NURR1基因修饰C17.2神经干细胞移植治疗脑梗死

目的:比较C17.2神经干细胞和NURR1基因修饰的C17.2神经干细胞移植治疗对脑梗死模型鼠神经功能缺损的改善效果,观察细胞移植后与宿主脑组织的整合、存活、移行及分化情况。方法:实验于2005-06/12在中山大学附属第二医院林百欣实验中心完成。①实验材料:选取清洁级健康SD雄性大鼠78只,随机数字表法分为模型对照组、神经干细胞组、转基因神经干细胞组,26只/组。条件永生化神经干细胞系C17.2由哈佛大学儿童医院Even Synder教授惠赠。pAdeasy-NURR1重组复制缺陷性腺病毒由本实验室成功构建。Dil18荧光染料(Chemicon公司产品)。②实验方法:收集C17.2神经干细胞和pAdeasy-NURR1 C17.2神经干细胞,各分为两管,一管加入Dil18荧光示踪剂。各组大鼠均采用线栓法建立局灶性脑缺血/再灌注损伤模型,3d后进行细胞移植,以江湾Ⅱ型脑立体定向仪进行立体定位,选择缺血半暗区3个位点为移植区:前囟头侧1mm,旁开2mm,深度1.2mm;前囟尾侧3mm,旁开1.5mm,深度1.2mm;前囟尾侧6mm,旁开2mm,深度1.2mm。模型对照组每位点注射单纯培养液2μL;神经干细胞组取6只每位点移植Dil18标记的C17.2神经干细胞悬液2μL,剩余20只每位点移植C17.2神经干细胞悬液2μL;转基因神经干细胞组取6只每位点移植Dil18标记的pAdeasy-NURR1 C17.2神经干细胞悬液2μL,余20只每位点移植pAdeasy-NURR1 C17.2神经干细胞悬液2μL。③实验评估:各组大鼠分别在移植前1d及移植后1周、2周、1个月进行神经功能缺损评分。移植后1周、2周、1个月进行荧光示踪检查及神经元特异烯醇化酶免疫组化检测。移植后6个月行组织学检查。结果:移植后1周,模型对照组死亡1只,神经干细胞组死亡2组,转基因神经干细胞组死亡2只,均淘汰并予以补充。①神经功能缺损评分:移植前1d各组大鼠神经功能缺损评分基本相似(P>0.05)。移植后1周、2周、1个月神经干细胞组、转基因神经干细胞组神经功能缺损评分均明显低于模型对照组(P<0.05);转基因神经干细胞组下降趋势较神经干细胞组更为显著(P<0.05)。②Dil18荧光细胞示踪结果:移植后1周荧光示踪细胞主要在针道内,少数细胞开始移行至周围神经组织。移植后2周,细胞移行至更远距离,并明显向梗死灶方向移行,细胞有突触样结构与周围细胞形成联系。移植后1个月细胞向周围扩散,甚至在远隔部位也可见荧光细胞。③神经元特异烯醇化酶免疫组化检测结果:移植后2周、1个月,转基因神经干细胞组神经元特异烯醇化酶阳性细胞数均明显高于神经干细胞组(P均<0.05)。④细胞组织学检查:移植后6个月,各组大鼠注射针道周围脑组织仍呈正常的层次和结构,未见有明显异型细胞增生。结论:①NURR1基因修饰的C17.2神经干细胞移植治疗局灶性脑梗死能显著改善神经功能缺损,效果优于C17.2神经干细胞。②移植后供体细胞存活并向注射针道周围神经组织移行,促进神经干细胞向神经元方向的分化。     

Optimizing a multicolor immunophenotyping assay

Flow cytometry-based immunophenotyping assays have become increasingly multiparametric, concomitantly analyzing multiple cellular parameters. To maximize the quality of the information obtained, antibody conjugate panels need to be developed with care, including requisite controls at every step. Such an optimization procedure for multicolor immunophenotyping assays is time consuming, but the value of having a reliable antibody conjugate panel that provides for sensitive detection of all molecules of interest justifies this time investment. This article outlines important considerations and procedures to undertake for the successful design and development of multicolor flow cytometry panels.     

Adherence of L1210 murine leukemia cells to sephacryl- aminopropylcobalamin beads treated with transcobalamin-II

Sephacryl beads containing an immobilized aminopropylcobalamin- transcobalamin-II complex serve as foci for the adherence of L1210 murine leukemia cells. Bead-cell interaction does not occur when (A) nonderivatized beads are used; (B) transcobalamin-II is omitted or presaturated with cyanocobalamin in the preparation of the bead complex; (C) intrinsic factor replaces transcobalamin-II; and (D) the complex is removed from beads by photolysis. These observations suggest that adherence results from the ability of transcobalamin-II to form a bridge between immobilized cobalamin on the bead and receptors in the plasma membrane of the cell.     

外科术后康复护理中深化护理文化建设的探索与实践

目的 探讨在外科术后专科康复护理中深化护理文化建设的实践与效果。方法 选择符合诊断标准的乳腺癌改良根治术、脑卒中偏瘫及脊髓损伤、腰椎间盘突出患者随机分成实验组和对照组，实验组患者术后应用自制辅助卧位枕辅助维持康复体位及VCD光盘辅助指导功能锻炼，对照组采用传统方法辅助卧位及健康教育方法。结果 实验组患者疼痛减轻，舒适度及依从性优于对照组（P〈0．05）；特定知识的知晓率及功能锻炼正确率高于对照组（P〈0．05）。结论 自制系列辅助康复卧位枕及VCD光盘辅助指导功能锻炼的应用可让患者感到舒适、方便，实践了人性化护理与专科护理技术的有机结合，丰富了护理文化的内涵，值得推广。     

薄层色谱溶剂系统的最优化方法——Ⅵ.均匀设计法的再探讨

就第Ⅱ报及第Ⅴ报提出的用于选取薄层色谱最佳溶剂系统的均匀设计法进行了进一步的改进及实验验证,使其更趋完善。结果表明,该法不仅适用于已知混合物,而且适用于未知混合物,是一种比较简捷、快速且行之有效的方法。     

Laparoscopic resection for a left adrenal black adenoma

Adrenal black adenoma (pigmented adenoma) is quite rare. Recently, we performed a laparoscopic resection for a functioning adrenal black adenoma. We report the case here.