HPLC-UV法测定大鼠血中[6]-姜酚的浓度

目的建立测定大鼠血浆中[6]-姜酚浓度的HPLC-UV法,为进一步研究[6]-姜酚的药代动力学提供可靠的方法。方法大鼠血浆样品以液-液萃取法提取后,采用HPLC-UV测定大鼠血浆中[6]-姜酚的浓度。HPLC条件:Hypersil C18柱(250mm×4.6mm,5μm),乙腈-水(45:55)为流动相,进样量:20μL,流速:1.0mL/min,紫外检测波长:280nm。结果[6]-姜酚线性范围为0.25～5.0μg/mL,最低检测限为0.1μg/mL,日内精密度RSD5.5%,日间精密度RSD6.8%。结论该测定方法具有灵敏、专一和快速的优点,可用于测定大鼠灌胃给药后[6]-姜酚的血浆浓度。     

川贝母组培物的提取工艺优选

目的：优选川贝母组培物的提取工艺。方法：以总生物碱含量为指标,通过单因素试验筛选提取方法,采用正交试验考察乙醇体积分数、加醇量、提取时间及提取次数对川贝母组培物提取工艺的影响。运用紫外-可见分光光度计法测定总生物碱含量,检测波长415 nm。结果：选择回流法提取川贝母组培物,最佳工艺参数为加6倍量85%乙醇提取2次,每次1.5 h;总生物碱提取量0.197 g·g^-1。结论：该工艺稳定可行,可作为川贝母组培物提取物的制备工艺。     

猩猩草化学成分的研究

目的对大戟属植物猩猩草Euphorbia cyathophora的化学成分进行研究。方法应用正、反相硅胶(RP-18型)柱层析;葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20型)柱层析,结合重结晶方法进行分离纯化,运用1H-NMR、13C NMR和EI-MS等现代波谱技术对化合物的结构进行鉴定。结果从猩猩草提取物的石油醚萃取部位中分离鉴定了5个化合物,分别被鉴定为:十六烷酸(Ⅰ)、β-谷甾醇(Ⅱ)、stigmast-5-ene-3,7-diol(Ⅲ)、11-氧代-β-香树脂醇乙酸酯(Ⅳ)、germanicolacetate(Ⅴ)。结论以上化合物均为首次从该植物中分离得到。     

金耳多糖对豚鼠哮喘模型肺功能的影响

目的:研究金耳多糖(TMP)对豚鼠哮喘模型支气管平滑肌收缩功能的影响,初步分析其作用机制。方法:采用肺阻力(RL)和肺动态顺应性(Cdyn)指标评价TMP对致敏豚鼠抗原攻击前后肺功能变化的影响;采用离体气管条法观察TMP对豚鼠气道的直接扩张和对抗氨甲酰胆碱(CCH)和组胺引起的气道平滑肌收缩作用。结果:在整体试验中,TMP 1.60g/kg预处理,能明显抑制致敏豚鼠抗原攻击后引起的RL增加和Cdyn下降;在离体试验中,5-80mg/mL TMP对豚鼠气道具有直接舒张作用,10-80mg/mL TMP对CCH引起的气道平滑肌收缩呈现非常显著的抑制作用(P<0.05),但对组胺引起的气道平滑肌收缩无对抗作用。结论:TMP抑制豚鼠哮喘模型肺功能下降可能与CCH作用有关。     

麦门冬汤诱导人肺腺癌A549细胞凋亡作用及其机制

目的:研究麦门冬汤对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响。方法:采用噻唑蓝(MTT)法检测麦门冬汤(0.25、2.5、25g/L)作用24、48、72h后人肺腺癌A549细胞(2×104个/m L)活性;吖啶橙(AO)/EB双荧光染色观察麦门冬汤各剂量作用48h后A549细胞凋亡形态学改变;流式细胞术分析麦门冬汤作用48h后A549细胞凋亡率;Western Blot检测麦门冬汤对凋亡相关蛋白表皮生长因子受体(EGFR)、信号转导子和转录激活子3(STAT3)表达的影响。结果:各剂量麦门冬汤能够抑制A549细胞活性,诱导其发生凋亡形态学改变,且A549细胞凋亡率与麦门冬汤剂量呈正相关(P<0.01);Western Blot检测表明低、中剂量麦门冬汤可使EGFR、STAT3表达下降。结论:麦门冬汤可诱导A549细胞凋亡,其作用机制可能与下调EGFR、STAT3蛋白表达相关。     

基于表型性状和药材品质的8个贵州太子参品系的筛选与评价

目的:运用单株选育法,对目标太子参单株进行株系比较试验,为太子参新品种的选育提供种质材料。方法:以施秉SB-4号种源的8个太子参单株为选育对象,观测植株的27个表型性状、8个产量性状,UV分光光度计检测各株系的多糖含量。对观测结果运用因子分析法进行比较和筛选,单因素方差分析对其药材中多糖含量进行评价。结果:因子分析将27个表型性状归属于7个主因子,其中ZT-01,ZT-02,ZT-06,ZT-07株系的综合表型性状较好;8个产量性状可简化为新的3个主因子,以ZT-01,ZT-02,ZT-03,ZT-07株系的综合产量性状较好;单因素方差分析显示,ZT-01,ZT-02,ZT-05,ZT-08株系的多糖含量显著高于ZT-03,ZT-04,ZT-06,ZT-07株系。结论:从表型性状,产量性状和品质性状综合考虑,ZT-01,ZT-02,ZT-03,ZT-06,ZT-07表现优良,其中ZT-01,ZT-02株系可作为重点扩繁株系进一步选育;ZT-06,ZT-07株系的株型,主茎节数等表型性状好,可以作为观赏品种选育;ZT-03株系的抗性好,产量高,可以作为抗性品种进行选育研究;ZT-05株系的多糖含量高,翌年继续进行单株筛选。     

三橘荔核汤对CAP/CPPS患者前列腺液MCP-1、PDGF-BB表达的影响

目的:观察三橘荔核汤对CAP/CPPS患者前列腺液MCP-1、PDGF-BB表达的影响。方法:将符合CAP/CPPS(气滞血瘀型)诊断标准的患者70例随机分为治疗组和对照组各35例,治疗组采用三橘荔核汤口服,对照组采用前列腺汤口服,均以10 d为1个疗程,共3个疗程。观察两组患者临床疗效、NIH-CPSI积分及前列腺液中细胞因子MCP-1、PDGF-BB水平的变化。结果:两组治疗后综合疗效比较,差异有统计学意义(P0.05);NIH-CPSI积分比较,差异有统计学意义(P0.05);MCP-1、PDGF-BB的表达,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:三橘荔核汤治疗CAP/CPPS患者临床疗效显著,其作用机理可能是通过调控炎症因子MCP-1、PDGF-BB的表达从而达到免疫调节作用。     

黄芩中主要黄酮类成分的含量分析

目的：建立黄芩中主要黄酮类成分的高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)含量测定方法,并研究产地、生长年限、采收期、栽培和加工方法等对主要黄酮类成分含量的影响。方法：采用Thermo ODS-2 Hypersil 色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),以乙腈-0.1%磷酸水-四氢呋喃为流动相进行梯度洗脱,检测波长274 nm,流速1.00 mL·min^-1,柱温26 ℃,进样量20 μL。结果：6个主要黄酮,黄芩苷(1)、千层纸素A苷(2)、汉黄芩苷(3)、黄芩素(4)、汉黄芩素(5)和千层纸素 A(6),分别在选定范围内线性关系良好(R²≥0.999 3),平均加样回收率介于96.6%～103.0%,RSD均小于5.0%(n=9)。结果：不同产区黄芩质量差异很大。传统道地和传统非道地黄芩药材中黄酮含量没有显著性差异(P=0.480～1.000),但现在道地与非道地、传统道地与现在道地黄芩药材之间化合物1,2以及6个黄酮含量之和存在较显著差异(P=0.005～0.013);生长年限对药材质量影响不是特别显著(P>0.148～0.966),但一、二年生药材中的黄酮含量稍高;春季采收比秋季采收的黄芩黄酮含量高;野生与栽培药材中的黄酮含量除化合物3(P=0.019)和6(P=0.038)外,其他没有显著性差异(P=0.185～0.635);与药材比较商品饮片中黄酮苷的含量较低,而黄酮苷元的含量则较高。结论：本法简便、准确、重现性好,可作为黄芩药材质量检测的方法。     

金银花类药用植物IspE和IspH基因克隆和生物信息学分析

目的:克隆金银花类药用植物4-二磷酸胞苷-2-C-甲基赤藓糖激酶(4-diphosphocytidyl-2-C-methyl-D-erythritol kinase,IspE)和4-羟基-3-甲基-2-邻苯基二磷酸还原酶(4-hydroxy-3-methylbut-2-enyl diphosphate reductase,IspH)基因,并对其基因序列、蛋白特性和转录活性进行分析、比较.方法:从忍冬Lonicera japonica转录组测序结果中分析获得了IspE,IspH基因.分别以忍冬、红白忍冬L.japonica var.chinensis、红腺忍冬L.hypoglauca和水忍冬L.dasystyla新鲜花蕾为材料,利用RT-PCR技术克隆获得了4种金银花类药用植物IspE和IspH基因的全长cDNA.运用生物信息学分析软件,预测编码蛋白的结构和功能,并通过RT-PCR检测IspE和IspH在忍冬、红白忍冬、红腺忍冬、水忍冬花蕾中的转录情况.结果:金银花类药用植物IspE基因含有1个完整的开放阅读框,长度为1 221 bp,编码406个氨基酸;IspH含有一个完整的开放阅读框,长度为1 380 bp,编码459个氨基酸.IspE和IspH均为非分泌蛋白,均定位于叶绿体中.RT-PCR分析结果表明在忍冬、红腺忍冬和水忍冬的花蕾中IspE,IspH基因的转录水平没有显著差异,但红白忍冬花蕾中IspE,IspH基因的转录水平均显著高于忍冬.结论:克隆获得忍冬、红白忍冬、红腺忍冬和水忍冬中IspE,IspH基因,并证实了其在不同金银花类药用植物中的表达,为进一步研究IspE,IspH基因对萜类化合物生物合成和花香气以及颜色的影响奠定了基础.     

六味调更汤治疗更年期Ⅱ型糖尿病的网络药理学机制研究

目的采用网络药理学的方法对六味调更汤治疗更年期Ⅱ型糖尿病的分子作用机制进行研究。方法利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP),收集六味调更汤的活性成分,搜寻潜在靶点,借助STRING平台构建蛋白互作网络(PPI),使用Cytoscape 3.6.0软件筛选出关键靶点。用DAVID平台对关键靶基因进行GO生物过程富集,分析靶点的KEGG信号通路及相关的疾病富集。利用NCBI平台查找疾病靶标,最后使用Cytoscape 3.6.0软件对成分靶标和疾病靶标进行网络拓扑学分析。结果研究得到齐敦果酸、beta-谷甾醇、檞皮素等206个主要活性成分,其中活性成分度值较高的为β-谷甾醇、山奈酚及槲皮素等39个关键靶标,其与733个更年期Ⅱ型糖尿病靶标交集后得23个交集靶标。通过基因功能富集平台DAVID分析信号通路,得到雌激素信号转导通路(Estrogen signaling pathway)、PI3K-Akt信号通路(PI3K-Akt signaling pathway)等关键通路。结论六味调更汤中的活性成分主要通过CASP8、ESR1、Akt1等靶标作用于PI3K-Akt信号通路和雌激素信号转导通路达到对更年期Ⅱ型糖尿病的治疗作用。