血小板胶原受体糖蛋白Ⅵ体外表达及功能研究

为了深入研究血小板胶原受体糖蛋白Ⅵ(glycoproteinⅥ，GPⅥ)功能及筛选特异性抑制剂，利用基因重组技术体外表达GPⅥ胞外区片段。采用PCR方法扩增GPⅥ胞外区片段eDNA，构建表达载体pET-20b( )-GPⅥ，转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS，经IPTG诱导表达。表达产物经Ni—NTA Resin纯化、复性：使用Western blot方法鉴定重组蛋白性质；采用胶原结合试验测定重组蛋白的胶原结合能力。结果表明，经测序证明PCR扩增产物与GPⅥ胞外区eDNA序列完全一致；酶切分析证明成功构建了表达载体pET-20b( )-GPⅥ；原核细胞经诱导表达后出现新的相对分子量32kD蛋白条带，诱导产物以包涵体形式存在；Western blot分析表明重组蛋白可与抗Penta—His抗体和抗GPⅥ多抗特异性结合；胶原结合试验表明重组蛋白拥有较好的生物学功能。结论：正确构建了GPⅥ表达载体并成功表达重组蛋白，纯化、复性后的重组蛋白具有良好的抗原性和生物学活性。     

系统性红斑狼疮患者EB病毒和人疱疹病毒6型感染的探讨

目的探讨EB病毒（EBV）和人疱疹病毒6型（HHV6）感染在系统性红斑狼疮（SLE）中的作用。方法采用巢式聚合酶链反应（PCR）检测SLE患者和正常对照者外周血中HHV6DNA；应用逆转录PCR（RT-PCR）和Southern杂交技术，检测EBV阳性标本增殖期基因BZLF1、BARF1和BcLF1的表达。结果SLE患者组EBV阳性率高于对照组（P=0），但HHV6阳性率与对照组差异无显著性（P=0．7354），SLE患者EBV与HHV6检出率有明显相关性（P=0．0159）。32例EBVDNA阳性者中有2例检出BARF1 mRNA，均为活动期，且HHV6DNA阳性。16例BcLFlmRNA阳性者中有14例HHV6DNA阳性，相关性好。均未检测到BZLF1的表达。结论SLE患者EBV阳性率和BcLF1 mRNA的表达均与HHV6有明显相关性，SLE患者中可能存在EBV和HHV6的相互激活作用。     

运动功能状态量表效度研究

目的研究运动功能状态量表（MSS）与上肢Fugl-Meyer运动功能评定量表（FMA）的效度。方法对22例脑外伤和脑卒中患者的上肢运动功能进行MSS与上肢FMA的效度比较研究。结果MSS与上肢FMA高度相关，Pearson相关系数为0．961（P〈0．01）。结论MSS反映脑损伤后上肢运动功能有很好的有效性，可做为脑损伤上肢康复的评定指标。     

三株抗人巨细胞病毒pp65蛋白单克隆抗体的鉴定和应用

目的 制备抗HCMVpp65蛋白的单克隆抗体(简称单抗),并对其进行相关研究.方法 以重组表达的HCMVpp65蛋白为抗原,运用杂交瘤技术制备单抗,对获得的单抗进行Ig亚型、特异性、效价和亲和常数的鉴定与测定,并以免疫荧光检测法与进口同类产品进行比较.结果 获得3株针对HCMVpp65蛋白的单抗,即B6、G12、2B12;Ig亚型依次为IgG1κ型、IgG1κ型、IgMκ型;亲和常数依次为3.6×107 L/mol、3.8×107 L/mol、3.1×108 L/mol;免疫印迹试验结果表明,3株单抗都与HCMVpp65蛋白特异性的结合,除2B12外,B6、G12与EB病毒(EBV)、单纯疱疹病毒(HSV)Ⅰ、HSVⅡ均无交叉反应;与进口单抗平行检测140份临床标本,结果一致(r=1.00,P＞0.05).结论 成功获得3株稳定分泌抗HCMVpp65蛋白的杂交瘤细胞株,所产生的抗体特异性和亲和力较理想,为HCMVpp65蛋白抗原血症检测国产化试剂盒的研制奠定了基础.     

实时超声弹性成像评估物体硬度的实验研究

目的探讨实时超声弹性成像评估不同物体硬度的有效性及影响因素。方法选择5种不同硬度的物体,分别放置于3种介质中,以超声弹性成像评估其硬度。改变物体大小及放置深度,以观察对弹性分级的影响。弹性图像根据物体不同硬度分为5级。结果随着物体硬度的增加,弹性分级数亦增加。物体大小在一定范围内（≥5mm）对弹性分级无明显影响,而当物体过小时,可造成弹性分级的误判。随着物体放置深度的增加,弹性分级数也相应增加。结论实时超声弹性成像能较有效地分辨不同硬度的物体。     

大剂量螺内酯与糖皮质激素联合治疗重症慢性心力衰竭的临床观察

目的探讨顽固性慢性充血性心力衰竭(CHF)时,在常规治疗的基础上加用大剂量螺内酯与泼尼松,观察对水、Na 、K 代谢及心功能的影响。方法54例严重CHF患者(心功能Ⅲ~Ⅳ级,D期),随机分为对照组(27例)与研究组(27例),对照组采用常规治疗(包括螺内酯20 mg/d),研究组在常规治疗基础上,螺内酯60 mg/d,泼尼松40 mg/d连续应用30天。分析治疗后两组患者的一般临床情况、左室射血分数(EF)、血清Na 、K 、肌酐及24小时尿量、尿Na 、尿K 的变化。结果两组患者在治疗后尿量及EF显著增加,但研究组患者用药后尿量较对照组增加更明显,研究组长血清Na 7天及30天均高于对照组,7天Na (138.03±3.97)mmol vs(134.48±5.18)mmol/L,30天Na (137.17±3.57)mmol/L vs(134.00±4.46)mmol/L(均P<0.05);血清K 7天及30天亦均高于对照组,7天K (4.07±0.42)mmol/L vs(3.73±0.33)mmol/L,30天K (4.18±0.49)mmol/L vs(3.79±0.44)mmol/L(均P<0.05);而治疗后研究组血清肌酐7天及30天低于对照组,差异有统计学意义,7天K (92.93±28.65)mmol/L vs(123.19±30.79)mmol/L,30天K (90.07±30.32)mmol/Lvs(115.00±40.61)mmol/L(均P<0.05),尿Na 高于对照组(P<0.05)。结论常规治疗的基础上,适量应用糖皮质激素及大剂量螺内酯可使重症CHF患者在保持K 、Na 平衡及有效血容量的基础上能更明显地减轻过重的水负荷,改善心功能。     

酶联免疫吸附试验检测人疱疹病毒7型抗体的研究

目的建立一种简便、快速、可靠的检测人疱疹病毒7型(HHV 7)特异性IgG和IgM酶联免疫吸附试验(ELISA)。方法应用HHV 7标准株G lasgow感染SupT1细胞,制备并纯化细胞工程抗原和重组pp85抗原;对325份血清HHV 7抗体进行检测,建立HHV 7特异性IgM和IgG间接ELISA,并与Q iagen公司ELISA试剂盒检测结果进行比较。结果采用细胞工程抗原和重组抗原制备的HHV 7 IgG和IgM ELISA诊断试剂敏感性、特异性、稳定性及重复性[变异系数(CV)<10%]较好;以Q iagen公司ELISA试剂盒为参比,重组抗原IgG ELISA检测上述标本的敏感性、特异性和符合率分别为98.1%、94.1%和97.8%,IgM ELISA分别为84.6%、99.7%和99.1%;与细胞工程抗原相比,重组抗原诊断试剂的特异性高而敏感性略低。结论自制HHV 7 IgG和IgMELISA检测试剂敏感特异,可用于临床HHV 7感染的诊断及流行病学调查。     

肾透明细胞癌N-WASP蛋白表达特点及与临床病理相关性

目的研究肾透明细胞癌组织及癌旁正常肾组织中N-WASP表达特点及与临床病理的相关性。方法对73例肾透明细胞癌组织及癌旁正常肾组织行N-WASP免疫组织化学染色,比较两组表达差异。对癌组织N-WASP表达水平与肿瘤病理分级,临床分期进行相关性分析。对总体生存率行单因素及多因素预后分析。结果癌组织N-WASP表达低于癌旁组织表达(P0.001)。癌组织中N-WASP低、中表达的患者生存率高于高表达患者(P0.01)。癌组织N-WASP表达水平(P0.01)与患者总体生存率相关。癌组织N-WASP表达水平可以作为判断肾透明细胞癌预后的独立预测因素(P0.05)。结论 N-WASP在肾透明细胞癌中表达明显下降,并可以作为独立预测因素提示患者预后。     

中外文献对足底内侧动脉分支描述差异的分析

足底和足内侧区切取游离或带蒂皮瓣时供区部位隐蔽,皮瓣血管蒂位置表浅易于解剖,不损害主要血管,皮瓣质地与手部皮肤相似,可携带神经重建受区感觉功能。因此,该处是带蒂皮瓣转移修复前足及踝关节周围软组织缺损的重要供区,也是游离皮(肌)瓣修复手部创面的良好供区。目前可于该处切取的皮(肌)瓣包括：足底内侧皮瓣（medial plantar skin flap）[1],足内侧皮瓣(medialis pedis flap)[2],足底内侧动脉穿支皮瓣（medial plantar artery perforator flap,MPAP）[3],足底内侧肌间隔筋膜岛状皮瓣（plantar marginal septum cutaneous island flap)[4],足底内侧静脉皮瓣(medial plantar venous flap)[5]和母展肌瓣（abductor hallucis muscle flap）[6]等。     

熏洗治疗的研究进展

熏洗疗法是传统中医外治法的重要组成部分,是根据中医辩证论治方法,选择适宜中药煎煮,或熏蒸,或洗浴全身、局部治疗疾病的方法。熏洗疗法具有温经散寒、行气活血、祛风除湿、清热解毒等作用,可用于治疗临床大多数疾病,近年来随着对透皮技术及自动化熏洗仪的研究,与现代科技相结合的熏洗技术已不同于几千年前,疗效也获得越来越多的肯定,现将近年来中药熏洗疗法的研究概况综述如下。