫是伴MHT的原发性IgAN相关因素。早发现、早诊断、早治疗,关注并改善患者的气虚、阴虚、血瘀相关症状,有可能减少IgAN患者伴MHT的发生。     

心房颤动患者左心房血清炎性因子和血管内皮损伤标志物水平变化与血栓的相关性研究

背景心房颤动(以下简称房颤)容易合并脑卒中和外周动脉栓塞。研究房颤血栓形成的具体机制并进行有效干预以降低血栓形成的风险,是目前房颤基础和临床研究的重要方向。目的 探讨房颤患者左心房血清炎性因子和血管内皮损伤标志物水平变化与血栓的相关性。方法 选取2017年7月至2019年12月在广西医科大学第一附属医院接受开胸心脏手术的瓣膜性心脏病患者29例和冠心病患者10例,依据心律情况分为窦性心律组15例和房颤组24例。房颤组的24例患者再依据血栓情况分为无左心耳血栓和有左心耳血栓两个亚组,分别为房颤+左心耳血栓亚组和房颤无左心耳血栓亚组,各12例。收集患者的一般资料,并检测左心房内径(LAD)、左心室射血分数(LVEF),术中抽取左心房血液标本检测蛋白激酶B(AKT)、核转录因子κB(NF-κB)、超敏C反应蛋白(hsCRP)、白介素(IL)-6、IL-8、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、内皮素(ET-1)、一氧化氮(NO)、血管性血友病因子(vWF)、细胞间黏附分子(ICAM-1)及血管细胞黏附因子(VCAM-1)水平,并检测房颤+左心耳血栓亚组患者血栓面积。房颤+左心耳血栓亚组患者LAD、LV...     

糖尿病发病时间趋势及其与中国内脏脂肪指数的关系：一项前瞻性队列研究

背景 糖尿病仍是全球重大公共卫生问题,横断面研究发现内脏脂肪与糖尿病患病密切相关,但糖尿病发病时间趋势及其与中国内脏脂肪指数（CVAI）关系的前瞻性队列研究较少。 目的 通过前瞻性队列研究分析上海市浦东新区居民糖尿病发病时间趋势及其与CVAI的关系,为其科学防治提供依据。 方法 本研究为前瞻性队列研究。选取2013年1—7月参与浦东新区慢性病危险因素监测项目的12个乡镇街道的35个村、居委的居民5 236人为研究队列。收集其基线资料,内容包括CVAI、内脏脂肪指数（VAI）、BMI、腰围（WC）、腰臀比（WHR）、腰高比（WHtR）、身体形态指数（ABSI）和身体肥胖指数（BAI）,分别于2016年和2019年进行追踪随访;截至随访结束（2019年10月）,通过问卷调查、实验室检查、医疗系统就诊信息和生命统计信息系统判断该研究队列糖尿病新发情况。依据基线CVAI、VAI、BMI、WC、WHR、WHtR、ABSI、BAI四分位数将纳入人群分别分为第Q1~Q4四分位数：CVAI各组人数依次为1 306、1 307、1 307、1 307人;VAI各组人数依次为1 300、1 316、1 306、1 306例;BMI各组人数依次为1 305、1 302、1 312、1 311人;WC各组人数依次为1 302、1 273、1 287、1 367人;WHR各组人数依次为1 180、1 203、1 332、1 514人;WHtR各组人数依次为1 199、1 393、1 400、1 237人;ABSI各组人数依次为1 316、1 302、1 302、1 308人;BAI各组人数依次为1 310、1 304、1 308、1 307人。采用多因素Cox回归分析CVAI和其他肥胖指标与糖尿病发病的关系;采用受试者工作特征曲线（ROC曲线）比较CVAI与其他肥胖指标的预测作用。 结果 浦东新区居民2013—2016年糖尿病发病密度为33.55/1 000人年,2017—2019年糖尿病发病密度为23.25/1 000人年,随着年龄的增长,糖尿病总发病密度呈现出升高趋势（2013—2016年：χ2=28.503,P趋势<0.001;2017—2019年：χ2=25.600,P趋势<0.001）。截至2016年,基线CVAI四分位数越高,糖尿病累积发病率（CVAI：χ2=131.865,P趋势<0.001）和发病密度（CVAI：χ2=100.105,P趋势<0.001）均越高。调整相关混杂因素后的多因素Cox回归分析结果显示,与CVAI处于Q1相比,CVAI处于Q4的男性糖尿病的发病风险增加79.4%（HR=1.794,95%CI=1.044~3.083,P<0.05）,女性糖尿病的发病风险增加371.2%（HR=4.712,95%CI=2.601~8.538,P<0.05）。ROC曲线结果显示,在预测男性糖尿病发病情况中,CVAI对男性糖尿病预测的ROC曲线下面积（AUC）为0.600（95%CI=0.561~0.640）,识别男性糖尿病的约登指数为0.181,截断值为104.118;Delong检验结果显示,CVAI对女性糖尿病预测的准确性最高（AUC=0.699）,且在识别女性糖尿病时有最大的约登指数值0.317,最佳截断值为104.609。 结论 2013—2019年上海市浦东新区居民糖尿病发病密度随年龄的增长呈升高趋势;且相较于其他肥胖指标,CVAI可作为预测糖尿病发病风险的指标。     

基于UPLC-MS/MS的松龄血脉康胶囊血清药物化学研究

目的：采用超高效液相色谱-质谱法研究松龄血脉康胶囊的血清药物化学,初步揭示松龄血脉康胶囊在体内潜在的药效物质基础。方法：采用C₁₈RRHD色谱柱(150 mm×2.1 mm,1.8μm),流动相为0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈溶液。质谱数据以正、负离子2种模式获得。对灌胃给予松龄血脉康胶囊混悬液后的大鼠血浆和松龄血脉康胶囊提取物进行分析和比对,初步确定松龄血脉康胶囊中的化学成分、血浆样品中的原型成分和代谢产物。结果：根据保留时间和多级质谱碎片比对,初步鉴定出松龄血脉康胶囊中的76个成分,以及灌胃松龄血脉康胶囊后大鼠血浆中的20个移行成分,包括9个原型化合物和11个代谢物。结论：初步鉴定出松龄血脉康胶囊化学成分及其在大鼠血浆中的移行成分,为进一步的药理学和活性机制研究提供了参考。     

细胞焦亡对肝癌发生发展的影响及中医药的干预作用

细胞焦亡是一种新发现的程序性细胞死亡方式,在肝癌中发挥着关键作用。故拟基于细胞焦亡的分子机制及其在肝癌发病机制中的作用进行深入分析,并结合中医药在调节焦亡肝癌发展过程中的作用进行探讨,以期为临床提供新的治疗思路。     

高健生治疗老年性上睑下垂临床经验总结

高健生认为上睑下垂主要责于脾、肾,可见气虚、阳虚,久多挟瘀。治疗上前者当健脾益气、升阳举陷,方用益气聪明汤、补中益气汤加减;后者当益气活血、升阳通络,方以补阳还五汤加减。益气温阳、升阳、祛瘀之品相辅相成,充分体现了高老临证择药制方配伍之精湛。     

HPLC-MS/MS测定大鼠血浆中刺五加、贯叶连翘提取物主要活性成分浓度及其药动学研究

目的 建立HPLC-MS/MS测定刺五加提取物、贯叶连翘提取物主要活性成分在大鼠血浆中药物浓度的方法,应用于刺五加提取物、贯叶连翘提取物及其联用时主要活性成分在大鼠体内的药动学研究,并使用DAS3.2.8软件对主要活性成分的药动学参数进行非房室模型拟合.方法 以Welch Ultimate XB-C18(2.1 mm×...     

清热利湿止带方治疗湿热下注型带下病临床研究

目的：观察清热利湿止带方治疗湿热下注型带下病的临床疗效。方法：选取湿热下注型带下病97 例为研究对象,随机分为试验组49 例与对照组48 例。试验组采用自拟清热利湿止带方治疗,对照组给予克霉唑阴道片、甲硝唑片等治疗。2 组疗程均为7 d,观察比较2 组临床疗效、症状改善情况、阴道清洁度、不良反应及复发情况。结果：试验组总有效率为97.96%,对照组为87.50%,2 组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。试验组白带色质味异常、口苦而腻、缺乏食欲、尿黄、接触痛等症状消失率高于对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。试验组阴道清洁度分级优于对照组,经秩和检验,差异有统计学意义（P＜0.05）。试验组不良反应率为2.04%,对照组为29.17%,2 组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。试验组复发率为4.08%,对照组为19.05%,2 组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：清热利湿止带方可改善湿热下注型带下病患者临床症状及阴道清洁度,且复发率低,不良反应较少。