巨噬细胞炎性蛋白4的突变和原核表达

目的 探索如何抑制嗜酸细胞的趋化作用，选择β-趋化因子巨噬细胞炎性蛋白4（MIP4）的突变性（Met-MIP4)作为趋化因子受体3的拮抗剂，将Met-MIP4基因在原核细胞中进行表达。方法 设计MIP4基因的PCR引物并进行氨基酸突变，将MIP4N末端的丙氨酸突变为蛋氨酸，以正常人肺酸突变，将MIP4N末端的丙氨酸突变为蛋氨酸。以正常人肺cDNA文库为模板，PCR方法获取Met-MIP4基因，克隆入载体pUC19，测序验证序列已得到突变，将正确的基因插入到GST融合表达载体pGEX-4T中，以IPTG诱导表达。结果 PCR产物为220bp左右的片段，连接入pUC19质粒后测序验证获得正确突变，构建的pGEX-4T融合表达载体在大肠杆菌中表达，经SDS-PAGE凝胶电泳显示有大小约34kU的新生融合蛋白表达。结论 成功突变并克隆了β-趋化因子MIP4基因，SDS-PAGE表明，与GST融合的Met-MIP4突变体已得到表达，为进一步研究其生物学活性奠定了基础。     

DWI、IVIM参数与脑胶质瘤患儿肿瘤标志物水平相关性

目的 探究扩散加权成像(diffusion weighted imaging, DWI)、体素不相干运动扩散加权成像(diffusion-weighted imaging of voxel incoherent motion, IVIM)参数与脑胶质瘤患儿肿瘤标志物水平相关性及诊断价值。方法 选取于我院进行诊断的疑似脑胶质瘤患儿89例,以病理检查为金标准,最终确诊脑胶质瘤患儿62例为观察组,其余27例为对照组。所有研究对象均进行DWI技术、IVIM技术检查,酶联免疫吸附实验法检测糖链抗原125(carbohydrate antigen 125,CA125)、表皮生长因子(epidermal growth factor, EGF)、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen, CEA)水平,对比不同病情患儿表观弥散系数(apparent dispersion coefficient, ADC)、相对脑血容量(relative cerebral blood volume, rCBV)、真实水分子弥散系数(true water molecular dispersion coe...     

子宫阔韧带内静脉的解剖学研究及其临床意义

子宫底和体上部的静脉汇集于子宫角处浅出,应称子宫上静脉。该静脉续为卵巢静脉。子宫上静脉1条者占30%,2条者占56.7%,3条者占13.3%。子宫上静脉与输卵管峡部中点相对处的口径是3.7±0.2mm,卵巢丛与子宫上静脉汇合后的口径为5.0±0.4mm。输卵管峡部中点与子宫上静脉的间距为6.3±0.6mm。在输卵管系膜中见有输卵管静脉汇入子宫上静脉。本文研究结果认为盆腔静脉淤血症的发生,与结扎手术中损伤子宫上静脉和输卵管静脉有关。     

实验性糖尿病对小鼠肝脏酶组织化学和超微结构的影响

实验用四氧嘧啶建造糖尿病动物模型，８周后取肝作组织学、酶组织化学和超微结构的观察，以探讨实验性糖尿病对肝组织结构和功能的影响。表明在糖尿病状态下，肝细胞的结构和功能均受到一定的损害。     

内痔粘膜及血管上皮细胞VEGF/FGF2的表达与内痔分期的相关性分析

目的 通过观察人体内痔不同分期粘膜及血管内皮细胞生长因子（VEGF）及碱性成纤维细胞生长因子（FGF2）的表达，探讨内痔的发生及发展机制。 方法 收集南方医院肛肠科门诊手术切除的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期内痔标本134例（Ⅰ期42例，Ⅱ期45例，Ⅲ期47例），内痔周围正常肠壁组织40例作为对照，采用HE染色观察组织的病理学变化，采用免疫组织化学方法检测血管内皮细胞VEGF及FGF2的表达。 结果 正常组及Ⅰ期内痔黏膜层被覆上皮完整，未见扩张血管；Ⅱ期内痔黏膜层被覆上皮破坏，黏膜肌层破坏，黏膜层内见新生血管；Ⅲ期内痔黏膜层被覆上皮破坏，见血管管壁增厚迂曲，管腔扩张；与正常粘膜成纤维细胞相比VEGF在粘膜层成纤维细胞表达水平明显升高，并随分期增高而增高（F=883.961，P<0.01），FGF2也存在相同表达（F=656.013，P<0.01）；与正常组相比VEGF在血管内皮细胞表达水平明显升高，并随分期增高而增高（F=776.561，P<0.01），FGF2在血管内皮细胞的表达水平存在相同趋势（F=1066.458，P＜0.01）。 结论 VEGF及FGF2在内痔的形成过程中具有促进血管内皮细胞和粘膜下成纤维细胞增生的作用，同时可作为内痔发生发展的分子标志物。     

Involvement of ERK, p38 and NF-kappaB signal transduction in regulation of TLR2, TLR4 and TLR9 gene expression induced by lipopolysaccharide in mouse dendritic cells

Toll-like receptors (TLR) are sentinel receptors capable of recognizing pathogen-associated molecule patterns (PAMP) such as lipopolysaccharide (LPS) and CpG-containing oligonucleotides (CpG ODN). TLR2 and TLR4 are major receptors for Gram-positive and Gram-negative bacterial cell wall components, respectively. TLR9 is necessary for CpG signalling. LPS or CpG ODN can activate immature dendritic cells (DC) and induce DC maturation characterized by production of cytokines, up-regulation of co-stimulatory molecules, and increased ability to activate T cells. However, little is known regarding the regulation of TLR gene expression in mouse DC. In this study, we investigated the regulation of TLR2, TLR4 and TLR9 gene expression by LPS in murine immature DC. TLR2, TLR4 and TLR9 mRNA were up-regulated following LPS stimulation. The up-regulation of TLR9 expression coincided with significantly increased production of tumour necrosis factor-alpha induced by LPS plus CpG ODN. While inhibition of extracellular signal-related kinase and NF-kappaB activation suppressed the up-regulation of the expression of TLR2, TLR4 and TLR9 mRNA, inhibition of p38 kinase prevented the up-regulation of TLR2 and TLR4 mRNA expression but enhanced the up-regulation of TLR9 expression. These results demonstrated that TLR2, TLR4 and TLR9 gene expression was differently regulated by LPS in mouse immature DC. Up-regulation of TLR2, TLR4 and TLR9 expression by LPS might promote the overall responses of DC to bacteria and help to explain the synergy between LPS and other bacterial products in the induction of cytokine production.     

3～20周人胚和胎儿肾小体的组织发生

应用光、电镜对3～20周22例人胚和胎儿肾小体的组织发生进行了观察.受精后第25天胚肾已有肾小体发生.随着胚龄的增长,肾小体的发生数目增多,肾小体的形成方式是:胚肾内先形成许多厚壁小管,在一部分厚壁小管的诱导下,另一部分厚壁小管的一侧壁呈帽状增厚,分化形成造血干细胞、毛细血管内皮及肾小囊脏层,对侧壁形成肾小囊壁层.即厚壁小管的双侧壁形成肾小体.     

海藻酸钙/聚组氨酸微胶囊的毒性试验研究

为了考察海藻酸钙/聚组氨酸微胶囊的毒性特征,我们利用MTT比色法和小鼠尾静脉注射法,分别考察了该微胶囊的细胞毒性和急性全身毒性。结果表明：微胶囊浓度≤1.0mg/mL时,材料对L929细胞生长无明显抑制作用;微胶囊浸提液即使在高浸提比（10.0mg/mL）下,浸提产物也无细胞毒性作用。急性全身毒性试验结果显示：微胶囊浸提液不引起急性全身毒性反应,表明微胶囊浸提液无有毒的沥滤物和降解产物产生。说明海藻酸钙/聚组氨酸微胶囊无明显毒性。     

重复电刺激前肢神经引起成年大鼠运动皮层的可塑性改变

为了了解成年大鼠运动皮层的功能可塑性，利用皮层内微刺激方法测定ＭＩ代表区并观察重复电刺激前肢神经对ＭＩ代表区的影响。实验组大鼠（９例）持续１．２－２小时的前肢神经电刺激导致前肢运动区与面部触须运动区边界向ＶＩ方向，移动２６３．３±９０．９μｍ并同时伴有运动阈值的改变；ＦＬ内ＭＴ降低５．０±１３．３μＡ，而在ＶＩ内ＭＴ升高９．６±１１．６μＡ对照组大鼠间隔１．５－２小时的两次测定结果，ＦＬ－ＶＩ边界     

单侧外周伤害性刺激诱发大鼠脊髓中转录因子CREB的双侧磷酸化(英文)

c AMP反应成分结合蛋白 (c AMP response elem ent-binding protein,CREB)是一种转录因子 ,它在磷酸化之后可调节靶基因的转录。 CREB在 13 3位置的丝氨酸的磷酸化 ,与脊髓中伤害性传入的处理有关 ,本文作者等用特殊抗体对此进行了免疫细胞化学研究。在正常大鼠 ,虽然几乎所有脊髓神经元的核中都可见 CREB的轻度着色 ,但磷酸化的 CREB仅见于双侧腰段脊髓的 ～ 层 (75± 15 vs60± 18)和 层 (9± 3 )。用福尔马林注射引起一侧后脚掌出现炎症时 ,可在双侧腰段脊髓看到磷酸化CREB细胞核的快速 (小于 5 min)和节段性的显著增多 ;它们主要分布在双侧背角表层 ～ 层 (2 5 4± 2 0 vs 2 62± 2 3 )、 层(115± 13 )和双侧 ～ 层 (3 46± 2 0 vs3 2 8± 2 6) ;而在对照和炎症组大鼠的胸段脊髓中均未见磷酸化 CREB的增加。在注射CFA诱发一侧炎症或切断一侧坐骨神经的实验组大鼠 ,也可看到至少延续到第三天的强而双侧性的 CREB的磷酸化。这种由一侧后肢伤害性传入引致腰段脊髓中镜像式双侧 CREB磷酸化的出现 ,与一般看到的损伤传入只在同侧脊髓背角引起某些神经化学改变的结果不同 ,可能是人神经损伤后或在实验动物中出现对侧镜像式疼痛过敏现象的基础