As2O3处理前后K562细胞基因表达变化的基因芯片检测

目的应用基因芯片研究三氧化二砷(As2O3)处理前后K562细胞基因表达的变化.方法提取As2O3处理前后K562细胞的总RNA,纯化为mRNA后再反转录为cDNA.cDNA经限制性内切酶Sau3AI切割后,cDNA片段分别用Cy3和Cy5标记,与自制的包含348个基因片段的胎盘库芯片杂交.结果杂交结果经扫描和软件分析,发现了11个差异表达的基因片段,其中有3个基因片段与细胞凋亡密切相关.结论我们构建的胎盘库基因芯片可以成功地用于研究药物作用前后基因表达的变化.     

地塞米松对布比卡因诱导小鼠神经元毒性的影响

Objective To investigate the effect of dexamethasone on the toxicity of bupivacaine in murine neurons.Methods Murine neuroblastoma cell line N2a was obtained from ATCC cell bank (USA). The cells were cultured in 10% fetal cow serum/MEM culture medium and divided into 4 groups voup I control (Con); group II bupivacaine ( Bup); group Ⅲ dexamethasone (Dex) and group IV Dex + Bup. The culture medium contained bupivacaine 900 μmol/L in group Bup and dexamethasone 1 μmol/L in group Dex respectively. In group Dex + Bup ( IV ) Bup was added to the culture medium with a final concentration of 900 μmol/L at 12 h after pretreatment with Dex 1 μmol/L. The cells were inoculated in 24 well plates (0.5 ml in each well, 24 wells in each group) and 10 cm culture dishes (7 ml in each dish, 4 dishes in each group). The release rate of LDH was calculated and the morphology of the cells and nucleus condensation (by Hoechst 3334224 fluorescent staining) was detected at 9 h of incubation in 24 well plates. The mitochondrial transmembrane potential (by JC-1 assay) and phosphorylation of Akt and ERKs (by Western blot) were measured at 5 h of incubation in 24 well plates and in culture dishes respectively. ResultsBupivacaine caused severe damage to the N2a cells as evidenced by increase in LDH release and nucleus condensation (apoptosis), dephosphorylation of Akt and ERKs, decrease in mitochondrial transmembrane potential and severe morphological changes. Dexamethasone pretreatment significantly attenuated bupivacaine-induced neurotoxicity. Conclusion Dexamethasone can protect N2a cells from bupivacaine-induced neurotoxicity through stabilization of mitochondrial transmembrane potential and inhibition of dephosphorylation of Akt and ERKs.     

IN VITRO ANALYSIS OF τ PHOSPHORYLATION SITES AND ITS BIOLOGICAL ACTIVITY

INTRODUCTIONThemicrotubule－associatedprotein蚲ishyperphos－phorylatedandglycosylatedinAlzheimerdisease（AD），andtheseabnormalmodificationsformedthebasisofprogressivelyretrogradeneurofibrillarydegenerationseeninADbrainandtherebythedementia（１，２）．ADab－normallyphosphorylated蚲notonlyismicrotubuleas－semblyincompetent，butalsoinhibitsassemblyanddis－assemblesthepreassembledmicrotubulesinvitro（３）．Inthetangle－bearingneuronsinADbrain，thenormalcytoskeletonisdisruptedandreplacedwi…     

Agilent 2100 Bioanalyzer在基因差异表达研究中的应用

目的观察Agilent 2100 Bioanalyzer 芯片分析系统(以下简称Bioanalyzer)在基因差异表达研究中的应用。方法应用限制性显示技术分别从正常和热休克处理后的酿酒酵母细胞中分离出cDNA片段,然后再用Bioanalyzer和传统的琼脂糖凝胶电泳技术对RD-PCR产物进行检测分析。结果Bioanalyzer能更快速、敏感地分离和显示差异表达的基因片段,并且通过对差异片段进行定量比较,发现了数个表达有明显差异的基因片段。结论Bioanalyzer在基因差异表达研究中具有重要的应用价值。     

奥兰扎平治疗精神分裂症58例临床观察

目的观察奥兰扎平治疗精神分裂症的临床疗效与安全性.方法选择58例精神分裂症病人,开始给予奥兰扎平5mg*d-1,3d后根据临床疗效、副反应情况酌情增加剂量,最大剂量不超过20mg*d-1,治疗8周.治疗前及治疗后每2周用PANSS、CGI、TESS量表评定1次.结果治疗后PANSS总分、各因子分较治疗前显著下降(P<0.01),副反应主要有抗胆碱症状、过度镇静、体重增加、一过性丙氨酸氨基转移酶升高.结论奥兰扎平是一种安全、有效、副作用较轻的抗精神病药.     

短串联重复序列HumFGA、D3S1359的法医学应用研究

对短串联重复序列（short tandem repeats，STR）的两个高多态位点HumFGA(human alpha fibrinogen，人类α-纤维蛋白原基因)、D3S1359的法医学应用进行研究，并通过实际检测案件统计结果进行评估。实验结果表明：两位点灵敏度高，分别为0.2、0.5ngDNA；同一性和可重复性均较理想；种属特异性好，常见动物未发现扩增产物，仅灵长类动物（黑叶猴和猕猴）有扩增条带；复合扩增体系效果良好；在352次减数分裂中，D3S1359未发现突变，HumFGA检测到1次，突变率为0.28％；实际案件统计和应用结果也显示两位点是多态性高，实用性强的两个遗传标记系统。HumFGA和D3S1359在法医学个人识别与亲子鉴定案例中有较大应用价值。     

胸腰段脊柱脊髓损伤减压与固定相关问题探讨（附166例报告）

目的 对胸腰段脊柱脊髓，马尾神经损伤患者的外科治疗及几种内固定方法的疗效进行探讨。方法 对166例患者的治疗进行回顾分析。该组患者中椎体爆裂性骨折37例，椎体压缩骨折超二分之一109例，椎体骨折脱位14例，多节段或跳跃骨折6例，脊髓损伤按Frankel分级，A级59例，B级46例，C级42例，D级19例，治疗采用后路减压复位122例，前路减压复位，髂骨植骨融合44例。结果 术后123例获3-18个月随访，随访患者中随4例RF钉断裂，5例Harrington上钩脱落，6例棍断裂，其余患者内固定稳固，脊髓，马尾神经恢复，除35例仍为A级外，余脊髓神经功能恢复1-3个级别。结论 各种不同内固定可保持或增强脊柱的稳定，胸腰段脊柱脊髓损伤的外科治疗应根据骨折类型，脊髓及马尾神经损伤程度选择手术入路及内固定材料。     

血管紧张素Ⅱ和氯沙坦对小鼠腹膜淋巴孔的调控作用

目的 研究血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )和AngⅡ受体抑制剂氯沙坦对腹膜淋巴孔的调控作用并探讨其机制。方法 分别在健康小鼠腹膜腔注射0.9%氯化钠溶液、AngⅡ、氯沙坦和AngⅡ +氯沙坦 ,2h后处死实验小鼠 ,取小鼠膈腹膜 ,作扫描电镜观察、计算机图像处理和定量分析。结果 注射AngⅡ后 ,腹膜腔腹膜淋巴孔的直径和分布密度分别为 (4.42±0.57) μm和 (53.60±10.07)/0.1mm2,较正常对照组[分别 (2.89±0.86) μm和(27.74±7.49)/0.1mm2]增大和增多(P<0.05)。注射氯沙坦后 ,淋巴孔的孔径和开放数目分别为 (2.02±0.48) μm和 (12.87±3.12)/0.1mm2 ,较正常对照组减小和减少(P<0.05)。联合应用AngⅡ和氯沙坦时 ,淋巴孔的孔径较正常对照组减小、分布密度减少。结论 AngⅡ可使腹膜淋巴孔孔径增大 ,开放数目增多 ;氯沙坦可使淋巴孔孔径减小 ,开放数目减少 ;联合应用AngⅡ和氯沙坦 ,AngⅡ对腹膜淋巴孔的调控作用被逆转     

后囊连续环形撕囊在儿童人工晶体植入术的应用

后发障是儿童白内障最常见的并发症，是导致术后视力下降的主要原因，故降低后发障的发生率对提高术后视力及减少弱视的发生非常重要，以往文献报道大多是术后行ND-YAG激光后囊切开术来治疗后发障。笔者近年对儿童白内障采用白内障摘除人工晶体植入联合后囊连续环形撕囊术预防人工晶体术后后囊混浊，效果肯定，报告如下。     

三尖杉酯碱诱导慢性髓系白血病K-562细胞凋亡的实验研究

目的阐明三尖杉酯碱（HT）作用于K562细胞的机制。方法应用细胞形态、DNA凝胶电泳和流式细胞仪等检测,观察HT对K562细胞株的作用方式,进一步用RT-PCR方法研究bcr/abl基因在转录水平的改变。结果0.01～100.00μg/ml浓度HT可诱导K562细胞凋亡,并呈时间和剂量依赖性。随着药物作用时间的延长,bcr/abl基因的转录下调。结论低浓度HT就可通过抑制bcr/abl基因的表达,诱导K562细胞凋亡。