血液灌流对梗阻性高胆红素血症术后脏器保护作用的实验研究

目的；使梗阻性黄疸引起损害的各脏器功能术后尽快恢复。方法：我们采用血液灌流辅助治疗。结果；血液灌流后较灌流前CREA，TBIL，DBIL明显改善，t检验P＜0．01，有极显著性差异。手术解除梗阻后两周灌流组与手术比较CREA，TP，ALB，TBIL，DBIL，ALT均有改善，TP，ALB，TBIL化验检查，t检验P＜0．01，差异有极显著性意义。灌流组肝脏，肾脏病理恢复早于手术组。结论：血液灌流有效地清除梗阻性黄疸术后血内胆素等中分子量物质，利于各脏器的功能及病理改变，且对血液基本成分无损害是简便，安全，可靠的辅助治疗措施。     

正常精子体外与活性氧作用后超微结构观察

目的 :观察精子与活性氧 (ROS)作用后超微结构变化。　方法 :采用Percoll梯度离心法选择具有正常生理功能的精子作为正常精子模型 ,应用次黄嘌呤 黄嘌呤氧化酶体系产生ROS ;在有氧环境下ROS与精子模型孵育后 ,采用透射电镜观察精子超微结构。　结果 :正常精子模型与ROS作用后 ,精子膜及顶体存在不同程度的损伤 ,精子线粒体结构出现异常。　结论 :过多的ROS可致精子膜、顶体以及线粒体的超微结构改变 ,损害精子功能。     

真核表达系统的研究进展

真核表达系统具有翻译后的加工修饰体系 ,表达的外源蛋白更接近于天然蛋白质。基因工程中常用的真核表达系统有 :酵母表达系统、昆虫细胞表达系统及哺乳动物细胞表达系统。甲醇酵母主要利用醇氧化酶的基因启动子在甲醇诱导下表达外源蛋白 ,而三磷酸甘油脱氢酶启动不需甲醇诱导 ,可缩短到达峰值表达的时间。杆状病毒是昆虫细胞表达系统中最常用的表达载体 ,利用转座原理构建重组杆状病毒是一种有效的构建重组体的方法 ;杆状病毒 S2 系统是最近构建的一种不裂解宿主细胞的新型昆虫细胞表达系统。哺乳动物细胞表达系统中 ,腺病毒是常用的表达载体 ,通过细菌内同源重组和Cre/loxp系统构建重组体 ,可提高重组效率 ;利用杆状病毒将外源基因导入哺乳动物细胞 ,不会引起病毒基因的表达 ;四环素诱导表达系统是目前应用最广泛的哺乳动物细胞诱导表达系统 ,该系统具有严密、高效、可控性强的特点     

白细胞介素-1β对原代培养大鼠肝细胞的细胞毒性作用

目的利用原代培养大鼠肝细胞 ,研究白细胞介素 1β(IL 1β)对肝细胞的作用。 方法无菌条件下原位胶原酶灌注Wistar大鼠肝脏分离肝细胞。观察IL 1β对肝细胞释放LDH ,肝细胞增殖(3 H标记的胸腺嘧啶掺入法 )以及肝细胞能量代谢的影响 (细胞内ATP含量和培养液中酮体比KBR)。结果在 6种培养条件下 ,各IL 1β组LDH活性均显著高于对照组 (培养条件Ⅰ～Ⅵ ,各对照组LDH活性分别为 :2 2± 2 ;2 5± 4;18± 5 ;12± 4;15± 5 ;11± 4,各IL 1β组分别为 :36± 3;43± 5 ;34± 6 ;31± 4;31± 5 ;2 2± 3,P值均小于 0 0 5 ) ;在培养条件Ⅱ情况下 ,IL 1β显著减少了原代培养大鼠肝细胞胸腺嘧啶的掺入量〔对照组 :(2 34 5 6± 312 3)Dpm/ 0 2 5× 10 6个细胞 ,IL 1β组 :(15 34 0±2 5 34 )Dpm/0 2 5× 10 6个细胞 ,P <0 0 1)〕 ;在培养条件Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ情况下 ,IL 1β显著降低了培养细胞内ATP的含量(培养条件Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ ,各对照组细胞内ATP的含量分别为 :10 0± 1 1;11 0± 2 3;11 5± 1 5 ,各IL 1β组分别为 :6 5± 0 5 ;5 9± 1 3;5 6± 1 2 ,P值均小于 0 0 5 ) ;在培养条件Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ情况下 ,IL 1β显著降低了KBR(培养条件Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ ,各对照组细胞内ATP的含量分别为 :1 0 1± 0 2 1;0 85± 0 13;0     

血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂对肝硬化大鼠TGFβ1基因表达影响的实验研究

目的研究血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ)Ⅰ型受体(AT1)拮抗剂Losartan对肝硬化大鼠TGF β1(transforming growth factor β1,转化生长因子β1)基因表达的影响.方法 41只雄性SD大鼠分为4组对照组(10只)、模型组(11只)、及Losartan治疗组(20只)[早期(10)、中期(10)],除对照组外所有大鼠均给予50% CCL4灌胃,3*!mg*kg-1*5d-1,共9周.治疗组早期组同时给予血管紧张素受体拮抗剂Losartan灌胃,中期组于造模中期(5周)开始给药,用量10*!mg*kg-1*d-1至处死前.实验结束后,处死取肝脏液氮冻存及福尔马林固定标本,分别行免疫组织化学及RT-PCR检测,TGF β1蛋白及基因表达情况.结果 与正常组相比,模型组TGF β1表达明显增强,由0.93±0.05升高到1.94±0.13(P<0.01),而两治疗组与模型组相比,losartan明显降低了TGF β1 mRNA的表达,分别降至1.17±0.16、1.02±0.11(P<0.05),而早、中期两组差异无显著意义(P>0.05).结论 Losartan对肝硬化时TGF β1表达有明显抑制作用.     

烫伤合并金葡菌感染大鼠组织CD14 mRNA的改变

目的　探讨细菌脂多糖受体CD14在烫伤合并金黄色葡萄球菌 (金葡菌 )感染中的变化规律及其意义。　方法　采用大鼠 2 0 %总体表面积Ⅲ度烫伤合并金葡菌攻击造成脓毒症模型 ,动态检测心、肝、肺、肾等重要器官中CD14mRNA表达的改变 ,同时观察内毒素在动物循环及主要脏器内的分布特点。　结果　烫伤合并金葡菌脓毒症早期 ,各脏器内毒素含量即明显高于正常对照组 ,并于2～ 6h达峰值 ,其中以肝、肺组织内毒素水平升高幅度最为显著 (P <0 .0 5 )。而血浆内毒素水平亦于伤后 2h显著高于正常对照组 (分别为 0 .30 5 6EU/ml和 0 .12 5 0EU/ml,P <0 .0 5 )。与此同时 ,小肠组织中二胺氧化酶的活性明显降低 (P <0 .0 5 )。烫伤合并金葡菌感染后 ,各组织CD14mRNA的表达亦呈不同程度升高 (P <0 .0 5 ) ,其中肺脏改变尤为显著 ,伤后 6、2 4h肺脏CD14mRNA表达分别为正常对照组的 1.80和 1.81倍。　结论　烫伤合并金葡菌攻击可导致内毒素移位和组织CD14mR NA表达不同程度升高 ,CD14基因表达的上调可能与移位内毒素的刺激作用有关。     

高频喷射通气对重度烧伤合并吸入性损伤患者早期的呼吸支持

目的　观察高频喷射通气 (highfrequencyjetventilation ,HFJV)对重度烧伤合并吸入性损伤患者早期的治疗作用。　方法　 2 0例重度烧伤 (TBSA 79.6 %± 2 9.3% )并吸入性损伤患者 ,其中 19例行气管切开手术 ,1例经鼻插管。为防低氧血症 ,所有患者均应用HFJV ,观察通气前和通气后 11d内血气、呼吸率和脉搏等指标的变化。　结果　气管切开时间为伤后 (2 .7± 2 .4 )d ,HFJV时间为伤后(4.4 0± 2 .9)d。HFJV后 1～ 3d ,PaO2 显著高于通气前水平 (P <0 .0 1) ,随后HFJV 1周 ,PaO2 仍维持在较高水平。在整个通气期间 ,PaCO2 、呼吸率和脉搏率均无明显变化。结论　在重度烧伤合并吸入性损伤早期 ,HFJV有利于氧合作用的改善而无明显副作用 ,是一较为适用的呼吸支持方式     

扩大壁细胞迷走神经切断术治疗十二指肠溃疡及其并发症

目的：评价扩大壁细胞迷走神经切断术（EPCV）治疗十二指肠溃疡及其并发症的远期临床疗效。方法：采用EPCV共治疗十二指肠溃疡及其并发症321例。其中慢性溃疡56例,并发急性穿孔204例,出血21例,狭窄40例。评价内容包括：术后并发症发生率、胃酸分泌功能、胃排空功能、胃镜和上消化道钡餐检查、营养状态、Visick分级。结果：全组321例患者中289例获得随访,随访率为90%,随访期为0.5-22.0年,平均为11.3年。全组无手术死亡,无纵隔炎和倾倒综合征发生。发生粘连性肠梗阻4例（1.4%）,进食后上腹胀19例（6.5%）,返酸17例（5.8%）,总的溃疡复发16例（5.5%）,其中慢性十二指肠溃疡为19.5%,出血为0,狭窄为5.3%,穿孔为3.1%。16例复发溃疡经内科药物治疗后溃疡愈合10例,其余6例经胃部分切除或胃窦切除痊愈。EPCV总的优良率（VisickⅠ和Ⅱ级）为91.7%,其中穿孔为95.3%,效果最佳。结论：EPCV具有手术操作简便、术后并发症较少、溃疡复发率低、术后远期患者营养状况良好、生活质量较高的特点,疗效优良。EPCV术是治疗十二指肠溃疡及其并发急性穿孔、出血和狭窄首选的安全有效术式。     

颈椎不稳在交感型颈椎病发病中的作用

目的：研究交感型颈椎病的病理因素及治疗方法。方法：回顾分析了1988-2000年收治的20例手术治疗的交感型颈椎病患者。根据术前及术后颈椎伸屈侧位X光片判断有无颈椎不稳。结果：20例患者术前均有颈椎不稳,颈椎不稳主要发生在C3-C4和C4-C5,颈椎高位硬膜外封闭对大部分患者有短期效果。每例患者均于不稳节段行颈前路融合术,手术有效率为90％。结论：颈椎不稳是导致交感型颈椎病发病的重要因素;颈椎高位硬膜外封闭可有短期疗效因此具有重要的诊断价值;颈椎前路植骨融合术是治疗交感型颈椎病的有效方法。     

腹腔镜全直肠系膜切除保肛治疗低位直肠癌

目的：探索腹腔镜全直肠系膜切除（TME）低位、超低位前切除治疗低位直肠癌的可行性。方法：按TME原则、用双钉合技术（DST）,在腹腔镜下对62例低位直肠癌患者实施TME、DST低位、超低位结肠-肛肠吻合术。结果：手术时间11-210min,平均125min;术中出血5-80ml,平均20ml;术后1-2d恢复胃肠功能并下床活动,住院时间5-14d,平均8d。1例患者因凝血障碍中转开腹,其他61例患者手术顺利。术后疼痛剂应用28例,除1例吻合口漏、1例尿潴留外,其余患者未见术中及术后并发症。结论：腹腔镜TME、低位、超低位吻合术治疗低位直肠癌,创伤小、保肛率高、术后疼痛轻、恢复快,是极具应用前景的微创新技术。