土壤环境基因组技术及其在新药发现中的应用

土壤是微生物最重要的生境，土壤微生物具有极大的多样性。然而传统培养技术只能得到约1％的微生物纯培养，其余都是未被纯培养微生物。利用土壤环境基因组技术，可以把未被纯培养微生物的基因克隆到载体中并在宿主中进行表达，获得比已培养微生物丰富的代谢产物多样性，这为我们发现新颖结构先导化合物以及新药开辟了新的道路。本文介绍应用环境基因组技术构建土壤DNA文库的思路和方法。     

Recombinant AAV-mediated HSVtk gene transfer with direct intratumoral injections and Tet-On regulation for implanted human breast cancer

Background  

HSVtk/ganciclovir (GCV) gene therapy has been extensively studied in tumors and relies largely on the gene expression of HSVtk. Most studies, however, have failed to demonstrate any significant benefit of a controlled gene expression strategy in cancer treatment. The Tet-On system is commonly used to regulate gene expression following Dox induction. We have evaluated the antitumor effect of HSVtk/ganciclovir gene therapy under Tet-On regulation by means of adeno-associated virus-2 (AAV-2)-mediated HSVtk gene transfer with direct intratumoral injections in mice bearing breast cancer tumors.     

脑卒中急性期白细胞反应及临床意义

脑卒中急性期大多数患者白细胞增多，表现为中性粒细胞计数与白细胞总数增高，脑出血组白细胞增高姓率高于脑梗塞组，而中性粒细胞增高发生率二组间无差别，外周血白细胞增高与临床神经功能缺损程度评分有密切关系，中性粒细胞计数越高，近期神经功能预后则越差。     

低剂量石英对大鼠肺泡灌洗液的早期影响

用支气管肺泡灌洗法研究低剂量石英对大鼠肺脏的影响。大鼠分别注尘2、10mg观察1、7、21天。结果表明低剂量石英可使灌洗液中细胞总数、有核细胞/红细胞比值、肺泡巨噬细胞显著增高,特别是泡沫型肺泡巨噬细胞随时间延长而明显增高。染尘动物灌洗液中蛋白、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶呈一过性升高,酸性磷酸酶在2mg石英组呈一过性升高,但在10mg石英组却持续上升。实验结果表明,肺泡巨噬细胞及其溶酶体膜的破坏在矽肺发生早期可能起一定的作用。     

心肌造影超声心动图评估心肌缺血程度的实验研究

本实验制作不同程度心肌缺血的动物模型，以声处理５％人血白蛋白为超声造影剂进行心肌灌注造影，探讨ＭＣＥ时间－强度曲线各指标与心肌缺血程度间的关系。结果表明：心肌显影的峰值强度和曲线下面积均与缺血程度呈显著负相关（相关系数分别为ｒ＝－０．９８，Ｐ值＜０．００５；ｒ＝－０．９４，Ｐ值＜０．０５），且能区分轻度、中度和重度三种程度的心肌缺血；而三项时间指标与心肌缺血程度间未发现显著性差异。本实验的初步结果表明，ＭＣＥ是一项活体评估局部心肌血流灌注的有效方法。     

Agilent 2100 Bioanalyzer在基因差异表达研究中的应用

目的观察Agilent 2100 Bioanalyzer 芯片分析系统(以下简称Bioanalyzer)在基因差异表达研究中的应用。方法应用限制性显示技术分别从正常和热休克处理后的酿酒酵母细胞中分离出cDNA片段,然后再用Bioanalyzer和传统的琼脂糖凝胶电泳技术对RD-PCR产物进行检测分析。结果Bioanalyzer能更快速、敏感地分离和显示差异表达的基因片段,并且通过对差异片段进行定量比较,发现了数个表达有明显差异的基因片段。结论Bioanalyzer在基因差异表达研究中具有重要的应用价值。     

48例易性癖患者围手术期的心理护理

目的：探讨易性癖患变性手术的心理状态。方法：对48例易性癖患行变性手术前后实施有针对性的心理护理。结果：有效的心理护理能进一步改善变性手术患的心理状态，促进易性癖患心理康复。结论：针对易性癖这一特殊群体，开展积极有效的心理护理，对不良心理的康复至关重要。     

二乙基亚硝胺诱导大鼠肝细胞癌过程中明胶酶的动态变化

目的：观察肝癌形成过程中明胶酶表达（蛋白及mRNA水平）的动态变化，探索明胶酶在肝癌生长浸润中的作用。方法：应用免疫组化法、明胶酶谱法和RT-PCR法对大鼠肝癌形成过程中各期明胶酶表达情况进行观察，并与正常对照组进行比较分析。结果：正常肝组织及肝硬化组织内明胶酶有表达，肝癌形成后主要在癌细胞内表达；明胶酶原在正常肝组织中有低表达，诱癌过程中呈持续增高趋势；明胶酶-2mRNA与其酶蛋白表达趋向一致。结论：在肝癌形成过程中明胶酶转录和翻译水平均呈持续增高趋势。     

抑制脑血栓形成的硫代磷酸酯脱氧寡核苷酸的亲和性研究

目的为抑制脑血栓形成,合成与TF基因启动子区切应力反应元件(SSRE)形成三链DNA的硫代磷酸酯寡核苷酸(TFO)。方法设计TFO序列14条,采用固相亚磷酰胺三酯固相法合成TFO。硫代磷酸酯修饰在TFO的3'末端进行。应用电泳迁移分析(EMSA)观察寡核苷酸和硫代脱氧寡核苷酸的亲和性。结果在设计合成的14条寡核苷酸中,与靶序列能形成三链DNA的TFO只有T21GTa、T14GTa和T15GTa,其Kd值分别为3.6×10-10、1.0×10-9和1.0×10-8(M),经硫代磷酸酯修饰后分别为:2.3×10-9、3.8×10-9和1.5×10-8。结论硫代磷酸酯修饰的T21GTa-ps、T14GTa-ps和T15GTa-ps能够与TF基因启动子SSRE的3个位点形成三链DNA。     

两种石油加工残油对制备可纺丝中间相沥青的影响

用常压液相炭化法制备中间相沥青，并用熔融法检验中间相沥青的可纺性，研究了汽油裂解残油和催化裂化重柴油参混比的不同对中间相沥青的制备速率，产率，中间相含量，显微结构以及可纺性的影响，指出最佳配比。