靶向DNA损伤修复延缓衰老的研究进展

基因组不稳定是衰老的首要特征,而DNA损伤作为影响基因组稳定性的主要原因之一,长期被认为是诱发衰老的关键因素。本文综述了DNA损伤修复与衰老的内在关联,总结了DNA损伤诱导衰老发生的机制的最新研究进展,还探讨了靶向DNA损伤修复以延缓衰老的可能性及潜在风险。     

人端粒相关蛋白T-STAR的克隆及其与端粒酶催化亚单位hTERT的相互作用研究

目的克隆人端粒相关蛋白T-STAR并研究其与端粒酶催化亚单位hTERT在哺乳细胞内的相互作用。方法构建表达载体pGBKT7-hTERT,以pGBKT7-hTERT为诱饵,采用酵母双杂交技术进行cDNA文库筛选;构建pVP16-T-STAR和pMhTERT重组载体,脂质体法将其与报告质粒共转染入胃腺癌细胞株SGC-7901,以pM-53 pVP16-T、pM3-VP16为阳性对照,以pM53 pVP16-CP为阴性对照;以pM-hTERT pVP16、pM pVP16-T-STAR、pM pVP16为交叉阴性对照。ELISA法检测报告基因CAT的表达。结果成功构建真核表达载体pGBKT7-hTERT,将获得的阳性克隆测序,并进行同源性比较证实为是已收录的人cDNA序列T-STAR。pGBKT7-hTERT和pVP16-T-STAR共转染之后,报告基因CAT的表达(A值为0.258)显著高于阴性对照(A值为0.002~0.015)。结论T-STAR与hTERT在胃癌细胞内发生了相互作用,T-STAR可能是人端粒相关蛋白新成员,通过hTER参与端粒酶活性的调控。     

洛伐他汀对系膜细胞凋亡及Bcl-2和Bax基因表达的影响

目的 观察洛伐他汀对系膜细胞凋亡及Bcl-2和Bax基因表达的影响。并探讨其作用的可能机制。方法 用不同浓度的洛伐他汀处理大鼠系膜细胞，用流式细胞仪观察细胞凋亡指数，吖啶橙荧光活体染色观察细胞凋亡率，电镜观察凋亡细胞形态，免疫印迹法及细胞免疫结合图文分析观察洛伐他汀对系膜细胞Bcl-2和Bax基因表达的影响。结果 洛伐他汀对系膜细胞凋亡有明显诱导作用，呈一定剂量依赖性；并能明显抑制Bcl-2基因表达，促进Bax基因表达，致使两者比例明显下降。结论 洛伐他汀可剂量依赖性地诱导大鼠系膜细胞凋亡，其机制可能通过对凋亡抑制或促进基因的调控，改变Bcl-2/Bax比值而诱导MC的凋亡。     

旋磁场对胆结石病人胆汁中胆红素、钙、胆固醇和pH的影响

目的 探讨旋磁场与大面积静磁场对置对胆结石病人胆汁中总胆红素（BIT）、直接胆红素（BID）、间接胆红素（BII）、钙（Ca）、胆固醇（CH）和pH的影响。方法 旋磁组30例,测定旋磁处理前后65对胆汁样本。空白对照组15例,留取前后30对胆汁样本。将直径12mm圆形稀土永磁片110块,表面磁感应强度210mT,分别间隔10mm贴于210mm×220mm铁皮上形成一个大面积磁板与旋磁头表面静磁感应强度160mT,旋转平均表面磁感应强度100mT呈异名极对置,磁板置肝区背侧,旋磁头置剑突下处理40min。结果 旋磁组胆结石病人胆汁（n=65）:经旋磁场与磁板对置处理前减去处理后差值的x±s和t值分别为BIT41.81±93.52、3.59;BID 13.57±43.70、2.46;BII28.27±61.67、3.32;Ca 0.19±0.31、4.87;CH0.12±0.29、3.36;pH 0.01±0.27、0.30。除pH外,其余各项指标P值均<0.05。对照组胆汁（n=30）:间隔时间前后差值的x±s和t值分别为BIT4.42±22.05、1.14;BID2.40±12.37、1.06;BII2.52±46.27、0.30;Ca0.01±0.18、0.50;CH0.03±0.15、0.94;pH 0.009±0.06、0.84。P值均>0.05。结论 在本项磁场类型、强度和时间处理条件下,旋磁场与磁板对置能明显影响胆结石病人胆汁中的BIT、BID、BII、Ca和CH的浓度变化,且有显著降低的作用。     

骨髓基质成骨细胞-松质骨基质复合人工骨修复颅骨缺损的实验研究

目的 观察松质骨基质－骨髓基质成骨细胞复合工人骨在骨缺损区的成骨作用，探索该组织工程化人工骨修复颅骨缺损的可行性。方法 成年新西兰兔骨髓细胞体外培养、诱导后，接种于藻酸盐－松质骨基质中，形成松质骨基质－藻酸盐－骨髓基质成骨细胞复合人工骨，修复自体颅骨缺损。分别植入松质骨基质和骨髓基质成骨细胞作为对照。植入4周和8周后行X线摄片和组织学检查，观察骨形成情况。结果 复合人工成骨量优于单纯植入松质骨基持或骨髓基质成骨细胞组，并明显优于空白对照。结论 松质骨基质－骨髓基质成骨细胞复合人工骨髓修复颅骨缺损效果良好，可以作为临床大型骨缺损修复的途径之一。     

腰麻-硬膜外联合阻滞应用于分娩镇痛的临床观察

目的　探讨腰麻 硬膜外联合阻滞 (CSEA)用于分娩镇痛的效果及对产程、母婴的影响。方法　选择 2 3 7例ASAⅠ～Ⅱ级的足月初产妇行分娩镇痛为观察组 ;另选 2 0 0例条件相仿但不给分娩镇痛为对照组。观察组在蛛网膜下隙注入布比卡因 2mg和芬太尼 2 0 μg ;90分钟后硬膜外给予0 12 5 %罗比卡因和 2 μg/ml芬太尼行硬膜外病人自控镇痛 (PCEA)。其基础注药速度为 6ml/h ,冲击量为 2ml,锁定时间为 10分钟。用视觉模拟评分 (VAS)和下肢运动神经阻滞评分 (MBS)评估镇痛、阻滞效果 ,观察记录产妇的生命体征、产程时间、生产方式及新生儿Apgar评分。 结果　观察组产妇生命体征平稳 ,用药后 10分钟 99 2 %的产妇感到无痛 [VAS评分为 ( 0 0 4± 0 11)分 ],仅 0 8%的产妇镇痛不全。与镇痛前比较 ,观察组产妇MBS在腰麻后 10分钟显著增加 ,直至腰麻后 90分钟。观察组活跃期时间为 ( 96 3 4± 62 77)分钟 ,短于对照组 (P <0 0 1)。观察组第二产程时间 ( 5 3 15±2 5 70 )分钟 ,对照组为 ( 5 0 83± 2 4 81)分钟 (P >0 0 5 ) ;观察组新生儿出生后 1、5分钟Apgar评分、生产方式与对照组比较亦无统计学差异。结论　CSEA用于分娩镇痛效果确切 ,对运动神经阻滞轻 ,不影响产程及新生儿     

肾移植患者细菌谱的调查及耐药性的研究

目的：通过调查研究肾移植患者常见致病菌株分布特点及其对抗生素敏感性的规律，进一步提高临床治疗肾移植后感染患者的成功率。方法：1997年4月－2000年5月间，对拟诊为呼吸系和／或泌尿系细菌感染的肾移植患者进行，取其痰，咽拭子或中段尿标本进行细菌培养并作24种常用抗生素药敏试验，对结果进行统计学分析。结果：共有653份标本培养结果阳性，其中痰标本233份，咽拭子173份，中段尿247份，主要阳性菌株是铜绿假单胞菌，肺炎克雷伯杆菌，大肠杆菌和表皮葡萄球菌等。敏感率较高的抗生素有万古霉素，亚胺培南，阿米卡星和头孢他啶等，耐药率较高的有青霉素，氨苄西林，红霉素，苯唑西林和头孢唑林等。结论：（1）肾移植后感染的主要菌株种类与其他患者有所不同；（2）肾移植患者的感染菌株对抗生素敏感率最高的依次为万古霉素，亚胺培南，阿米卡星和头孢他啶，但耐药性也正在逐渐增强（3）肾移植患者的感染主要发生在呼吸和泌尿系统，其他部位的感染少见；（4）痰和咽拭子来源的细菌株对抗生素更敏感，中段尿来源的细菌则耐药株相对多见。     

Repair effect of Schwann cells modified by microgene pSVPoMcat on injured spinal cord in rats

OBJECTIVE: To observe the repair effect of Schwann cells (SCs) modified by microgene pSVPoMcat on injured spinal cord in rats. METHODS: Semi-transection injury at the level of T(8) of spinal cord was made with cutting method on 120 Sprague Dawley (SD) rats. Then 40 rats implanted with SCs modified by microgene pSVPoMcat were taken as Group A, 40 rats implanted with simple SCs as Group B and the other 40 rats were taken as the control group (Group C). The functional recovery of the rats was observed through combined behavioral score (CBS) and cortical somatosensory evoked potential (CSEP), and the expression of the glial fibrillary acidic protein (GFAP) was measured with in situ hybridization and immunocytochemistry. At 3 months after operation, the rats were examined with magnetic resonance image (MRI), and the neurofilaments (NF) of the axons were stained with immunohistochemical method. RESULTS: GFAP expression in Group A was significantly lower than that of the other 2 groups. MRI showed that the spinal signals in the injured area recovered fundamentally in Group A, didn't recover in Group B and malacia focus was found in Group C, which was same as the results of NF staining. Wave amplitudes in incubation periods in Group A and Group B tended to recover. It recovered to the normal level in Group A, which was similar to the results of CBS. CONCLUSIONS: SCs modified by microgene pSVPoMcat can inhibit GFAP expression, improve the growth of the axons and the functional recovery of neurons after spinal cord injury.