中药紫株的化学成分研究

目的：研究紫株Callicarpa pedunculata R.Brown的化学成分。方法：利用各种色谱技术进行分离纯化,通过各种理化方法及光谱（IR,MS,^1HNMR,^13CNMR)分析鉴定其化学结构。结果：从紫株全草的氯仿提取物中分离得到10种化合物,分别鉴定为：4个二萜类化合物：14α－羟基－7,15－异松烷二烯－18烷酸（14α－hydroxy-7,15-isopimaradien-18-oic acid,Ⅰ）;16α,17-二羟基－3－氧－扁枝杉烷（16α,17-dihydroxy-3-oxo-phyllocladane,Ⅱ）;8,11,13,15-四烯松香烷－18－烷酸（8,11,13,15-abietatraen-18-oic acid,Ⅲ）;6α-羟基尼刀瑞尔醇（6α-hydroxy nidorellol,Ⅳ）;2个黄酮类化合物5－羟基－3,4‘,7-三甲氧基黄酮（5－hydroxy-3,4‘,7-trimethoxyflavone,Ⅴ）;3,5-二甲基莰非醇（3,5－dimethylkaempherol,Ⅵ）;其余的分别为：熊果酸（ursolic acid,Ⅶ）,肌醇（myoinositol, Ⅷ）,β-谷甾醇（β-sitosterol,Ⅸ）,β-香树素（β－amyrin, Ⅹ）。结论：化合物Ⅰ-Ⅵ为首次从该种植物中分离得到,且化合物Ⅰ-Ⅳ分别为4种不同类型的二萜。熊果酸的含量高达1％,本植物可作为其资源植物。     

益母草中阿魏酸的色谱鉴别

目的：鉴别益母草中是否含阿魏酸,方法：采用薄层色谱法和高效液相色谱法鉴别不同提取溶煤制备的样品,结果：从益母草中能检出阿魏酸。结论：益母草中可能含游离的阿魏酸,以5％Na2CO3溶液替代药典中的甲醇提取,方法简化,稳定性高,重现性好。     

成人特发性局灶节段性肾小球硬化病248例临床病理分析

目的 重新评价肾活检标本中特发性局灶节段性肾小球硬化病（FSGS）的发生率、主要临床及病理特点。方法 收集1994年7月～2000年7月间248例特发性FSGS的患者,观察肾组织的光镜、 荧光及电镜的特点,根据肾小球病变将特发性FSGS分为3种亚型。结果 248例成人特发性局灶节段肾小球硬化占同期肾活检的12.4%,占成年人原发性肾小球疾病的19.0%,以18～30岁为发病高峰年龄（约占44.4%）。临床表现为不同程度的蛋白尿,以肾病综合征为表现者143例（占57.7%)。FSGS的3种病理亚型中,经典型FSGS仍占绝大多数（91.5%),尖端型为4.4%,塌陷型为4.1%,肾活检时,约1/3以上为肾功能不全（约占35.1%）。13例尿毒症中76.9%病理亚型为塌陷型。结论 局灶节段性肾小球硬化病约占原发性肾小球病1/5,FSGS患者肾活检时,除表现为蛋白尿、肾病综合征外,肾功能不全也较常见。塌陷型FSGS常表现为进行性的不可逆的肾功能衰竭,其预后差。     

人胎脑和SD大鼠脑中β-NGF的提取

目的研究拟获得快速高效的β-NFG(β-神经生长因子)纯化方法,并为其生物特性研究和临床应用奠定基础.方法通过低温高速离子、离子交换层析、透析等过程,从人胎脑和SD大鼠脑中分离纯化β-NGF,用SD S-PAGE分析其分子量和纯度,并经PC12细胞突起生长试验鉴定其生物学活性.结果从人胎脑和SD大鼠脑中分离纯化得到的β-NGF提取物在SDS-PAGE图上均呈单一条带,它们都能很好地促进PC12细胞长出突起,且人胎脑β-NGF提取物促进PC12细胞长出突起的能力和人重组β-NGF差别无显著性.结论实验获得了纯度高且生物活性良好的β-NGF.在分离纯化的其他参数不变时,分离纯化过程的总时间和温度对β-NGF的得率和生物学活性有明显影响.     

登革病毒甲基纤维素微量蚀斑技术的建立

目的建立登革病毒甲基纤维素微量蚀斑技术。方法将4株登革病毒接种于C6/36细胞内,5-7d后染色,观察蚀斑情况并计数。将测得值与组织培养半数感染量测定结果比较。结果登革病毒甲基纤维素微量蚀斑技术重复性好,比组织培养半数感染量法敏感。结论甲基纤维素徽量蚀斑技术可靠易行,可用于登革病毒滴定。     

广山楂HPLC指纹图谱建立及其活血化瘀作用谱效关系研究

目的 建立广山楂Malus doumeri指纹图谱,测定各批次广山楂的“活血化瘀”药效学指标,探讨广山楂化学成分与活血化瘀功效的谱效关系。方法 采用HPLC法建立18批广山楂的指纹图谱。利用大鼠高脂模型,测定不同批次广山楂的“活血化瘀”药效学指标,包括高密度脂蛋白胆固醇（high density lipoprotein cholesterol,HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein cholesterin,LDL-C）、总胆固醇（total cholesterol,TC）、三酰甘油（triglyceride,TG）含量及血液流变学指标等。运用偏最小二乘回归法（partial least-square method regression,PLSR）、灰色关联度分析法,分析广山楂化学成分与活血化瘀药效指标间的谱效关系。结果 构建了广山楂的HPLC图谱,确定了6个共有峰,并指认了其中的2个共有峰（绿原酸、根皮苷）。活血化瘀实验表明,不同批次广山楂活血药效指标间具有明显差异,在标定的广山楂6个特征峰中,峰2～6与HDL-C呈正相关,峰1、5、6与LDL...     

Box-Behnken设计-响应面法优化经典名方四妙勇安汤煎煮工艺研究

目的 遵循中医药传承创新发展的基本准则——“遵古原则”,考察经典名方四妙勇安汤（Simiao Yong’an Decoction,SYD）的煎煮工艺,确保原汤剂原汁原味的传统功效,并进行质量综合评价,为经典名方SYD进一步制剂开发提供参考。方法 采用Box-Behnken设计-响应面法对加水量、浸泡时间、煎煮时间进行考察,通过指纹图谱结合多元统计分析进行定性半定量评价,通过含量测定分析和干膏率进行定量评价,综合以上评价方法优选煎煮工艺并验证。结果 通过Box-Behnken设计-响应面法制备17批煎煮样品,建立了17批样品HPLC指纹图谱,标定了14个共有峰,利用多元统计分析对指纹图谱共有峰数据进行主成分分析（principal component analysis,PCA）与正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA）并计算得分,结果显示9号工艺为最佳煎煮工艺,即煎煮2次,第1次加16倍量水,浸泡30 min,煎煮30 min;第2次加16倍量水,煎煮30 min。同时采用H...     

清咳平喘颗粒治疗痰热郁肺型咳嗽的临床疗效观察

目的 观察清咳平喘颗粒治疗痰热郁肺型咳嗽的临床有效性。方法 选取2020年1月—2021年6月上海中医药大学附属龙华医院呼吸科门诊就诊的痰热郁肺型咳嗽患者100例,按随机数字表法分为对照组和治疗组各50例,对照组为西医常规治疗,治疗组在西医常规治疗基础上联合清咳平喘颗粒治疗。两组均连续治疗2周。观察两组患者治疗前后的中医证候、咳嗽症状、气道反应（血清免疫球蛋白E、外周血嗜酸性粒细胞）、肺功能［最大呼气流量、第1秒用力呼气容积（forced expiratory volume for 1 second,FEV1）与用力肺活量（forced vital capacity,FVC）的比值］、生活质量及不良反应情况。结果 治疗后,对照组和治疗组的总有效率分别是90%、94%,两组比较差异无统计学意义（P>0.05）。治疗后,两组患者中医证候评分、日间及夜间咳嗽积分较治疗前降低,且治疗组明显低于对照组（P<0.05）。治疗后,两组血清免疫球蛋白E、外周血嗜酸性粒细胞较治疗前明显下降,且治疗组气道反应指标改善好于对照组（P<0.05）。治疗后,两组最大呼气流量、FEV1/FVC较治疗前明显上升（P<0.05）,但两组比较差异无统计学意义（P>0.05）。随访时两组患者的生活质量评分较治疗前均显著升高,治疗组评分改善优于对照组,两组比较差异具有统计学意义（P<0.05）。治疗期间两组均未发生不良反应。结论 清咳平喘颗粒在治疗痰热郁肺型咳嗽安全性良好,有助于改善咳嗽症状,改善肺通气,提高患者生活质量。     

TPGS表面修饰岩白菜素固体脂质纳米粒的制备与口服生物利用度研究

目的 制备D-α-维生素E聚乙二醇1000琥珀酸酯（TPGS）修饰岩白菜素固体脂质纳米粒（TPGS surface-modified bergenin solid lipid nanoparticles,TPGS-Ber-SLN）,并考察其体外释药和口服药动学行为。方法 采用高压均质法制备TPGS-Ber-SLN。以包封率、载药量和粒径为考察指标,通过单因素考察结合Box-Behnken设计-效应面法（Box Behnken design- response surface methodology,BBD-RSM）优化TPGS-Ber-SLN处方,并制备成冻干粉末。X射线粉末衍射法（X-ray powder diffraction,XRPD）和差式扫描量热法（differential scanning calorimetry,DSC）分析岩白菜素在TPGS-Ber-SLN冻干粉末中的存在状态,透析袋法考察TPGS-Ber-SLN在不同介质中释药情况。以岩白菜素原料药为参考,比较TPGS-Ber-SLN在体内药动学行为及口服生物利用度。结果 TPGS-Ber-SLN最佳处方工艺：岩白菜素用量为40 mg,单硬脂酸甘油酯用量525 mg,泊洛沙姆188质量浓度为17.5 mg/mL,TPGS质量浓度为0.2 mg/mL,均质次数为9次。TPGS-Ber-SLN的平均包封率、载药量、粒径及ζ电位分别为（83.16±1.09）%、（4.97±0.13）%、（229.46±19.07）nm和（-15.67±0.23）mV,体外释药过程符合Weibull模型。口服药动学结果显示,TPGS-Ber-SLN的t_max延长至（2.07±0.43）h,t_1/2延长至（4.21±0.78）h,C_max和生物利用度分别提高至3.91倍和5.34倍。结论 TPGS-Ber-SLN显著改变了岩白菜素的药动学行为,增加了口服吸收生物利用度。     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌产酶耐药机制及同源性分析

目的探讨肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药的主要产酶机制及同源性。方法收集长沙市第一医院2016年12月-2017年12月临床分离的非重复碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(CRKP),采用改良碳青霉烯酶灭活试验(mCIM)检测碳青霉烯酶,聚合酶链反应(PCR)法检测常见耐药编码基因。脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点序列分型(MLST)分析同源性。结果共收集到57株CRKP,mCIM试验阳性率为91.23%(52/57)。PCR共检出6种耐药基因,包括blaSHV、blaCTX-M-9群、blaKPC-2、blaTEM、blaCTX-M-1群和blaNDM-1,检出率分别为94.74%、68.42%、68.42%、56.14%、3.51%和1.75%,其中2株携带blaCTX-M-1群的菌株经测序证实为blaCTX-M-80和blaCTX-M-123,blaCTX-M-9群中1株为blaCTX-M-27,2株为blaCTX-M-14,其余均为blaCTX-M-65。PFGE结果显示,57株CRKP可分为A~H共8种不同的型别,以A型为主,占76.79%,其中A6亚型占32.56%。MLST结果显示,共检出ST11和ST29两种型别,以ST11为主,占75.00%。结论该院临床分离的肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药的重要机制为产KPC-2型碳青霉烯酶,且同时携带多种超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)耐药基因。PFGE和MLST结果表明:该院临床分离的CRKP存在克隆传播,需加强流行病学监控。