利用反义技术抑制人乳头瘤病毒18 E6/E7的表达及其对宫颈癌HeLa细胞增殖凋亡的影响

目的 构建人乳头瘤病毒（HPV）18型E6／E7反义荧光真核表达载体,研究其对宫颈癌HeLa细胞增殖凋亡的影响。方法 以PCR法扩增HPV18型E6／E7区716bp片段并反向克隆到荧光真核表达载体pEGFP-C1,构建重组体pEGFP-HPV18E6E7as（EGFP-18AS）并转染人宫颈癌HeLa细胞。利用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）和Western印迹技术检测转染后E6、E7基因在mRNA和蛋白水平的变化;用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法检测转染后细胞的的增殖活性;用流式细胞仪检测转染后细胞的凋亡率;荧光显微镜下观察凋亡细胞的形态学改变。结果 转染EGFP-18AS重组体后,HeLa细胞中E6、E7基因的mRNA表达和蛋白合成均明显下调;细胞增殖受到抑制;流式显示细胞G1期明显阻滞;同时在荧光显微镜下经Hoechst染色凋亡细胞出现染色质凝集、边集、碎裂等形态学改变。结论 重组质粒pEGFP—HPV18E6E7as能有效地抑制人宫颈癌HeLa细胞的生长和增殖,诱导其凋亡,证明了反义RNA技术的有效性,为宫颈癌的基因治疗提供了一种新的可能的途径。     

维拉帕米脉冲控释片的设计和制备

目的：针对高血压、心绞痛常在凌晨发作的特点,研制夜间服药、凌晨释放的维拉帕米(VR)脉冲控释片。方法：全面考察影响药物释放滞后时间的因素。选用3种强崩解剂的不同用量,考察片芯崩解剂对时滞的影响。通过均匀设计实验考察外层包衣的组成和片剂的硬度,多元回归筛选最优处方,并考察不同溶出条件对控释效果的影响。结果：片芯所用的3种崩解剂以羧甲基淀粉钠的崩解性能较好,用量设计在25％左右。外层包衣处方中PEG 6000增加,氢化蓖麻油(HCO)、乙烯-醋酸乙烯共聚物(EVA)用量减少,硬度减小,释放滞后时间减少。由此确定释放滞后时间为3和5h的两个基本处方。结论：VR压制包衣片在体外溶出实验中能实现脉冲释药,并能通过调节辅料用量实现不同控释效果。     

校园网络环境下的病理生理学自主学习模式研究

目的探讨校园网络环境下的病理生理学自主学习模式。方法随机选取学院2012级临床医学6-7班、10-11班分别为对照组(传统教学模式)和教改组。教改组实施以网络为依托的"联组-整合、自主探究、合作交流"的自主学习模式,对学生考核成绩进行对比分析和问卷调查。结果教改组学生成绩高于对照组,学生的自主学习能力明显提高(P<0.05)。结论以网络为依托的"联组-整合、自主探究、合作交流"的自主学习模式可以实现以学助教,有利于学生的终身发展。     

复方三七成分对恒河猴子宫内膜炎症超微结构的影响

目的探讨复方三七成分对恒河猴子宫内膜炎症所致异常出血，子宫内膜超微结构的影响。方法建立恒河猴（Rhesus猴）子宫内膜炎动物模型，治疗组以复方三七成分灌胃治疗，模型组及空白对照组给予等量生理盐水，3个疗程后，在预测下一次月经来潮前1d切取3组猴的子宫内膜，固定后置电镜下观察。结果电镜下空白组见子宫内膜为正常分泌晚期图像；模型组间质内可见大量炎性细胞浸润，螺旋动脉扩张，内皮细胞线粒体广泛空泡样变；治疗组间质细胞有少量炎性细胞，螺旋动脉部分内皮细胞线粒体有空泡样变。结论复方三七成分可以促进螺旋动脉内皮细胞和平滑肌细胞的修复从而达到止血的作用。     

血红素加氧酶-1的表达对氟尿嘧啶诱导食管癌细胞凋亡的影响

目的 本研究探讨血红素加氧酶-1与氟尿嘧啶诱导食管癌细胞凋亡的关系。 方法 培养ECa109食管鳞癌细胞,实验组分别加入正常培养基,含20μmol/L、80μmol/L锌原卟啉(ZnppIX)的培养基培养12h,后更换为含100μg/ml 5-FU组培养;对照组予正常培养基培养;共培养96h后检测各组细胞凋亡情况。 结果 在凋亡早期细胞中(Annexin V⁺/PI^-),20μmol/L ZnppIX组(25.63%±6.52%)及80μmol/L ZnppIX(22.48%±5.59%)组显著高于5-FU组(12.89%±4.42%,P均<0.05)。在中晚期凋亡细胞(Annexin V⁺/PI⁺)中,20μmol/L ZnppIX组(25.17%±5.53%)显著低于5-FU组(39.89%±6.66%)及80μmol/L ZnppIX组(41.95%±2.92%,P均<0.01)。80μmol/L ZnppIX组caspase-3的活化率显著高于正常细胞(P<0.05)。 结论 ZnppIX抑制HO-1表达后,可以显著增加5-FU诱导的Eca109食管癌细胞凋亡率,caspase-3参与了其诱导细胞凋亡的过程。     

64层螺旋CT低剂量管电流恒定技术在胸部的临床应用研究

目的 探讨64层螺旋CT低剂量管电流恒定技术(CCC)在胸部扫描中的价值.方法 80例受试者随机分为4组,分别为C1组(50 mA)、C2组(30 mA)、C3组(20 mA)和A组,C1-C3组采用CCC扫描,A组采用自动曝光控制技术(AEC)扫描作为对照.扫描结束后分析不同组横断面图像质量评分、图像噪声以及剂量长度乘积,以确定最佳的恒定管电流扫描方案.结果 CCC扫描各组和AEC扫描图像质量比较差异无统计学意义(P ＞0.05); CCC扫描各组间所得图像质量比较差异也均无统计学意义(P ＞0.05). C2组和C3组图像噪声显著高于AEC扫描(P＜0.05),CCC扫描各组间图像噪声比较C3组＞C2组＞C1组,差异有统计学意义(P＜0.05).CCC扫描各组辐射剂量明显低于AEC扫描(P＜0.05),且C3组剂量最低.结论 CCC扫描各组图像质量良好且辐射剂量明显低于AEC扫描,64层螺旋CT低剂量(20 mA)扫描可应用于胸部常规检查.     

表皮生长因子对胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞生长的影响

目的研究表皮生长因子(Epidermal growth factor,EGF)对胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(TypeⅡalveolar epithelial cells,AECⅡ)生长、细胞周期的影响。方法原代培养胎鼠AECⅡ,将培养细胞分为对照组及EGF干预组,各组再根据培养时间点分为0、2、4、6、8d 5个亚组,绘制AECⅡ生长曲线并检测细胞周期。结果 EGF干预组细胞生长增殖速度较对照组快,差异有统计学意义(P<0.05),EGF可减少G1期细胞比例,增加S期细胞比例,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 EGF可有效促进AECⅡ分裂增殖。     

未成熟网织红细胞分数对评估30例造血干细胞移植效果的分析

目的探讨采用未成熟网织红细胞分数(IRF)监测造血干细胞移植(HSCT)患者造血功能恢复的临床价值。方法采用Sysmex XE-2100全自动血细胞分析仪检测30例白血病患者HSCT后的WBC、PLT、中性粒细胞绝对计数(ANC)、网织红细胞百分比(RET%)及IRF,并对结果进行对比分析。结果 30例患者移植后IRF、ANC、RET%、WBC、PLT分别在16.5、18.5、19.0、21.0、26.0d达到恢复指标。有93.3%(28/30)的患者IRF最早达到造血功能恢复的指标。IRF达到造血功能恢复指标的时间要早于WBC、PLT、ANC及RET%(P<0.05)。ANC及RET%达到造血功能恢复指标的天数要早于WBC及PLT(P<0.05)。ANC与RET%间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 IRF是HSCT后造血功能恢复较敏感的指标,可用于HSCT后造血功能恢复的监测、病情观察及指导临床治疗。     

中枢神经系统感染患儿脑干听觉诱发电位的检测意义

探讨脑干听觉诱发电位(BAEP)检测在评价中枢神经系统感染患儿听神经及脑干功能中的应用价值。