Screening Mouse Genes Related to Blastocyst Implantation by Using PCR Subtraction

Objective To identify genes that may be related to embryo implantation Materials & Methods The PCR subtraction technique was applied at implantation and inter-plantation sites on day 4. 5 of pregnancy in mice. Two novel Expressed Sequence Tags (ESTs ), EST8 and EST81 were identified; their expression in tissues was analyzed by Northern blotting, and their full-length cDNAs were synthesized by PCR.Results We found that these two novel ESTs (EST8and EST81) were noticeably expressed in implantation site in the mouse on day 4. 5 of pregnancy. EST8 was expressed at high level in livers and implantation sites of the mice, while at low level in ovaries and inter-plantation sites. EST81 was predominantly expressed in implantation site and ovary, and at low level in all other tissues. Their complete cDNAs, 1 665bp and 1 264 bp respectively, were synthesized by using PCR.Conclusion The two full-length cDNAs were responsible for embryo implantation,and their functions need to be further studied.     

急性脑血管病肿瘤坏死因子-α的临床研究

目的：探讨肿瘤坏死因子-α（TNF-α）在急性脑血管病（ACVD）中的作用及其变化的临床意义。方法：选取95例ACVD患者，并设性别及年龄相匹配的血清对照组（20例）及脑脊液对照组（10例）。应用酶联免疫吸附法（ELISA）于发病后第1、3、7、14d测定血清和脑脊液中TNF-α。结果：①三种脑血管病患者血清TNF-α动态变化存在差异，脑出血和脑梗死组的峰值单间为发病后第3d，而蛛网膜下腔出血（SAH）组为第1d。②脑梗死患者血清TNF-α水平与梗死面积、神经功能缺损程度及病情恶化与否相关。③SAH组于发病后第1d、3d、7d脑脊液TNF-α值高于血清，14d时降至对照组水平并与血清无差异。结论：①脑梗死患者血清TNF-α的动态观察，可为临床预测梗死灶大小、神经功能缺损程度及病情恶化与否提供依据。②发病早期的脑梗死患者若CT未能显示病灶时，血清TNF-α的明显升高有助于临床诊断和治疗。③SAH患者脑脊液中TNF-α水平明显高于血清，进一步提示脑内神经组织可产生TNF-α。脑脊液中TNF-α的持续明显升高可能与SAH后脑血管痉挛有关。④TNF-α参与了ACVD的炎性反应过程，早期抑制TNF产生及抗炎性反应的治疗可能具有潜在的临床价值。     

80例健康青年分别经针刺或艾灸肺俞穴后的肺功能变化

目的：探讨针刺与艾灸肺俞穴对健康人肺功能的影响。方法：我们选择了20－22岁健康男性80例，随机分为针刺组和艾灸组各40例，于针刺，艾灸前和针刺，艾灸后10min测试用力肺活量（FVC），用力呼气量（FEV1．0），最大呼气中段流速（MMF），最大呼气流量（PEFR），75％，50％，25％肺活量时的最大呼气流速（V75，V50，V25），结果：显示经针刺和艾灸肺俞穴后2组FVC，FFV1．0均显著增加，P＜0．05，2组间比较针刺组FVC明显高于艾灸组，P＜0．05，而且艾灸组MMF，V25亦显著降低P＜0．05，结论：健康人经针刺和艾灸肺俞穴后均可使大气道阻力减少，肺容量增加，提示一定量的艾燃烧后的烟雾可使健康人肺功能受到影响，使肺的小气道收缩，出现阻塞性改变。     

183例老年人骨密度检测分析

目的 :研究老年人不同疾病时骨密度 (BMD)的分布情况。方法 :用DXADAS 6 0 0EX型骨密度仪对183例老年患者进行左侧远程桡骨加尺骨BMD检测。结果 :内分泌疾病组、消化道疾病组和其它疾病组的患病率分别为 72 7% ,2 0 6 %和 31 4 %。T值比较 :三组差异明显 (P <0 0 0 1)。累积骨丢失率 (ABLR)比较 :前一组明显高于后两组病人 (P <0 0 1)。BMD比较中 ,内分泌和其它疾病组明显低于消化道疾病组 (P <0 0 0 1)。相关分析显示 ,内分泌和消化道疾病组的年龄变化与BMD呈正相关 (r =0 5 19P <0 0 0 1和r =0 5 89P <0 0 0 1) ,内分泌疾病组和其它疾病组的体重变化与BMD呈正相关 (r=0 918P <0 0 0 1和r =0 338P <0 0 0 1)。结论 :老年人骨质疏松 (OP)患病率以内分泌疾病组最高 ,消化道疾病组较低 ;随年龄和体重增加 ,BMD降低加重。     

不同器官保存液对大鼠肝脏透明质酸吸收率的影响

目的　探讨不同器官保存液对大鼠肝脏透明质酸吸收率的影响 ,以评价它们对肝窦内皮细胞的保护作用。方法　大鼠肝脏原位灌洗后 ,分别在UW液、Celsior液或Histidine Tryptopan Ketoglutarate液 (HTK液 )中低温保存 16和 2 4h ,然后用含透明质酸的Kreb Henseleit液在 37℃下连续循环灌注 90min ,分别于灌注 0、15、30、6 0和 90min时检测肝脏对外源性透明质酸的吸收率。结果　低温保存 16h ,再灌注 0、15、30、6 0和 90min时 ,3种保存液保存的肝脏对外源性透明质酸的吸收率均为负值 ,表明肝窦内皮细胞受到一定程度的损伤 ,但UW液和Celsior液对肝窦内皮细胞的保护作用较HTK液为优 (P <0 .0 1) ;保存 2 4h者 ,UW液对肝窦内皮细胞的保护作用优于Celsior液和HTK液。结论　UW液对肝窦内皮细胞具有较强的保护作用     

幽门螺杆菌ureB基因表达产物的反应原性

目的：克隆幽门螺杆菌ureB基因，并进行表达，验证表物的反应原性。方法：应用PCR技术从技术临床分离株中扩增出ureB基因，克隆入载体pGEM-7zf( ）进行测序，进一步转到友大肠杆菌表达载体pBV220进行诱导表达，以Western blot实验验证重组蛋白的反应原性。结果：测序后经同源性比较，证实扩增后得到的片断确为ureB基因，并原核表达出可被抗Hp抗体识别的非融合重组蛋白。结论：获得了有反应原性的重组ureB蛋白。     

ABO血型与肝炎病毒感染关系的探讨

目的：探讨ABO血型与肝炎病毒感染的关系，方法：应用疾病关联分析方法对HBsAg和,抗－HCV阳性献血者与同期健康献血者的ABO血型资料进行比较分析。结果：ABO血型与HBsAg和抗－HCV阳性率之间无显著性相关关系（P＞0．05），结论：乙型肝炎和丙型肝炎病毒感染与ABO血型无显著性相关。     

硒对紫外线诱导HLF细胞凋亡的保护作用

目的：探讨紫外线诱导人HLF细胞凋亡时DNA降解特点，以及硒对紫外线诱导细胞凋亡的保护作用。方法：紫外线分别照射体外培养的人肺成纤维细胞3min和5min，同时添加亚硒酸钠（8ng/ml），设立对照组。利用吖啶橙荧光染料染色鉴定凋亡细胞，利用琼脂糖凝胶电泳检测DNA ladder。结果：紫外线可以诱导人肺成纤维细胞（28代）凋亡，作用存在时间效应关系。紫外线诱导人肺成纤维细胞凋亡时，未出现典型的DNA ladder现象。硒对于紫外线诱导的细胞凋亡有显著的抑制作用。结论：DNA ladder不能作为细胞凋亡的唯一的标志，紫外线诱导的细胞凋亡与DNA ladder的出现并不总是一致的。硒具有拮抗紫外线诱导的细胞凋亡作用。     

血管紧张素Ⅱ和氯沙坦对小鼠腹膜淋巴孔的调控作用

目的 研究血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )和AngⅡ受体抑制剂氯沙坦对腹膜淋巴孔的调控作用并探讨其机制。方法 分别在健康小鼠腹膜腔注射0.9%氯化钠溶液、AngⅡ、氯沙坦和AngⅡ +氯沙坦 ,2h后处死实验小鼠 ,取小鼠膈腹膜 ,作扫描电镜观察、计算机图像处理和定量分析。结果 注射AngⅡ后 ,腹膜腔腹膜淋巴孔的直径和分布密度分别为 (4.42±0.57) μm和 (53.60±10.07)/0.1mm2,较正常对照组[分别 (2.89±0.86) μm和(27.74±7.49)/0.1mm2]增大和增多(P<0.05)。注射氯沙坦后 ,淋巴孔的孔径和开放数目分别为 (2.02±0.48) μm和 (12.87±3.12)/0.1mm2 ,较正常对照组减小和减少(P<0.05)。联合应用AngⅡ和氯沙坦时 ,淋巴孔的孔径较正常对照组减小、分布密度减少。结论 AngⅡ可使腹膜淋巴孔孔径增大 ,开放数目增多 ;氯沙坦可使淋巴孔孔径减小 ,开放数目减少 ;联合应用AngⅡ和氯沙坦 ,AngⅡ对腹膜淋巴孔的调控作用被逆转     

抗大肠癌噬菌体人单链抗体的初步鉴定及序列分析

目的 :对抗大肠癌细胞的单克隆噬菌体单链抗体进行初步鉴定和测序分析。方法 :采用细胞ELISA ,免疫组化 ,DNA序列测定和计算机分析方法 ,对 5个单克隆噬菌体抗体 (CH2 73,CH2 0 5 ,CH2 0 9,CHA12 ,CH72 3)进行初步鉴定和序列分析。结果 :5个抗体均对人大肠癌细胞、人胚肾上皮细胞和其它某些人肿瘤细胞反应 ,也与人正常肝细胞有弱阳性反应 ,但不与鼠源性的癌细胞和正常细胞反应。细胞免疫组化进一步证实了ELISA结果的正确性。大肠癌免疫组化对大肠癌组织有特异性的结合反应 ,而不与正常大肠组织反应。测序结果为CH2 73ScFv全长 732bp ;V ,D ,J分别属于VH3 30 D1 2 6 JH3 linker V1 13 JL2 ,GenBank序号为AY0 2 8777和AY0 2 8996 ;CH2 0 5全长 36 6bp ,V ,D ,J分别VH1 4 6 D6 13 JH3,GenBank序号为AF35 936 5 ;CH2 0 9,CHA12和CH72 3的ScFv基因完全相同 ,全长 72 3bp ,其VH DH JH与CH2 73ScFv基因中的VH DH JH 完全一致 ,V ,D ,J分别属于VH3 30 D1 2 6 JH3 linker L2 Jκ2 ,GenBank序号为AF36 3774。结论 :噬菌体抗体具有结合人大肠癌组织和细胞的活性 ,为进一步开发临床应用人源抗肿瘤抗体和小分子抗体片段奠定基础