雷公藤活性成分对大鼠体内P450酶活性的影响

目的用Cocktail探针药物法,研究雷公藤片对大鼠肝CYP450的影响。方法分别以奥美拉唑和咪达唑仑作为CYP2C19和CYP3A4的探针药,将大鼠随机分为低剂量和高剂量两组,每日早晚灌胃雷公藤片,采用液质联用法测定连续使用雷公藤片前后大鼠血浆中相应的探针药物的浓度及其药代动力学参数。结果连续灌胃10 d后,与用药前比较,奥美拉唑、咪达唑仑的血药浓度及其药代动力学参数有明显改变;低剂量组和高剂量组中咪达唑仑的AUC明显增加,CL/F明显降低,T12增大,Vd/F和Tmax变化不明显,高剂量组中Cmax有所增大;低剂量组中奥美拉唑的T21和Vd/F有所增大,高剂量组中AUC增加(P<0.05)。结论连续灌胃雷公藤片10 d后,雷公藤片对大鼠体内CYP3A4酶具有抑制作用;对CYP2C19酶具有一定的抑制作用。     

兔转化生长因子-β2基因的克隆及其表达的检测

目的　克隆兔转化生长因子 β2 (TGF β2 )基因 ,并获得其在兔重要脏器及角膜中的表达。方法　利用不同物种的相似序列设计相关引物 ,制备兔肝组织的RNA并逆转录 ,RT PCR技术获得TGF β2 基因蛋白编码区序列后克隆 ,RT PCR半定量及荧光定量PCR检测TGF β2 在兔重要脏器及角膜中的表达。结果　成功地克隆了兔TGF β2 的蛋白编码区序列 ,测序证实和人、大鼠及小鼠具有高度的同源性 ,含有TGF β2 的保守结构域 ,TGF β2 基因在兔心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肾上腺和角膜组织中均有不同程度表达。结论　利用同源序列克隆进化上保守的基因是简捷快速的方法。获得兔TGF β2 的基因有助于进一步研究其在机体重要脏器纤维化、肿瘤以及角膜疾病中的作用     

常染色体显性先天性白内障一家系致病基因的连锁分析

背景先天性白内障约1／3的病例是由遗传所致,已发现遗传性白内障有着极为明显的遗传异质性,了解先天性白内障的致病基因对其基因治疗极为重要。目的分析一个具有常染色体显性遗传特点的先天性白内障家系的临床表型特征,进行已知致病基因的筛查定位。方法对遗传性先天性白内障一家系共16名成员眼部进行详细的临床检查,包括6例患者,确定为本家系白内障患者的临床表型。收集其中11名家系成员的血液样本提取DNA,包括3名正常家系成员及其配偶、5例患者。利用连锁分析进行排除定位,并采用Schuelke报道的新方法,只合成普通引物及一种荧光标记的通用引物M13,进行聚合酶链反应（PCR）,对连锁区域内的候选基因进行基因序列分析。结果本家系的白内障遗传方式符合常染色体显性遗传特征。基因连锁分析表明,在D22S315得到最高LOD值为1．20,在D16S3068得到LOD值为0．6。CRYBB2基因所有编码区及外显子与内含子交界处未发现基因序列突变。结论本家系初步排除了CRYBB2基因与此家系先天性白内障的相关性。对这个家系的基因定位需要更进一步的全基因组扫描,以发现致病基因在染色体上的可疑区间。连锁分析中进行微卫星位点的PCR扩增时,利用合成荧光标记的通用引物M13,可以显著降低成本,并取得同样的实验结果。     

细胞色素氧化酶在高体积分数氧暴露下胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞表达的变化

目的 观察高体积分数氧(高氧)暴露下胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)的线粒体DNA编码细胞色素氧化酶亚基Ⅰ、Ⅱ(COXⅠ、COXⅡ)mRNA表达的动态变化,探讨其在早产鼠高氧肺损伤发生发展的可能作用.方法 分离、培养19 d胎鼠AECⅡ,经贴壁纯化后随机分为高氧组和空气组.高氧组在更换培养液后通入950 mL/L氧气及50 mL/L二氧化碳混合气,3 L/min,10 min后密封.2组均置于37 ℃、 50 mL/L二氧化碳培养箱中培养.2组分别于高氧或空气暴露 6、12、24 h提取AEC Ⅱ总RNA,采用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定其COXⅠ和COXⅡ mRNA表达.采用SPSS 12.0软件进行统计学分析.结果 与同时间点空气组比较,高氧暴露6、12 h时,COXⅠ mRNA的表达显著升高(t=3.832 P=0.019,t=10.431 P=0),其后下降,24 h时2组比较无显著性差异(t=0.360 P=0.731).高氧暴露6 h时,COXⅡ mRNA表达显著升高(t=2.795 P=0.035),12、24 h时2组无显著差异(t=0.892 P=0.40,t=2.018 P=0.071).结论 高氧暴露诱导胎鼠AECⅡ中COXⅠ mRNA和COXⅡmRNA表达上调,可能是高氧肺损伤的保护作用机制之一.     

高浓度氧对早产鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞增殖和细胞周期的影响

目的探讨高浓度氧（简称高氧）对早产鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞（AECⅡ）增殖和细胞周期的影响。方法原代培养早产大鼠AECⅡ，建立高氧细胞损伤模型。血球计数板计数法对培养细胞计数，台盼蓝拒染法检测细胞活力，流式细胞术检测细胞周期和Ki67表达。结果空气组AECⅡ在培养后其数目不断增加，高氧组给氧后48和72h，细胞数目减少、细胞活力降低。高氧使G0／G1期细胞比例显著增多，S和G2／M期细胞比例明显减少。高氧组给氧后24、48及72h，Ki67阳性细胞的表达率及荧光指数较同时间点空气组均明显降低（P〈0．05或P〈0．01）。结论原代培养的早产大鼠AECⅡ暴露在高氧环境中发生G1期阻滞，Ki67表达减少，细胞增殖受抑，这种增殖受抑与早产儿慢性肺损伤的发生密切相关。     

早产儿用氧

获得充分的组织氧合又避免氧化应激损伤是早产儿最适氧疗策略。然而,早产儿出生后不同时期最佳目标血氧饱和度值不同,目前仍缺少指导临床医生安全用氧的确凿证据。本文系统介绍了目前早产儿出生时、出生后早期和晚期,以及窒息复苏时氧疗策略及其管理。     

注射用丹参多酚酸对脑缺血再灌注大鼠脑损伤的保护作用

目的 考察注射用丹参多酚酸（SAFI）对脑缺血再灌注大鼠脑损伤的保护作用。方法 线拴法构建大脑中动脉缺血再灌注（MCAO/R）大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组、丁苯酞氯化钠注射液（阳性药,9 mL·kg^-1）组和SAFI低、中、高剂量（5.85、11.71、23.42 mg·kg^-1,11.71 mg·kg^-1为临床等效剂量）组,每组12只。假手术组和模型组给予0.9%氯化钠注射液,SAFI每天给药1次,丁苯酞氯化钠注射液每天给药2次,尾iv连续给药14 d。给药期间称大鼠体质量;给药前后对各组大鼠进行神经功能评分;给药后采用TTC染色法检测脑梗死体积;酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清中γ干扰素（IFN-γ）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和超氧化物歧化酶（SOD）的水平;HE染色观察脑组织病理形态;尼氏染色观察海马区尼氏小体形态变化情况。结果 给药14 d后,与模型组比较,SAFI 5.85、11.71、23.42 mg · kg^-1组和丁苯酞氯化钠注射液组大鼠体质量显著增加（P ＜ 0.001）,脑组织梗死体积显著缩小（P＜0.001） ;SAFI 11.71、23.42 mg·kg^-1组和丁苯酞氯化钠注射液组神经功能评分显著降低（P＜0.05、0.01）,IFN-γ、IL-1β和TNF-α水平均显著降低（P＜0.01、0.001）,SOD水平显著升高（P＜0.01、0.001）; SAFI 23.42 mg·kg^-1组和丁苯酞氯化钠注射液组IL-6水平显著降低（P＜0.05、0.01）; SAFI可明显改善MCAO/R大鼠脑组织缺血半暗带区病理损伤,抑制尼氏小体数的减少。结论 SAFI对脑缺血再灌注大鼠脑损伤具有明显的保护作用。     

上海市闵行区1998-2007年麻疹流行病学特征分析与控制策略探讨

目的 分析上海市闵行区1998-2007年麻疹流行病学特征变化规律,探讨麻疹控制策略,为加速控制麻疹提供科学依据.方法 根据上海市常规传染病报告系统和人口学资料,对1998-2007年麻疹疫情资料进行描述流行病学分析.从疑似患者的咽拭子样本分离病毒,分析其基因特性及抗原性.结果 麻疹年平均发病率为17.69/10万,主要是20岁以上成人和小于8月龄幼儿;发病季节高峰在3-5月,户籍人口麻疹流行无明显周期性,非户籍人口2～3年一个流行高峰.健康人群不同年龄组抗体水平差异有统计学意义(x2=86.06,P<0.01),抗体水平在20～30岁最低.从10例疑似患者咽拭子样本中分离到4株麻疹病毒株,与麻疹疫苗株S191分属于不同的基因型,抗原性有一定的差异.结论 麻疹流行特征已发生根本性改变,流行周期不明显,发病年龄呈双向移位,不典型症状增多.非户籍人口的发病特征更接近于自然感染,对全市麻疹流行病学特征产生了重要的影响.麻疹病毒株与疫苗株存在差异,因此监测地方性流行株的基因和抗原变化很有必要.现阶段应在对儿童保持高水平麻疹疫苗接种率的前提下,对特定人群开展麻疹疫苗强化免疫,采取针对性免疫策略和加强麻疹监测工作是减少麻疹发病的主要策略.     

中药保肝药剂型及质量控制方法研究进展

近年来已发现众多对肝脏损伤具有确切保护作用的中药保肝药,其临床应用也日益广泛。同时,随着中药保肝药的新剂型不断涌现,对其质量控制的方法与手段的要求也在不断提高。该文结合国内外相关文献资料,对中药保肝药的剂型及其质量评价方法的研究进展进行了综述,展望了中药保肝药新剂型的发展前景。     

复方五仁醇胶囊含药血清中木脂素类成分的UPLC-MS/MS分析

目的:分析复方五仁醇胶囊大鼠灌胃后消化吸收进入血液的木脂素类成分,以便与该制剂血清药理学研究相结合,阐明其药效物质基础。方法:采用UPLC-MS/MS方法,比较复方五仁醇胶囊含药血清、体外制剂、空白血清及对照品提取离子流色谱图(EIC),并通过质谱图相关离子峰分析,确认进入血液的木脂素类成分。结果:发现制剂中存在的五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素5个木脂素类成分进入血液。结论:这5个木脂素类成分很可能是复方五仁醇胶囊体内直接作用物质的重要组成部分,结合血清药理学作进一步研究有助于阐明该制剂药效物质基础。