四溴苯三唑对宫颈癌HeLa细胞凋亡的诱导作用及其机制

目的：探讨四溴苯三唑（TBB）对人宫颈癌HeLa细胞的促凋亡作用,阐明其对相关信号转导通路的作用机制。方法：选取处于对数生长期的人宫颈癌HeLa细胞,将其分为对照组（未给予TBB）和实验组（给予TBB）。采用MTT比色法检测HeLa细胞存活率,采用倒置显微镜观察人宫颈癌HeLa细胞形态表现,采用Annexin Ⅴ-FITC/PI双染法及流式细胞术检测HeLa细胞凋亡率,采用Western blotting法检测细胞中凋亡相关蛋白p-Akt、Akt、Bcl-2、Bax、cleaved-caspase-3和Pro-caspase-3表达水平。结果：MTT法检测,与对照组比较,实验组HeLa细胞存活率明显降低（P<0.01）,且呈浓度依赖性;倒置显微镜下观察,实验组HeLa细胞出现体积缩小、细胞核皱缩等细胞凋亡的形态变化;Annexin Ⅴ-FITC/PI双染法和流式细胞术检测,与对照组比较,实验组各时间段（3、6、12和24 h）细胞凋亡率明显升高（P<0.05或P<0.01）;Western blotting检测,与对照组比较,实验组HeLa细胞中抗凋亡蛋白p-Akt和Bcl-2表达水平逐渐降低,促凋亡蛋白Bax和cleaved-caspase-3表达水平逐渐升高,Pro-caspase-3表达水平逐渐降低（P<0.05或P<0.01）。结论：TBB可能通过抑制Akt信号通路的活性进而有效促进HeLa细胞凋亡。     

非体外循环下冠状动脉搭桥术——附1例报告

[目的 ]探讨非体外循环下冠状动脉搭桥术的临床疗效及适应症 .[方法 ]对 1例非体外循环下冠状动脉搭桥术进行分析 ,并对相关资料进行总结 .[结果 ]病人术后恢复顺利 ,无任何并发症 .相关资料显示非体外循环下冠状动脉搭桥术具有良好的疗效 .[结论 ]非体外循环下冠状动脉搭桥术是一种有效、可靠的手术方法 ,但应掌握好手术适应症 .     

Ki67在乳腺癌组织中表达及其与C-erbB-2、ER、PR、P53基因的关系

目的：探讨Ki67基因在乳腺癌组织中的表达及其与C—erbB-2、ER、PR、P53基因的相关关系。方法：用免疫组化方法检测133例乳腺癌组织中Ki67、C—erbB-2、ER、PR、P53的表达。结果：Ki67在乳腺癌组织中总阳性率为78．2％,Ki67表达与乳腺癌肿瘤大小和I临床分期有显著相关性（P〈0．05）,与患者的年龄、腋窝淋巴结转移无显著相关性（P〉0．05）;乳腺癌组织的Ki67表达强度与C—erbB-2、1353强度的表达呈正相关（1分别为0．172、0．280,P〈0．05）,与ER强度的表达呈负相关（γ为-0．193,P〈0．05）,与PR表达强度无显著相关性（γ为-0．007,P〉0．05）。结论：Ki67表达与乳腺癌发生、发展有关,是一个不良预后因素。     

IL-1β激活后的许旺细胞与人发角蛋白三维培养构建人工神经桥接体

目的 探索白细胞介素-1β（IL-1β）激活后的许旺细胞与人发角蛋白复合培养构建人工神经桥接体,修复神经缺损.方法 体外培养纯化的许旺细胞经IL-1β激活前、后与细胞外基质凝胶修饰的人发角蛋白进行三维方向的共培养而构建成人工神经桥接体,移植入SD大鼠坐骨神经缺损处.S-100蛋白免疫组化染色鉴定许旺细胞,倒置显微镜和扫描电镜下观察许旺细胞与人发角蛋白共培养情况,原位杂交法观察人发角蛋白降解及神经生长因子（NGF）在坐骨神经内的表达,移植术4周后检测坐骨神经功能指数.结果 经IL-1β激活后的许旺细胞能更好地黏附于人发角蛋白表面,进行分裂、增殖.3～4周,桥接体内的人发角蛋白开始降解,其周围可见IL-1β激活后的处于增殖分裂期的许旺细胞NGF表达强阳性,坐骨神经功能恢复时间提前.结论 经IL-1β激活后的许旺细胞与细胞外基质凝胶修饰的人发角蛋白复合培养构建成人工神经桥接体,具有修复神经缺损的同时还能够加速坐骨神经损伤后功能的恢复.     

醌茜素通过MAPK及Akt信号途径诱导人胃癌AGS细胞凋亡

目的 探讨醌茜素对人胃癌细胞的凋亡作用及其分子机制.方法 MTT法检测醌茜素对3种人胃癌AGS、MKN-28及MKN-45细胞的杀伤作用;Annexin V-FITC/PI双染法、流式细胞术检测醌茜素诱导AGS细胞凋亡能力及细胞内活性氧簇(ROS)水平;蛋白质免疫印迹法检测细胞凋亡相关蛋白的表达量变化.结果 醌茜素对3种胃癌细胞均具有明显的杀伤作用,且呈浓度依赖性(P<0.05).经计算其IC50值分别为7.07μmol/L、22.55μmol/L及14.18μmol/L.醌茜素能诱导AGS细胞发生凋亡,且呈浓度依赖性(P<0.001),并能够促进细胞内活性氧水平升高(P<0.001).当预处理ROS清除剂NAC后,能够明显抑制醌茜素诱导的细胞凋亡(P<0.001).Western blotting结果显示促凋亡蛋白p-p38、p-JNK、Bad、cleaved-caspase-3及cleaved-PARP-1表达量增加(P<0.05),抗凋亡蛋白p-Akt、p-ERK及Bcl-2蛋白表达量减小(P<0.05).结论 醌茜素通过上调细胞内ROS水平,调控MAPK及Akt信号途径,进而诱导人胃癌AGS细胞发生凋亡.     

一种改进的人脐静脉内皮细胞的培养方法

目的:建立稳定的人脐静脉内皮细胞分离和培养的方法. 方法:采用胰蛋白酶/胶原酶(1∶1)混合酶液消化法培养人脐静脉内皮细胞,简化完全培养液组分(不添加血管内皮细胞生长因子、肝素等辅助因子),当原代培养细胞80%以上汇合后用胰蛋白酶消化传代;用形态学、免疫细胞化学法进行鉴定. 结果:种植在培养瓶中的内皮细胞4h贴壁生长,48～96 h生长最快,7～10 d汇合. 内皮细胞呈单层铺路石样外观,Ⅷ因子相关抗原(Ⅷ:Ag)和内皮细胞生长因子受体2(KDR)鉴定内皮细胞纯度达95%以上. 结论:用混合酶液灌注脐静脉消化内皮细胞是获取内皮细胞的一种好方法,可靠性大,成功率高,可以构建体外研究血管内皮细胞的模型.     

不同剂量顺铂周化疗治疗ⅡB期～ⅣA期宫颈癌的疗效评价

目的：观察放疗联合不同剂量顺铂周疗方案治疗中晚期宫颈癌的治疗效果,探寻宫颈癌最佳的治疗方案。方法：收集2007年1月-2008年6月本院收治的符合入组标准的ⅡB～ⅣA期宫颈癌患者135例,按住院序号随机分为单纯放疗45例（单纯放疗组）;同步放化疗90例（同步放化疗组）,其中顺铂周疗20 mg?m-2低剂量组45例及40 mg/m-2标准剂量组45例。比较单纯放疗组与同步放化疗组患者的3年生存率及相关毒性反应发生率。同时对同步放化
疗组中的2种不同剂量顺铂周疗方案组患者的3年生存率及相关毒性反应发生率进行比较。结果：全组中位随访时间42（6～51）个月。
单纯放疗组患者与同步放化疗组患者3年生存率分别是68.9%和83.3%,2组比较差异有统计学意义（χ2=3.858,P<0.05）。单纯放疗组Ⅲ-Ⅳ级急性毒性反应发生率低于同步放化疗组（χ2=4.072,P<0.05）。同步放化疗组中,20 mg?m-2低剂量组及40 mg/m-2标准剂量组患者的3年生存率分别
为82.2%和84.4%,2组比较差异无统计学意义（χ2=0.090,P>0.05）。20 mg/m^-2低剂量组急性毒性反应发生率明显低于40 mg/m^-2标准剂量组患者
（χ²=3.920,P<0.05）。结论：与单纯放疗比较,同步放化疗可明显提高ⅡB期～ⅣA期宫颈癌的疗效。在同步放化疗中,与40 mg/m^-2标准剂量顺铂比较,20mg/m^-2低剂量顺铂可以在不降低患者疗效的同时,降低患者Ⅲ-Ⅳ级急性毒性反应的发生率。
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诺氟沙星致成人线状IgA大疱性皮病1例

患者男,45岁,全身红斑伴痒1个半月。患者既往体健,无药物过敏史,家族史无特殊。皮肤科情况:躯干、四肢大小不等的地图形、环形红斑,界限清楚,部分融合成片,部分红斑边缘堤状隆起,其上可见密集分布小米粒大小串珠状排列水疱,部分破溃结痂,尼氏征阴性,黏膜未累及。根据组织病理及直接免疫荧光诊断为成人线状IgA大疱性皮病。     

N受体α4β2亚型在异氟醚抑制大鼠海马突触长时程增强中的作用

目的 评价海马神经元N受体α4β2亚型在异氟醚抑制大鼠海马突触长时程增强(LTP)中的作用.方法 健康成年雄性SD大鼠,取海马组织,制备海马脑片.取70张脑片,随机分为10组(n=7):各组用正常人工脑脊液(aCSF)灌流海马脑片,记录稳定正常的细胞外群峰电位(PS)30 min,LTP组继续给予正常的aCSF灌流,其余各组分别用含异氟醚0.125 mmol/L(I1组)、0.25 mmol/L(I2组)、0.5 mmol/L(I3组)、地棘蛙素0.1 mmol/L(E1组)、1.0 μmol/L(E2组)、地棘蛙素0.1 μmol/L+异氟醚0.25 mmol/L(E1+I2组)、地棘蛙素1.0 μmol/L+异氟醚0.25 mmol/L(E2+I2组)、双氢β-刺酮碱(DHβE)0.1μmol/L(D组)、DHβE0.1μmol/L+异氟醚0.125 mmol/L(D+I1组)的aCSF灌流.采用细胞外微电极记录技术,记录海马脑片CA1区细胞外PS 30 min后,施以高频强直刺激(HFS)15 min,诱发LTP,记录各组HFS结束后5、10、15、20、25、30、40、50、60 min时的PS幅值.结果 与LTP组比较,I1.2.3组、D组、D+I1组、E1+I2组HFS后PS幅值降低,E1.2组HFS后PS幅值升高(P＜0.05),E2+I2组HFS后PS幅值差异无统计学意义(P＞0.05).与I1组比较,D+I1组HFS后PS幅值降低(P＜0.05).与I2组比较,E1+I2组、E2+I2组HFS后PS幅值升高(P＜0.01).结论 异氟醚通过拮抗海马神经元N受体α4β2亚型从而抑制了突触LTP的形成.