p-Bad112/136、p-Akt、p-Erk在乳腺癌癌变过程中的表达及意义

目的：研究p—Bad112／136、p-Erk、p-Akt在乳腺癌癌变过程中，即乳腺正常组织、普通导管增生、轻中度不典型导管增生、重度不典型增生及导管原位癌、乳腺浸润性导管癌中的表达及意义。方法：用免疫组织化学S—P法检测131例乳腺石蜡包埋组织、Western Blotting法检测27例乳腺浸润性导管癌及癌旁乳腺组织中P—Bad112／136、p-Akt、p-Erk的表达情况。用X^2和t检验等方法分析四种蛋白在乳腺癌组织中表达的意义及其与临床病理特征间的关系。结果：免疫组化结果显示在乳腺癌癌变过程中这四种蛋白表达阳性率呈递增趋势，其中四种蛋白在乳腺普通导管增生和重度不典型增生及原位癌间阳性表达率差异有统计学意义（P值分别为0．034、0．023、0、001、0．001）；P—Bad112／136蛋白在重度不典型增生及原位癌组与浸润性导管癌组间差异有明显统计学意义（JD=0．002。0．004）。统计分析显示在乳腺浸润性导管癌中这四种蛋白与患者的年龄、临床分期、肿瘤大小无明显关系。但均与组织学分级相关（P值分别为0、039、0．026、0．038、0．026）。同时p-Erk、p-Akt蛋白的表达与腋窝淋巴结转移有关（P值分别为0．041、0．016）。Western Blotting结果显示四种蛋白含量在乳腺癌与癌旁乳腺组织的差异有明显的统计学意义（P值分别为0．002，0．001．0．002，0．003）。在乳腺癌组织中P—Bad112与P—Erk及P—Bad136与P—Akt蛋白表达量呈正相关性（P值分别为0．034、0、020）。结论：这四种蛋白表达水平在一定程度上提示了乳腺导管非典型增生向乳腺癌的转化潜能，并且提示MAPK／Erk及PI3-K／Akt传导路径在乳腺癌癌变过程中具有重要作用。     

结直肠癌患者 DHRS9的表达及其临床意义

目的：探讨脱氢酶/还原酶家族成员9（DHRS9）表达对结直肠癌临床预后的意义。方法：采用免疫组织化学染色方法检测163例临床结直肠癌组织样本,并挑选58例新鲜样本,提取总蛋白和总 RNA,采用Western blot 和 qPCR 方法检测 DHRS9表达情况。结果：Western blot 和 qPCR 检测结果表明,结直肠癌组织中DHRS9蛋白和 mRNA 表达均下调,且淋巴结转移（P =0.032）、TNM 晚期（P =0.021）、疾病复发（P =0.001）和患者死亡（P =0.014）显著影响 DHRS9表达。Kaplan - Meier 分析结果显示,DHRS9表达下调预示患者无病生存期（P =0.003）和疾病特异性生存时间（P =0.021）较短。Cox 多变量分析表明,DHRS9表达下调是结直肠癌患者疾病预后不良的独立预后标志物。此外,联合采用 DHRS9表达检测和 TNM 分期对患者预后进行判断更加准确。结论：DHRS9表达下调与结直肠癌患者肿瘤发展密切相关,可以作为结直肠癌患者疾病临床预后标志物。     

氟他胺（Flutamide）的抗雄性素作用及抗肿瘤作用

采用去势加睾丸酮处理的雄性大鼠，观察了氟地胺（Ｆｌｕｔａｍｉｄｅ）对其附性器官－精囊、前列腺及提肛肌重量的影响，以及免疫组织化学染色法，探讨了Ｆｌｕｔａｍｉｄｅ作用机理。结果表明，对照组与实验组大鼠前列腺及精囊湿重比较均有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。免疫组化结果证明Ｆｌｕｔａｍｉｄｅ能明显抑制靶器官对雄性素的吸收及利用，影响了前列腺细胞的生长。     

白细胞介素6和hepcidin在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达及其与贫血的相关性

目的：研究白细胞介素6（IL-6）和hepcidin在弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）患者中的表达及其在贫血发生中的作用。方法收集诊断时伴或不伴贫血的45例DLBCL患者,在诊断时抽取外周血标本,分别检测IL-6、hepcidin、血清铁蛋白和血红蛋白（Hb）浓度等。以24名健康志愿者作为对照。结果DLBCL患者的血浆hepcidin及IL-6水平分别为（347±171）μg／L、0.27 ng／L（0～9.61 ng／L）,与健康对照者的（175±92）μg／L、0相比,差异均有统计学意义（均P＜0.001）。在高乳酸脱氢酶（LDH）（P＝0.003）、有B症状（P＝0.040）和年龄校正的国际预后指数（IPI）评分＞1（P＝0.010）的患者中血浆hepcidin水平升高,差异均有统计学意义。在男性（P＝0.003）、肿瘤分期Ⅲ～Ⅳ期（P＝0.008）和IPI评分＞1（P＝0.004）的DLBCL患者中IL-6水平升高,差异均有统计学意义。 hepcidin水平与血清铁蛋白高度相关（r＝0.77,P＜0.001）,与IL-6弱相关（r＝0.31,P＝0.030）,与Hb无相关性（r＝-0.12,P＝0.300）。IL-6表达水平与Hb呈负相关（r＝-0.35,P＝0.009）。多因素分析提示,IL-6可以预测贫血（P＝0.03）,而hepcidin不能预测贫血（P＝0.89）。结论 DLBCL患者血浆hepcidin常高表达,但IL-6水平升高在DLBCL患者贫血的发生中起主要作用。     

靶向EGR1对泌乳素瘤的潜在治疗作用

目的：从基因分子水平出发,探究泌乳素瘤（prolactinoma,PRL）患者差异表达基因,从而探究疾病发展的核心驱动基因。旨在为泌乳素瘤患者的临床诊断、治疗及预后提供潜在的靶标。同时针对核心驱动基因,预测治疗泌乳素瘤患者的分子靶向药物。方法：从GEO（gene expression omnibus）数据库获取泌乳素瘤患者基因表达谱数据,进行泌乳素瘤组织和正常组织差异表达基因（differential expressed genes,DEG）筛选。同时进行加权基因共表达网络分析（weighted gene co-expression network analysis,WGCNA）、蛋白质相互作用网络分析（protein-protein interation,PPI）,确定泌乳素瘤发生发展的核心驱动基因。同时进行GO（gene ontology）分析、KEGG（kyoto encyclopedia of genes and genomes）分析及GSEA（gene set enrichment analysis）分析,探究泌乳素瘤患者发生改变的生物功能和信号通路,探究肿瘤发生发展的分子机制。此外,进行体外划痕实验、克隆形成测定、CCK-8实验及流式细胞术实验,验证分子靶向药物的潜在治疗效果。结果：共鉴定出1 201个差异表达基因,其中EGR1、MAPK1、MYC、BCL2和CALM1居于重要地位;GO和KEGG分析结果表明,泌乳素瘤的形成主要与纺锤极发生改变、卵母细胞减数分裂受到影响相关;泌乳素瘤很可能与帕金森病存在一定的同源性。同时进行CCK-8测定、克隆形成测定和体外划痕测定,验证了EGR1激动剂Genipin具有潜在抗泌乳素瘤的作用。流式细胞术分析结果显示,随着Genipin药物剂量增加,肿瘤细胞的凋亡百分比增加。结论：EGR1、MAPK1、MYC、BCL2和CALM1是泌乳素瘤的核心驱动基因,对泌乳素瘤的发生发展具有重要影响。EGR1的激动剂Genipin能够在体外抑制泌乳素瘤细胞的增殖和迁移,Genipin对泌乳素瘤具有潜在治疗作用。同时,本研究筛选出了泌乳素瘤发生的高风险信号通路,为其临床诊治提供了新的靶标,具有重要意义。     

鼻咽癌组织中Gli1的表达及其对5-8F细胞增殖和迁移的影响

目的:研究神经胶质瘤相关癌基因1(Gli1)在鼻咽癌组织中的表达及其对鼻咽癌细胞5-8F增殖和迁移的影响。方法:采用荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测40例鼻咽癌组织和12例正常鼻咽组织中Gli1的表达;设计并合成针对Gli1基因的RNAi片段,将其感染5-8F细胞,蛋白质印迹法检测Gli1蛋白表达;MTT实验、平板克隆形成实验、细胞划痕实验和Boyden实验分别研究Gli1基因沉默后对5-8F细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果:Gli1在鼻咽癌组织中的表达明显高于正常鼻咽组织,将siRNA-Gli1-01和siRNA-Gli1-02转染入5-8F细胞后,5-8F细胞中Gli1蛋白表达水平明显降低,细胞的增殖、迁移和侵袭能力明显减弱。结论:Gli1基因的表达异常与鼻咽癌的发生发展相关,有望成为鼻咽癌早期诊断和预测预后的生物分子标志物。