急性早幼粒细胞白血病与MHC-A*基因的相关研究

目的探讨北方地区汉族人急性早幼粒细胞白血病（APL）与人类主要组织相容性复合体MHC～A＊基因多态性的关系。方法应用顺序特异性引物和聚合酶链反应（PCR—SSP）技术，对21例急性早幼粒细胞白血病患者及29例无血缘关系的健康人的MHC—A＊各等位基因及亚基因进行了检测分析。结果结果表明，MHC～A＊11（RR=5．333．P〈0．05=；和MHC—A＊24（RR=3．60，P〈0．05=基因与APL呈正相关，显著高于对照纽，两组之间比较差异有显著性意义，而其它MHC—A＊各等位基因未见异常，均无统计学差异。结论本项研究结果提示，MHC—A＊11和24基因可能是我国北方汉族人APL致病的易感基因，为揭示APL的发病机制中免疫遗传学作用提供了重要信息和依据。     

硬膜腔阻滞分娩镇痛201例临床分析

目的探讨罗哌卡因硬膜腔阻滞分娩镇痛对分娩结局的影响。方法采用罗哌卡因对201例产妇实施硬膜外麻醉分娩镇痛,与同期未接受硬膜外麻醉的产妇242例对照,比较两组产妇的疼痛程度、分娩方式、产程时间、新生儿情况等。结果两组的剖宫产率、器械助产率、新生儿情况均无明显差异,第一产程活跃期观察组明显短于对照组(P<0.05)。结论罗哌卡因硬膜腔阻滞分娩镇痛是安全可靠的分娩镇痛方法。     

VEGF在不同类型子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的探讨血管内皮生长因子（VEGF）在不同类型子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义。方法采用免疫组织化学SP法检测18例正常孕妇（对照组），36例子痫前期患者（子痫前期组，其中轻度子痫前期患者18例，重度子痫前期患者18例）胎盘组织中VEGF的表达强度。结果VEGF主要表达于胎盘绒毛滋养细胞；重度子痫前期患者胎盘绒毛滋养细胞VEGF表达强度明显低于对照组及轻度子痫前期患者（P＜0．05），而轻度子痫前期患者与对照组比较，无显著性差异（P＞0．05）。结论VEGF在胎盘中主要由绒毛滋养细胞分泌，子痫前期患者VEGF分泌减少，尤其是重度子痫前期的患者,这可能是引起局部胎盘绒毛及血管痛变的原因。     

Increased expression of the glial glutamate transporter EAAT2 modulates excitotoxicity and delays the onset but not the outcome of ALS in mice

The glial glutamate transporter EAAT2 is primarily responsible for clearance of glutamate from the synaptic cleft and loss of EAAT2 has been previously reported in amyotrophic lateral sclerosis (ALS) and Alzheimer's disease. The loss of functional EAAT2 could lead to the accumulation of extracellular glutamate, resulting in cell death known as excitotoxicity. However, it is still unknown whether it is a primary cause in the cascade leading to neuron degeneration or a secondary event to cell death. The goals of this study were to generate transgenic mice overexpressing EAAT2 and then to cross these mice with the ALS-associated mutant SOD1(G93A) mice to investigate whether supplementation of the loss of EAAT2 would delay or rescue the disease progression. We show that the amount of EAAT2 protein and the associated Na+-dependent glutamate uptake was increased about 2-fold in our EAAT2 transgenic mice. The transgenic EAAT2 protein was properly localized to the cell surface on the plasma membrane. Increased EAAT2 expression protects neurons from L-glutamate induced cytotoxicity and cell death in vitro. Furthermore, our EAAT2/G93A double transgenic mice showed a statistically significant (14 days) delay in grip strength decline but not in the onset of paralysis, body weight decline or life span when compared with G93A littermates. Moreover, a delay in the loss of motor neurons and their axonal morphologies as well as other events including caspase-3 activation and SOD1 aggregation were also observed. These results suggest that the loss of EAAT2 may contribute to, but does not cause, motor neuron degeneration in ALS.     

Preparation and characterization of the monoclonal antibodies against Japanese encephalitis virus.

Six mouse monoclonal antibodies (MoAbs) against Japanese encephalitis virus (JEV) were prepared and analyzed with indirect immunofluorescence assay (IFA), enzyme linked immunosorbent assay (ELISA), haemagglutination inhibition test (HI), neutralization test (NT), antibody dependent cell mediated cytotoxicity (ADCC) assay, antigenic site specific analysis and relative affinity measurement. These MoAbs could be divided into three classes by indirect immunofluorescence cross reactivity among four flaviviruses, 2H4, 2F2, and nG2 were type specific; 2D2 and mC3 were subgroup specific; and mG9 was family specific. 2H4 and 2F2 had higher neutralization activity, 2D2 and mC3 had the function of inducing ADCC effect, mG9 had higher titer in HI. The six MoAbs recognized five antigenic sites on JEV envelope glycoprotein, 2H4 and 2F2 recognized the same or very similar antigenic site and their relative affinity was ranked as: nG2 > 2H4 > 2D2 > mG9 > 2F2 > mC3.     

三氧疗法对非霍奇金淋巴瘤患者Th1/Th2细胞亚群漂移的影响

目的：探讨三氧疗法（Ozone therapy）联合化疗对非霍奇金淋巴瘤（Non-Hodgkin lymphoma，NHL）患者外周血CD4^＋T淋巴细胞Tn1／Tn2漂移的影响和临床疗效。方法：67例初治NHL患者随机分为治疗组（37例）和对照组（30例），治疗组化疗同时联合三氧（Ozone，O3）治疗，采用q自血回输（Major O3 auto-haemotherapy，MAH）和O3直肠注气疗法（Rectal O3 gas insutfiation，RI），应用两个周期。对照组单用相同化疗方案治疗。两组均化疗两周期，化疗前后采用流式细胞仪分析外周血CD4^＋T淋巴细胞内细胞因子IFN-γ、IL-4的表达，分别反应1h1、Th2细胞的数量，同时评价疗效以及肿瘤标志物LDH和β2-MG水平的变化。结果：①NHL患者Tn1细胞比例低于正常对照组（P〈0．05），Th2细胞比例与正常对照组差异无显著性（P〉0．05），Tn1／Tn2比值低于正常对照组（P〈0．05）；②治疗组Tn1细胞较治疗前升高（P〈0．05），Th2细胞与治疗前差异无显著性（P〉0．05），Tn1／Th2较治疗前升高（P〈0．05），LDH和β2-MG较治疗前降低；③对照组1h1细胞较治疗前降低（P〈0．05），Th2细胞较治疗前升高（P〈0．05），Tn1／3h2和LDH较治疗前降低（P〈0．05），β2-MG与治疗前差异无显著性（P〉0．05）；④两组治疗后比较，治疗组1h1细胞高于对照组，Th2细胞、LDH和β2-MG低于对照组，Tn1／Th2高于对照组，差异有显著性意义（P〈0．05）；⑤治疗组完全缓解率（CR）64．9％，部分缓解（PR）29．7％，有效率（CR＋PR）94．6％；对照组CR40．0％，有效率70．0％。治疗组与对照组比较，CR率及有效率明显提高，有统计学意义（P〈0．05）。结论：NHL患者外周血CD4^＋淋巴细胞向Th1细胞的分化明显减少，向Th2细胞的分化无明显变化，Tn1／Th2平衡失调并向Th2方向漂移。受化疗打击后Tn1反应向Th2漂移，抗肿瘤免疫功能进一步降低，O3可使化疗后Tn1／3h2平衡向1h1方向漂移。O3联合化疗较单纯化疗比，可以提高淋巴瘤患者的疗效。     

线粒体糖尿病家系基因突变的遗传学筛查

目的 探索与糖尿病发病相关的线粒体基因突变位点。方法 采用PCR、DNA直接测序技术对28个临床疑似线粒体基因突变糖尿病家系(mitochondrial diabetes mellitus，MDM)进行线粒体基因突变高发区域(tRNA^Leu(UUR)基因及NADH脱氢酶1基因)的筛查。结果 两个家系发现与糖尿病发病有关的突变位点。其中1个家系(16号)同时携带nt3243A→G突变和16S rRNA3205C→T突变。该家系两例患者均有消瘦、耳聋、β细胞功能低下、发病年龄低的特点，先证者血乳酸水平在正常高限。在另1先证者患耳聋的家系(28号)发现NDl基因3434A→G突变，导致氨基酸改变，与家系中糖尿病呈共同分离。上述突变均未在正常人中检测到。结论 3243位点突变在本组家系中的发现率为3．08％。16S rRNA3205C→T突变可能与糖尿病发病有关或与nt3243A→G突变协同作用。NDl基因3434A→G突变与28号家系糖尿病的发生有关。     

单胺氧化酶A基因Fnu4HⅠ酶切位点多态性与帕金森病相关性研究

目的 探讨多巴胺代谢酶—单胺氧化酶A(monoamine oxidase A,MAO—A)基因Fnu4H Ⅰ酶切位点多态性与帕金森病(Parkinson‘s disease,PD)遗传易感性的关系。方法 应用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性技术分析了MAO—A基因Fnu4H Ⅰ酶切位点多态性在PD患者与正常对照之间分布频率的差异。结果 PD组和对照组的G等位基因的频率分别为0．613和0．527(P＝0．039),TT基因型频率分别为0．303和0．415(P＝0．014),GG基因型频率分别为0．564和0．451(P＝0．021)。根据发病年龄分组后,表明这种差异主要存在于早发性PD和对照组之间,G等位基因在早发PD组和对照组中的频率分别为0．642和0．527(P＝0．029);GG基因型频率分别为0．585和0．451(P＝0．032);按性别分组后发现差异仅存在于男性PD和对照组之间,G等位基因的频率在男性PD组和对照组中分别为0．669和0．500(P＝0.005)。结论 MAO—A基因Fnu4H Ⅰ位点在对照组和PD患者之间的分布差异有显著性,G等位基因和GG基因型频率在PD组中较高,支持MAO—A基因多态性与PD相关的假说,而且与PD发病年龄和性别有关。     

鼻咽癌患者EBV LMP1基因C端区的缺失突变及序列分析

目的：研究LMP1基因C端区缺失突变在我国南方广东、广西鼻咽癌高发区的存在状况和探讨其在鼻咽癌中所起的作用。方法：采用聚合酶链反应技术（PCR）扩增鼻咽癌患者鼻咽组织中LMP1基因的C末端，并对其进行了克隆和序列分析。结果：20份鼻咽癌组织标本中，有17份扩增出特异性条带，阳性率为85％，阳性个体中只有1份未发生缺失。我们选择其中的4份样品进行了克隆和序列分析，结果显示，4份样品均存在30个碱基的缺失和某些位点的单点突变。结论：广东、广西鼻咽癌高发区鼻咽癌组织中LMP1基因C端区存在较高比例的碱基缺失和点突变。     

三氧化二砷对急性早幼粒细胞白血病细胞分泌细胞因子的影响与意义

为了探讨细胞因子在三氧化二砷诱发APL细胞白细胞升高的作用 ,首先按照FAB细胞形态学和细胞遗传学标准选择APL患者。常规Ficoll密度梯度法分离骨髓和PBMC ,体外培养 1h去除贴壁细胞。体外IL 1β、IL 6、IL 8、TNF α和G CSF分泌水平采用ELISA方法进行测定 ,NBT还原实验用以检测APL细胞分化状态。直接细胞计数法和MTT法观察细胞增殖变化。研究结果证实体外 10 6M或体内以 10mg/d三氧化二砷治疗 96h后 ,APL细胞分泌IL 1β和G CSF平均水平升高 (P <0 0 5 ) ,IL 6和IL 8水平降低 (P <0 0 5 ) ,TNF α水平无明显变化 (P >0 0 5 )。进一步分析结果表明 ,体外APL细胞的增值比率与IL 1β或G CSF分泌升高比率呈现正相关 ,检测到IL 1β或G CSF患者的细胞数量增加比率高于未检测到IL 1β或G CSF组 ,说明IL 1β或G CSF分泌增加在三氧化二砷诱导后的APL细胞增殖中起着一定作用