核糖核酸的酶消化方法直接顺序分析

应用硷基特异性核酸内切酶进行RNA的顺序分析。以~(32)P标记RNA分子的5′或3′末端的四种硷基能被酶试剂部分裂解。放射性的水解产物经胶电泳按其大小而分离。放射自显影后它的核苷酸顺序从带谱上可以直接读出。核糖核酸酶(RNasc)T_1(G特异性)、U_2(A特异性)、Phy M(U+A特异性)和B.cereus(C+U特异性)是最常用于顺序RNA的四种酶。     

Synergistic effects of Nell-1 and BMP-2 on the osteogenic differentiation of myoblasts.

Osteogenesis is synergistically enhanced by the combined effect of complimentary factors. This study showed that Nell-1 and BMP-2 synergistically enhanced osteogenic differentiation of myoblasts and phosphorylated the JNK MAPK pathway. The findings are important because of the osteochondral specificity of Nell-1 signaling and the potential therapeutic effects of coordinated BMP-2 and Nell-1 delivery. INTRODUCTION: BMPs play an important role in the migration and proliferation of mesenchymal cells and have a unique ability to alter the differentiation of mesenchymal cells toward chondrogenic and osteogenic lineages. Signaling upstream of Cbfa1/Runx2, BMPs effects are not limited to cells of the osteoblast lineage. Thus, additional osteoblast-specific factors that could synergize with BMP-2 would be advantageous for bone regeneration procedures. NELL-1 (NEL-like molecule-1; NEL [a protein strongly expressed in neural tissue encoding epidermal growth factor like domain]) is a novel growth factor believed to preferentially target cells committed to the osteochondral lineage. MATERIALS AND METHODS: C2C12 myoblasts were transduced with AdLacZ, AdNell-1, AdBMP-2, or AdNell-1+AdBMP-2 overexpression viruses. Effects were studied by cell morphology, alkaline phosphatase activity, osteopontin production, and MAPK signaling. Additionally, in a nude mouse model, viruses were injected into leg muscles, and new bone formation was examined after 2 and 8 wk. RESULTS: C2C12 myoblasts co-transduced with AdNell-1+AdBMP-2 showed a synergistic effect on osteogenic differentiation as detected by alkaline phosphatase activity and osteopontin production. Nell-1 stimulation on AdNell-1 + AdBMP-2 preconditioned C2C12 cells revealed significant activation of the non-BMP-2 associated c-Jun N-terminal kinase (JNK) MAPK signaling pathway, but not the p38 or extracellular signal-regulated kinase (ERK1/2) MAPK pathways. Importantly Nell-1 alone did not induce osteogenic differentiation of myoblasts. In a nude mouse model, injection of AdNell-1 alone stimulated no bone formation within muscle; however, injection of AdNell-1+AdBMP-2 stimulated a synergistic increase in bone formation compared with AdBMP-2 alone. CONCLUSIONS: These findings are important because of the confirmed osteochondral specificity of Nell-1 signaling and the potential therapeutic effects of enhanced BMP-2 action with coordinated Nell-1 delivery.     

深圳市福田区暗娼艾滋病KAP调查分析

目的：探讨暗娼艾滋病KAP的现状，为艾滋病预防控制中的咨询、外展及其它健康教育活动提供依据。方法：在“城中村”中随机抽取55位暗娼，由经过专门培训的调查员调查并采血检验。结果：暗娼艾滋病平均知晓率为73．88％；与艾滋病相关的高危行为，呈现低龄化、职业化的倾向；为了预防艾滋病，绝大部分暗娼愿意坚持使用安全套，但实际情况并不如人意；暗娼获得艾滋病知识及相关服务并不方便；梅毒检出率为9．09％。结论：打工者的性权利长期被忽视，使卖淫拥有很大的市场，这是暗娼们乃以存在并长久不衰的重要原因之一；暗娼艾滋病知晓率有了较大提高，可能与深圳市开展艾滋病防制工作较早、力度较大有关；安全套使用率还有待提高：艾滋病外展服务亟待开展与加强。     

股骨头骨坏死样本空间结构的Micro-CT评估

目的以股骨头骨坏死样本的Micro-CT断层图像为基础，对其进行空间结构评估。方法2003年11月～2005年6月，收集股骨头骨坏死患者行全髋关节置换术时取出的股骨头样本6个，对样本进行Micro-CT断层扫描，获取股骨头骨坏死样本的计算机三维图像，图像空间分辨率为36μm×36μm×36μm。手工选取兴趣区，随后采用骨体积分数（BV／TV）、骨小梁间隙（Tb．Sp）、骨小梁厚度（Tb，Th）、骨小梁数目（Tb．N）、骨表面积体积比（BS／BV）、结构模型指数（SMI）、骨小梁模型因子（Tb．Pf）等三维空间参数分别对股骨头骨坏死标本的正常区域、硬化带和塌陷区进行评价。结果晚期股骨头骨坏死硬化区和塌陷区的骨小梁空间结构明显改变：硬化区Bv／Tv明显增加，Tb．Th明显增厚，Tb，Sp变窄，SMI与正常区域的骨小梁无差别；而塌陷区Bv／Tv明显减少，BS／BV增大，Tb．N和Tb．Pf增加，Tb，Th改变不明显。结论Micro-CT作为一种新的检测手段，能够在不损伤样本的条件下快速获取股骨头骨坏死样本断层图像，具有精度高、检测快、可进行三维重建分析的优点。晚期股骨头骨坏死不同区域的骨三维结构呈现出不同的空间结构特征。     

泌尿系统感染病原菌的分布及耐药分析

泌尿系感染是临床常见的感染性疾病，随着广谱抗菌药物的广泛应用，致病菌株不断改变，对抗菌药物的耐药性日趋严重。本文对我院2001年1月至2003年12月间泌尿系感染住院患者尿标本中分离出的206株病原菌的种类和耐药性进行分析，为临床合理用药提供依据。     

某地13所医院1997-2001年门诊费用的基本分析与评价

采用回顾性调查分析方法,对某地13所医院1997-2001年门诊费用变动情况进行分析。统计学处理结果提示样本医院5年来门诊费用平均发展速度和平均增长速度加快明显。作者对此提出借鉴国外教训、避免浪费的建议,以应对医疗费飞涨给全局工作带来的各种冲击。     

细胞内游离Ca2+在发育中大鼠皮层神经元无镁诱导惊厥性损伤中的作用

目的: 观察细胞内游离Ca2+([Ca2+]i)在培养的不同发育阶段皮层神经元无镁诱导惊厥性损伤中的作用,探讨惊厥性脑损伤年龄依赖性的可能机制.方法:体外培养6 d、17 d的胚胎大鼠皮层神经元用无镁细胞外液处理3 h,或于无镁处理前用NMDA(N-甲基-D-门冬氨酸)受体拮抗剂或Ca2+通道阻滞剂预处理,用MTT代谢率测定的方法检测神经元损伤,以Fluo-3作标记用激光共聚焦显微镜扫描的方法检测[Ca2+]i.结果:体外培养6 d、17 d的神经元单纯无镁组MTT代谢率较同期对照组降低.应用MK-801 10 μmol*L-1、AP-5 50 μmol*L-1、尼莫地平10 μmol*L-1预处理后再给无镁处理,培养6 d、17 d的神经元MTT代谢率均不同程度高于同期单纯无镁组.培养6 d、17 d的神经元相对荧光强度之间差异有显著性,两者与基线荧光强度比较差异亦有显著性.应用上述各种拮抗剂后,[Ca2+]i改变的峰值均明显低于同期单纯无镁组.结论: 在体外不同发育阶段的神经元,短暂无镁处理诱导惊厥样放电所引起的神经元线粒体功能损伤以及[Ca2+]i改变程度不同.这种[Ca2+]i改变的年龄依赖性可能是惊厥导致神经元损伤的年龄依赖性的机制之一.NMDA受体-Ca2+通道激活是导致这种[Ca2+]i改变及神经元损伤的关键环节.     

闭合性肾损伤的诊断和治疗

目的探讨闭合性肾损伤的诊断与治疗方法。方法对205例闭合性肾损伤的临床资料进行回顾性分析。结果205例闭合性肾损伤中,肾挫伤113例,肾裂伤67例,肾碎裂伤31例,肾蒂血管伤12例,合并伤81例(39.5%)。血尿18例(91.7%),血尿是主要的临床症状。B 超检查199例,其中165例(82.9%)有异常表现;CT 检查80例,均显示肾损伤(100%)。保守治疗153例(74.6%);手术治疗52例,死亡5例(3.5%);超选择性肾动脉栓塞术29例。结论 B 超和 CT 检查是诊断肾损伤的有效方法。严格掌握手术时机是治疗闭合性肾损伤的关键。     

唇裂术止血减张固定器的研制和实验与临床研究

目的：为了减少唇裂修复术中出血，便于手术操作，缩短手术时间，相对地减少手术的危险性。方法：利用压迫止血及滑杆的原理，自行设计制作了唇裂术止血减张固定器，经过动物实验证实，在2h以内不会对组织有任何不可逆损伤，并成功地应用于唇裂修复术中。结果：临床应用68例，与传统止血方法比较，术中出血明显减少，便于手术操作，而且安全可靠，在2h以内不会对上唇组织有任何不可逆损伤，手术的危险性相对地减少。结论：应用唇裂术止血减张固定器进行唇裂修复术，术中出血明显减少．手术时间明显缩短，手术的危险性相对地减少，对减轻术后切口瘢痕有利，值得临床推广应用。