骨髓基质干细胞复合羟基磷灰石-磷酸三钙修复骨缺损过程中的微循环变化

目的:了解骨髓基质干细胞复合羟基磷灰石-磷酸三钙构建组织工程骨修复骨缺损过程中,实验动物血液流变学和骨缺损修复区血流量的变化。方法:实验于2006-05/2007-01在解放军兰州军区总医院脊柱外科实验室完成。①构建组织工程骨:取健康新西兰白兔2只,双侧胫骨结节处穿刺抽取红骨髓8mL,分离培养并诱导骨髓基质干细胞;将复合羟基磷灰石-磷酸三钙支架材料以1×109L-1密度接种经诱导培养的骨髓基质干细胞。②实验方法:选择20只新西兰白兔,制作15mm长的桡骨节段性骨缺损模型,根据植入不同移植材料分为实验组和对照组各10只,实验组植入组织工程骨,对照组植入单纯羟基磷灰石-磷酸三钙。③实验评估:观察动物术后1h、7,14d血液流变学和术后14d骨缺损修复区血流量的变化。结果:20只兔均进入结果分析。①血液流变学结果:术后1h,2组各项指标比较无差异;术后7d,实验组全血黏度、血浆黏度和红细胞聚集指数低于对照组(P<0.05,0.01);术后14d,实验组全血黏度和红细胞聚集指数低于对照组(P<0.01)。②血流量比较:2组右侧桡骨正常皮质骨血流量无差异;实验组左侧骨缺损修复区皮质骨或骨痂血流量高于对照组(P<0.01)。结论:与单纯复合羟基磷灰石-磷酸三钙材料比较,骨髓基质干细胞复合羟基磷灰石-磷酸三钙的组织工程骨可改善骨缺损修复区的微循环。     

原发性高血压患者左室构型与儿茶酚胺的关系

目的：了解原发性高血压心脏超声构型的分型与血浆儿茶酚胺水平的关系。方法：实验于2003—02／2005—07在泰安市中心医院完成。选择102例原发性高血压患者，采用超声心动图（Ganau标准）将患者分为：①正常构型组：左室质量指数及相对室壁厚度均在正常范围。②向心性重构组：左室质量指数正常，但相对室壁厚度增加。③向心性肥厚组：左室质量指数与相对室壁厚度均增加。④离心性肥厚组：左室质量指数增加但相对室壁厚度正常。另选择50名年龄相当的健康查体者做为正常对照组。高血压患者停用降压药2周，所有受检者实验前1d禁用烟、酒、茶及咖啡，禁食12h，于清晨采静脉血10mL，以高效液相色谱法检测其血浆中的肾上腺素及去甲肾上腺素含量。结果：152名研究对象全部进入结果分析。向心性重构组、向心性肥厚组和离心性肥厚组的肾上腺素水平、去甲肾上腺素水平均高于正常对照组及正常构型组（P分别〈0．01），而且向心性重构组〉正常构型组，向心性肥厚组〉向心性重构组，离心性肥厚组〉向心性肥厚组（P〈0．05或0．01）。结论：原发性高血压患者血浆肾上腺素、去甲肾上腺素水平的升高促进了左室构型的发展。     

局灶性脑缺血大鼠脑内生长相关蛋白43表达与滋补肝肾中药的干预效应

目的:观察局灶性脑缺血大鼠脑内生长相关蛋白43表达与滋补肝肾中药合剂干预效果的关系。方法:实验于2004-06/2005-06在山东大学医学院药理实验室、山东中医药大学中西医结合肿瘤防治中心实验室完成。雄性Wistar大鼠49只按随机数字表法随机分为假手术组、模型组(分设1,2,3周时间点)、中药组(分设1,2,3周时间点),每组7只。模型组与中药组进行右侧近端大脑中动脉电凝术造成大鼠局灶性脑缺血模型,假手术组行同样开颅术,但不凝闭大脑中动脉,其余操作同模型组。于造模成功后第6天起中药组灌胃给予滋补肝肾中药复方,剂量为9g/(kg·d),余2组分别灌胃给予同等量生理盐水,1次/d。假手术组大鼠于术后1周时麻醉下断头处死,模型组与中药组分别于给药1,2,3周时处死,取材后用免疫组化法观察局灶性脑缺血大鼠脑内生长相关蛋白的表达。结果:纳入大鼠49只,造模不成功或死亡14只,最后每组5只共35只大鼠进入结果分析。模型组生长相关蛋白阳性信号密度值在给药1周、2周及3周组与假手术组比较差异均无显著性意义[(15.7±1.4)%,(15.3±1.3)%,(15.4±1.1)%,(15.1±1.3)%,P>0.05];中药组在治疗1周后生长相关蛋白阳性信号密度值较假手术组及模型组差异尚无显著性,但2周及3周组表达显著增强,与模型组和假手术组比较,差异有显著性意义[(23.4±1.3)%,(24.1±1.4)%,P<0.01]。结论:滋补肝肾中药复健片能增强局灶性脑缺血大鼠脑内生长相关蛋白43的表达,从而促进缺血性脑卒中后的神经功能重塑。     

椎间盘退行性变的影响因子及其基因和组织工程结合基因治疗

目的:从各领域和不同角度探讨椎间盘退行性变的病因及其作用机制,并探索基因治疗及组织工程结合基因治疗对延缓或逆转早、中、晚期椎间盘退行性变的可能性。资料来源:应用计算机检索Pubmed数据库1998-06/2006-01有关椎间盘退行性变影响因子及生物学治疗进展的文章,检索词“intervertebral disc degeneration,nucleus pulposus,interleukin-1 beta,interleukin-6、interleukin-18,potential therapeutic model”,限定文章语言种类为English。同时检索VIP维普、CNKI中国期刊全文数据库2000-06/2006-08期间的相关文章,检索词“椎间盘退行性变、髓核、促炎因子、基因治疗”,限定文章语言种类为中文。资料选择:对资料进行初审,选取符合研究要求的有关文章找全文。纳入标准:①有关椎间盘退行性变影响因子的基础研究及临床研究。②有关基因治疗退行性变椎间盘的相关研究。③有关人工椎间盘移植的研究。排除标准:重复或类似的同一研究、个案报道等。资料提炼:共收集到123篇有关椎间盘退行性变影响因子及生物学治疗进展的文章,57篇符合研究要求(其中35篇为椎间盘退行性变影响因子基础研究方面的文献,22篇涉及基因治疗、人工椎间盘移植方面)。资料综合:①国内对椎间盘退行性变影响因子及治疗的研究:从椎间盘营养供应、细胞凋亡、基质酶活性、生物力学等方面研究与椎间盘退行性变有关的相关因素,如丝氨酸蛋白酶在退行性变椎间盘的终板中活性极高,基质金属蛋白酶3在细胞外基质成分的降解过程中起关键作用,还能通过激活其他非活性基质金属蛋白酶而对软骨基质的降解发挥间接作用。基质金属蛋白酶3表达阳性的细胞比例与MRI检查中的椎间盘退行性变程度有显著相关性,且突出型腰椎间盘中基质金属蛋白酶3表达阳性的细胞比例显著高于未突出型;;突出椎间盘组织可以诱导碱性成纤维细胞生长因子,且与突出类型、病程相关,提示碱性成纤维细胞生长因子在腰椎间盘组织退行性变、自发性吸收中有重要的促进作用等。并探讨相关基因(成骨蛋白1、骨形态发生蛋白7)在延缓或逆转椎间盘退行性变治疗上的可行性。②国外对椎间盘退行性变影响因子及治疗的研究:从以上几方面研究椎间盘退行性变的因素及机制,如胰岛素样生长因子和血小板来源的生长因子均可降低椎间盘细胞的凋亡指数,为该病的防治提供了新的思路;;白细胞介素1使椎间盘纤维环细胞产生的前列腺素E2和磷脂酶A2增加,减少纤维环中总的蛋白多糖含量;;最近研究发现白细胞介素18是强有力的致炎因子之一,在退行性变的关节软骨及椎间盘软骨终板呈一定表达,遂被认为在椎间盘退行性变中发挥重要作用,但少见报道。同时探索用腺相关病毒体外转染人椎间盘细胞,体内转染兔椎间盘细胞,并证实自体同源椎间盘细胞、同源软骨、同种异体的完整椎间盘或活性椎间盘细胞移植可以延缓椎间盘退行性变,又以腺病毒转染SV40基因的方法成功构建了永生化的人髓核细胞株,可作为组织工程椎间盘的种子细胞。③国内外关于椎间盘退行性变影响因子及治疗研究的展望:提供更多的临床样本,探索创新出更多、更细致的思路来综合研究椎间盘退行性变的可能机制和根本治疗方法。结论:椎间盘退行性变的确切机制目前尚不清楚,其生物学治疗仍处于动物实验研究阶段,只有通过大量的临床样本及动物试验,并探求出更加深入细致的研究方法,尤其是最热点及最有前途的组织工程方法,才能为在最终应用于人椎间盘退行性变的治疗上提供切实可靠的治疗手段。     

外括约肌主动收缩放松训练改善肛门失禁患者的肛门节制

目的:观察肛门失禁患者进行外括约肌主动收缩和放松的生物反馈训练后肛门节制功能的变化,分析外括约肌主动收缩训练改善肛门节制的可能机制。方法:于1998-10/1999-05在解放军总医院小儿外科采用CTD-SYNECTICS公司生产的直肠测压仪对27例正常儿童和另12例失禁患儿进行括约肌主动收缩状态下压力的测定,得到外括约肌收缩压力增加值。2004-10/2006-05在解放军总医院小儿外科采用生物反馈训练仪(CTD-SYNECTICS公司生产,通过可视动画形式和可听的声音高低信号形式将直肠肛门动力情况反映出来,通过指导者的语言讲解,配合正确的动画曲线和声音信号的指导训练,纠正异常的直肠肛门动力。)对13例不同年龄段的失禁患者进行括约肌主动收缩和放松的生物反馈训练。其中儿童7例,成人6例。每次外括约肌持续收缩的时间根据患者的耐受程度一般为5～10s,放松10s,完成6～8次上述收缩和放松动作后休息10min。儿童每次持续1～1.5h,成人1.5～2h,平均训练6次。记录首末次训练外括约肌收缩电位平均值的变化;直肠测压获得的距离肛门缘3,2,1cm层面8个方向外括约肌收缩压力的增加值。结果:全部参与实验的正常儿童27例、肛门失禁患儿12例和接受生物反馈训练的失禁患者13例均进入结果分析。①接受生物反馈训练的肛门失禁患者中10例末次训练外括约肌收缩电位的平均值显著大于首次训练(P<0.05),治疗有效率为76.92%(10/13)。②肛门失禁患者生物反馈训练前肛门外观呈开口状态,黏膜轻度外翻;10例经生物反馈训练治疗有效者肛门外观呈关闭状态,黏膜外翻消失。③正常儿童肛门外括约肌收缩状态下,距离肛门缘3,2,1cm层面,各方向括约肌收缩压力增加值分别为,后(6.133±7.263),(9.358±6.652),(9.412±6.628)kPa;右后:(2.611±2.609),(7.131±5.583),(7.116±6.355)kPa;右:(4.000±5.430),(8.810±6.271),(9.343±6.267)kPa;右前:(3.111±7.812),(7.264±7.441),(10.860±7.575)kPa;前:(2.467±6.559),(5.674±7.080),(11.600±8.099)kPa;左前:(2.289±5.876),(5.837±6.865),(12.390±9.169)kPa;左:(3.422±6.710),(7.161±6.313),(11.906±7.782)kPa;左后:(4.678±7.482),(8.252±6.537),(10.227±6.836)kPa,失禁患儿既不存在这种收缩压力增加值的显著梯度变化,也不存在压力增加值的方向变化。结论:正常儿童由近端向远端存在外括约肌主动收缩时存在压力显著增大的梯度变化,且存在外括约肌后方高压向前方高压的转变,形成对直肠肛门的直接方向压迫作用;失禁患儿无上述变化,可能是形成肛门失禁的机制之一。外括约肌主动收缩放松的生物反馈训练能加强外括约肌的收缩电位,有助于形成外括约肌压力纵向梯度变化及对直肠肛门的直接反向压迫机制。     

Mesorectal Lymph Nodes: Their Location and Distribution Within the Mesorectum

PURPOSE: Total mesorectal excision is an alternative surgical approach for resectable rectal cancer and is associated with favorable results and a low rate of local recurrence. Despite the popularity of this technique, few data exist regarding the location and distribution of lymph nodes within the rectal mesentery. The purpose of this study was to define the distribution, size, and location of lymph nodes within the mesorectum and on the pelvic side wall. METHODS: Seven fresh cadavers at our institution's Fresh Tissue Dissection Laboratory were studied. The rectum, its mesentery, and all fatty tissue from both pelvic side walls were removed and placed in a lymph node clearing solution for 24 hours. After appropriate dissection, the distribution, size, and location of lymph nodes within the rectal mesentery and pelvic side wall tissue were documented. RESULTS: A total of 174 lymph nodes were identified (approximately 25 per patient). The majority (>80 percent) of lymph nodes were smaller than 3 mm in diameter. Fifty-six percent of the nodes within the rectal mesentery were located in the posterior mesentery, and most were located in the upper two-thirds of the posterior rectal mesentery. CONCLUSIONS: The majority of perirectal lymph nodes are small. There are few lymph nodes within the mesentery of the lower third of the rectum and relatively few in the right and left lateral portions of the mesorectum. We confirm that the majority of nodes are located in the proximal two-thirds of the posterior rectal mesentery. It is possible that removal of these nodes is responsible for the superior oncologic results found with total mesorectal excision in contrast to more traditional surgical techniques.     

腺相关病毒在肝脏移植应用的研究进展

腺相关病毒(AAV)载体已成为当前基因治疗中最有潜力的病毒载体,在肝移植面临的缺血再灌注损害、免疫排斥反应等问题的基因治疗中发挥其独具的优势．他安全,无致病性,低免疫原性,高效转染肝脏并且目的基因长期表达．同时AAV用于肝移植基因治疗又涉及到一些问题,如肝移植中不可避免的缺血再灌注损伤、AAV目的基因表达的峰值延迟现象以及AAV与肿瘤发生的关系等,本文就以上问题进行综述．     

贲门失弛缓症术后并发食管旁疝致胃底绞窄坏死1例

介绍1例贲门失弛缓症Heller术后16 a并发食管旁疝致胃底绞窄坏死的病例．报告本例患者的详细病历资料和诊治经过．患者起病5 d后剖胸探查,发现胃底疝入左侧胸腔并绞窄坏死,行近端胃大部切除,修复食管裂孔．术后随访1 a无复发．食管旁疝发生嵌顿时,应立即插入胃管减压．如减压不成功或症状不改善,应急诊手术探查．     

RP-HPLC法测定家兔血浆中甲苯喹哌浓度和药代动力学参数

本文建立了以紫外230nm波长检测的反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定家兔血浆中甲苯喹派浓度。填料使用LiChrosorb RP-C18,流动相为甲醇—水—三乙胺—磷酸(63:37:1:0.8 v/v),血样(或尿样)经碱化后用乙醚提取,再以0.2 mol/L硫酸回提,进样。方法回收率为99.84±3.10(SD)%;天内、天间精密度平均CV为4.12%及3.95%(n=5);最低检测限3ng.经提取的标准线性浓度在25～2000 ng/ml范围内,Y=0.002865X-0.01346,r=0.9999,内源性物质及可能的合并用药不干扰色谱测定。文内用质谱法鉴定血样中甲苯喹哌色谱峰纯度,并由尿样分析对其主要代谢物予以初步验证。本法可应用于药代动力学参数测定。家兔按8mg/kg静注后,药—时曲线符合二室模型T_1/2=4.8008±1.1522(SD)h。     

野八角果毒性成分的研究*

从野八角(Illicium simonsii Maxim.)的果实中分得三个化合物,经光谱分析并与标准品对照证明,结晶Ⅱ和Ⅲ分别为已知化合物莽草毒素(anisatin)和莽草酸(shikimic acid),另一个为新的毒性甚强的倍半萜内酯,命名为2-oxo-6-deoxyneoanisatin(Ⅰ)