兔关节软骨细胞的分离、培养和形态学特征

[目的]探讨兔关节软骨细胞的分离、培养方法,观察单层高浓度培养时细胞表型表达情况.[方法]无菌条件下,从 2周龄新西兰白兔的颞颌关节及四肢关节髁突面削取软骨片,采用机械-酶消化法分离软骨细胞,经台盼蓝拒染计数,将细胞按 1× 106个 /孔接种于 6孔培养板,传代培养,描绘生长曲线.利用相差显微镜及透射电镜观察细胞形态.应用甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原免疫组化对细胞进行鉴定.[结果]每克软骨能获取 1 5× 106个软骨细胞,活性率为 95%.培养 2～ 3 d,细胞贴壁、变形,呈多角形; 8 d左右,细胞融合成层.透射电镜观察显示细胞核圆形,有丰富的粗面内质网、高尔基体及分泌的基质成分.甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原染色阳性.细胞传至 5代后,出现"成纤维细胞样".[结论]本研究建立了简单易行的软骨细胞分离、培养方法;初代、第 2代细胞生长良好,适合于实验研究;软骨细胞 5代培养后,细胞表型发生改变.     

细胞内游离Ca2+在发育中大鼠皮层神经元无镁诱导惊厥性损伤中的作用

目的: 观察细胞内游离Ca2+([Ca2+]i)在培养的不同发育阶段皮层神经元无镁诱导惊厥性损伤中的作用,探讨惊厥性脑损伤年龄依赖性的可能机制.方法:体外培养6 d、17 d的胚胎大鼠皮层神经元用无镁细胞外液处理3 h,或于无镁处理前用NMDA(N-甲基-D-门冬氨酸)受体拮抗剂或Ca2+通道阻滞剂预处理,用MTT代谢率测定的方法检测神经元损伤,以Fluo-3作标记用激光共聚焦显微镜扫描的方法检测[Ca2+]i.结果:体外培养6 d、17 d的神经元单纯无镁组MTT代谢率较同期对照组降低.应用MK-801 10 μmol*L-1、AP-5 50 μmol*L-1、尼莫地平10 μmol*L-1预处理后再给无镁处理,培养6 d、17 d的神经元MTT代谢率均不同程度高于同期单纯无镁组.培养6 d、17 d的神经元相对荧光强度之间差异有显著性,两者与基线荧光强度比较差异亦有显著性.应用上述各种拮抗剂后,[Ca2+]i改变的峰值均明显低于同期单纯无镁组.结论: 在体外不同发育阶段的神经元,短暂无镁处理诱导惊厥样放电所引起的神经元线粒体功能损伤以及[Ca2+]i改变程度不同.这种[Ca2+]i改变的年龄依赖性可能是惊厥导致神经元损伤的年龄依赖性的机制之一.NMDA受体-Ca2+通道激活是导致这种[Ca2+]i改变及神经元损伤的关键环节.     

基于实验均方误差F值的基因表达数据最佳聚类评判方法研究

目的 近年来产生了一些用于分析基因表达数据的聚类算法，却很少有关于评价聚类算法方法的研究。本研究的目的是尝试建立一个定量的评价基因表达数据聚类结果的方法。方法 本研究提供了一个系统的评价聚类结果的方法，利用我们提出的实验均方误差F值对几个常见的聚类算法进行比较。结果 利用F值对类质量的评价和利用已有的生物学知识对类进行分析的结果一致。结论 实验均方误差F值可以定量地评判用于基因表达数据的聚类算法。     

重组血红素加氧酶-2在大肠杆菌中表达与纯化方法的研究

目的　确定重组血红素加氧酶 2在大肠杆菌中表达与纯化方法。方法　将已构建的血红素加氧酶 2(HO 2 )的重组质粒pMW1 72a HO 2转入大肠杆菌BL 2 1 ,分析不同温度及摇床转速对HO 2表达的影响 ,确定可溶性表达最佳条件。使用超声波、超速离心、分级盐析、分子筛层析等方法纯化HO 2。检测酶活性。结果　确定了HO 2可溶性表达最佳条件为 37℃ ,(85± 5 )r min ;确定了HO 2具体纯化路线。得到蛋白纯度为 95 .0 % ,纯化倍数为 2 .9倍 ,收得率为 4 0 .9%的活性HO 2蛋白。结论　获得了纯度高、具有活性的HO 2蛋白 ,为进一步进行HO 2结构与功能之间关系的研究提供了可行的纯化路线     

重睑术后继发上睑下垂的成因及防治

重睑术为最常见的、操作简单的门诊手术,但若想术后取得满意的效果却并非易事[1],术后并发症相对较多,其中继发上睑下垂是较严重的并发症之一,我们复习相关文献发现,关于如何在重睑术中、术后早期发现、早治疗,避免医疗纠纷及并发症发生的报道不多见。本文就重睑术后继发上睑下     

准分子激光角膜切削术治疗近视的并发症

为分析准分子激光角膜切削术（ＰＲＫ）治疗近视的并发症，对１３９例（２５７眼）ＰＲＫ术后随访半年至一年。结果表明：术后一年，低中度和高度组各有１眼最佳矫正视力丢失二行，分别占２．５％和３．３％；低中度和高度组的角膜上皮下１级混浊分别为１０．８１％和１５．１６％，２级混浊分别为２．７３％和０％；激素性高眼压，在发生率最高的３个月时，可分别达２４．３７％和２５．３２％，但这种反应性的眼压升高只是暂时的，容易控制；过矫和散光增加的发生率均较低，主要与术者的经验有关。随着术者经验的提高、手术设计的完善及术后用药的研究，这些并发症会降到最低水平。ＰＲＫ是安全、有效的。     

内蒙古乌海地区发现的血红蛋白G Taipei

进行血红蛋白病筛查时检出１例慢速β－链异常血红蛋白，经化学结构分析证明该变异物为β链第２２位谷氨酸被丙氨酸取代，与血红蛋白Ｇ Ｔａｉｐｅｉ「α２β２（Ｂ４）Ｇｌｕ→Ｇｌｙ」为相同变异物。     

桂美辛和山莨菪碱治疗胆绞痛的比较

桂美辛组(男性21例,女性35例;年龄44±12a)治疗胆绞痛56例,剂量300mg, po, tid,显效32例,有效21例,总有效率95％。山茛菪碱组52例(男性18例,女性34例;年龄46±13a),剂量10mg, im, tid,显效、有效分别为9与20例,总有效率56％。2组比较,P<0.01。桂美辛治疗胆绞痛有疗效高、不良反应少的优点。     

Experimental Studyon Anti－tumor Effect of SplenocytesInduced by Anti－CD3McAb，PHA and IL－2

（沈张悦）（邵静芳）（王晓林）（朱慧芬）ＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＳｔｕｄｙｏｎＡｎｔｉ－ｔｕｍｏｒＥｆｆｅｃｔｏｆＳｐｌｅｎｏｃｙｔｅｓＩｎｄｕｃｅｄｂｙＡｎｔｉ－ＣＤ３ＭｃＡｂ，ＰＨＡａｎｄＩＬ－２￥ＳＨＥＮＧｕａｎ－ｘｉｎ，ＷＡＮＧＸｉａｏ－ｌｉ...     

孤立性左肝胆管结石并肝管狭窄的外科治疗

目的总结近２０年来孤立性左肝胆管结石并发左肝胆管狭窄的临床治疗体会．方法原发性肝胆管结石１０１８例，年龄２７～７２岁，其中孤立性左肝胆管结石１３３例，手术治疗１１２例，对其临床资料进行回顾性分析，包括各肝管狭窄并发率，术前各项检查确诊率，手术治疗方式，再狭窄率．结果左肝管狭窄的发生率为５９８％，左外肝管和左内肝管分别为８４０％和８４８％，均以重度狭窄为主．狭窄切开整形后高位胆肠吻合术是处理左肝管狭窄的常用手术方式（５２２％），远期再狭窄率为１７１％；左半肝切除术施实率为１９４％，再狭窄率为００％；狭窄整形术和狭窄扩张术的施实率分别为９０％和１９４％，再狭窄率分别为５００％和９２３％．左外肝管狭窄通常采用肝段或肝叶切除术（７８７％），而左内肝管狭窄的处理则通常采用非左半肝切除术（８４８％）．左内肝管狭窄的术前／后影像学确诊率明显低于左肝管和左外肝管，平均确诊率依次２５９％，９３３％和８７９％．结论二级肝管狭窄是孤立性左肝管结石的常见并发症，肝叶或肝段切除术是其首选治疗原则．过多依赖非肝叶／段切除术和不适当的肝段切除术是遗留狭窄和远期疗效差的重要原因