2010—2012年韶关市儿童呼吸道感染病毒病原学分析

目的探讨韶关市儿童常见呼吸道感染的病原学特点和分布特征。方法采集2010年7月至2012年7月因呼吸道感染于粤北人民医院的住院患者呼吸道标本171份,采用荧光定量PCR方法,对呼吸道标本同时进行甲型流感病毒（FluA）,乙型流感病毒（FluB）,腺病毒（ADV）,博卡病毒（BoV）,副流感病毒1型（PIV1）、2型（PIV2）、3型（PIV3）,鼻病毒（HRV）,呼吸道合胞病毒（RSV）,冠状病毒229E、0C43、HKUl、NL63,偏肺病毒（MPV）等14种常见呼吸道病毒核酸检测。结果171份标本中检出阳性标本93份,核酸阳性率为54．4％（93／171）,其中FluA占首位,阳性率为8．2％（14／171）,其他依次为ADV7．6％（13／171）,HRV7．6％（13／171）,PIVI／II／III 7．0％（12／171）,RSV 6.4％（11／171）,FluB5．8％（10／171）,BoV5．3％（9／171）,MPV3．5％（6／171）,冠状病毒（HCoV—OC43／HKUl）2．9％（5／171）。不同性别问患儿呼吸道病毒阳性率差异无统计学意义（P〉0．05）。≥6月龄组阳性率最低（37．5％）,1—3岁年龄组阳性率最高（62．1％）。结论韶关地区儿童发热呼吸道病毒感染病例的病原体以甲型流感病毒、腺病毒和鼻病毒为主。     

替米沙坦改善代谢综合征患者血管内皮功能

目的观察替米沙坦对代谢综合征患者血管内皮功能的影响。方法 76例代谢综合征患者随机分为常规组和替米沙坦组,每组38例,同时选择健康体检者38例作为对照组。替米沙坦组在常规用药的基础上加服替米沙坦80 mg/d,治疗3个月。检测三组患者治疗前后血糖、血脂代谢指标、血浆一氧化氮含量及炎症因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素6和C反应蛋白水平,观察血压及血管内皮舒张功能变化。结果治疗后常规组和替米沙坦组的血压、空腹血糖均明显下降(P<0.01),但两组间的血压、空腹血糖相比差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后替米沙坦组的肱动脉血流介导的舒张内径(FMD)(P<0.05)、一氧化氮含量明显升高(P<0.01),肿瘤坏死因子α、白细胞介素6和C反应蛋白水平降低(P<0.05),且与常规组相比差异有统计学意义(P<0.05);而常规组FMD、一氧化氮含量及炎症因子水平与治疗前比无明显变化(P>0.05)。结论替米沙坦可降低代谢综合征患者血浆炎症因子水平,抑制炎症反应,升高一氧化氮含量,改善血管内皮功能。     

诺如病毒衣壳蛋白重组人3型腺病毒的构建

目的 制备表达诺如病毒衣壳蛋白的重组人3型腺病毒.方法 将诺如病毒衣壳蛋白基因(Noro-orf2)克隆到腺病毒穿梭载体pBSE3CMV-egfp上,与线性化人3型腺病毒骨架质粒pBRAdv3共电转化感受态大肠杆菌BJ5183,使其在细菌内发生同源重组,带Noro-orf2基因的表达框置换腺病毒E3区,PCR及酶切筛选得到重组腺病毒质粒,将重组腺病毒质粒转染Hep-2细胞进行包装,获得感染性的重组腺病毒粒子,免疫组化分析重组腺病毒中诺如病毒衣壳蛋白的表达.结果 同源重组后经酶切和PCR鉴定证明插入Noro-orf2基因的重组腺病毒质粒pBRAdv3E3dNor成功构建,并经转染包装得到高滴度的重组腺病毒Adv3E3dNor,免疫组化证明诺如病毒衣壳蛋白得到表达.结论 成功构建表达诺如病毒衣壳蛋白的重组3型腺病毒Adv3E3dNor,为研制人3型腺病毒-诺如病毒双价疫苗奠定了基础.     

山东省部分地区蚊虫种类与分布的变化

为解山东省部分地区的蚊虫种类、分布及生态习性,本文采用成蚊诱捕和幼虫采集等方法,调查了山东省济宁、临沂和青岛3个地区的蚊虫及其孳生环境。本次调查共捕获成蚊23059只,幼虫638瓶,经鉴定为5属17种。3个地区分布的蚊虫种类不同,其中青岛蚊种最多,有16种;各种蚊幼的孳生地类型也有所差异。与1990年有关报道相比,蚊虫种类的数量有所减少;在蚊虫种群构成方面,淡色库蚊所占比例明显下降,白蚊伊蚊数量增加,成为优势蚊种之一。中华按蚊等蚊幼的孳生地范围扩大,增加了传播疾病的潜在危险。     

大鼠siTLR4重组腺病毒载体的构建及功能鉴定

目的构建特异性针对大鼠TLR4基因的siRNA重组腺病毒载体,为进一步研究TLR4在不同疾病中的免疫调节机制奠定重要基础。方法设计并合成3对大鼠TLR4基因的siRNA序列,退火处理后定向克隆到pSES-HUS穿梭质粒中,获得pSES-HUS-siTLR4,经Pme I线性化后与pAdEasy-1骨架质粒在BJ5183细菌中进行同源重组,从而构建pAd-siTLR4质粒,通过脂质体转染,在HEK293细胞中包装形成Ad-siTLR4腺病毒颗粒,用该病毒感染PC12细胞,从基因和蛋白质水平分别检测3对siTLR4的抑制效果,同时从蛋白质水平检测TLR4下游关键分子NF-κB的表达。结果 PCR、酶切和测序均证实目的基因正确克隆到所构建的pAd-siTLR4重组腺病毒载体中;经包装获得的Ad-siTLR4病毒颗粒在PC12细胞中能够有效地抑制TLR4 mRNA和蛋白水平的表达,并显著地降低了NF-κB的表达。结论成功构建了pAd-siTLR4重组腺病毒质粒,同时包装获得了Ad-siTLR4重组腺病毒,转染PC12细胞后不仅能明显降低TLR4的表达,而且有效地抑制了TLR4通路下游关键分子NF-κB的表达。     

慢性丙型肝炎患者血清ANA、anti-LKM1的检测及其产生机制探讨

目的 观察慢性丙型肝炎(CHC)患者中抗核抗体(ANA)、抗肝肾微粒体抗体(anti-LKM1)的检出情况,并深入探讨其产生机制.方法 通过多因素分析探讨自身抗体产生与年龄、性别、HCV RNA含量、HCV基因型、生化指标及临床特征等指标的关系.结果 360例CHC患者中,ANA阳性率为12.5%(451360),anti-LKMi的阳性率为2.5%(91360).CHC患者的自身抗体检出率高于慢性乙型肝炎(CHB)患者(15%vs2.9%,P=0.006)而低于自身免疫性肝炎(AIH)患者(15%vs47.9%,P<0.001);女性患者的自身抗体检出率高于男性(P<0.05);自身抗体阳性组HCV RNA含量低于自身抗体阴性组(1.23×107 vs 7.2× 107拷贝/L,P<0.05).自身抗体阳性组和阴性组患者的年龄、HCV基因型、生化指标、肝硬化发生率的差异均无统计学意义.接受干扰素治疗组和未接受干扰紊治疗组患者的自身抗体检出率差异无统计学意义(P>0.05).结论 CHC患者血清中可检测出AIH相关自身抗体;自身抗体可能并非由干扰素治疗所诱发;很可能是HCV引发自身免疫,导致自身抗体的出现.     

颈椎病的屈伸位MRI研究

目的初步描述颈椎病人椎管狭窄在屈伸位MRI上的动态改变。方法54例颈椎病病人,均接受中立、前屈及后伸位MRI,在不同体位下,观察颈椎病人颈椎曲度、稳定性及椎间盘突出位置,分析前屈及后伸位时椎管狭窄程度的变化。结果颈椎病病人后伸位上出现椎管狭窄的数量(29/54)较前屈位(11/54)明显多(P<0.01),8例在前屈或后伸位上椎管狭窄程度无明显变化,6例前屈及后伸位时,蛛网膜下腔变窄程度均较中立位时重。结论屈伸位MRI可在人体动态下为研究颈椎病病人颈椎及其周围关系提供更多的功能性信息。     

壳聚糖体内抗幽门螺杆菌作用及其对机体体液免疫反应的调节

目的研究壳聚糖体内抗幽门螺杆菌（Hp）作用，及其对机体体液免疫反应的调节作用。方法建立BALB／c小鼠Hp感染的动物模型后，随机分为8组：（1）对照组；（2）PPI组；（3）AM组；（4）AM＋PPI组；（5）壳聚糖组；（6）壳聚糖＋PPI组；（7）壳聚糖＋AM组；（8）壳聚糖＋AM＋PPI组。分别给予上述药物每日2次灌胃，共2周。停药后4周，处死小鼠，无菌条件下取胃黏膜、唾液和血清。采用定量Hp培养和病理改良Giemsa染色法检测胃黏膜内Hp感染。用ELISA法检测血清、唾液和胃黏膜内Hp抗体，用SP免疫组织化学法检测胃黏膜内分泌型IgA（sIgA）。结果以上8组的却根除率分别为0、0、41．7％、58．3％、58．3％、66．7％、83．3％、91．7％，其中（3）～（8）组的肋根除率与（1）和（2）组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。Hp定植密度研究发现各组之间Hp定植密度差异有统计学意义（P〈0．001），坳定植密度在（3）～（8）组显著低于（1）和（2）组（P〈0．05），（7）组显著低于（3）组（P〈0．05），（8）组显著低于（4）组（P〈0．05）。血清中抗Hp　IgG、IgG1、IgG2a及唾液中抗Hp　IgA含量，各组差异无统计学意义（P〉0．05）。胃黏膜中抗Hp　IgA含量，在壳聚糖组和壳聚糖＋AM组显著高于无壳聚糖组（P〈0．05）。胃黏膜sIgA阳性腺体百分率，含壳聚糖组显著高于不含壳聚糖组（P〈0．05）。结论壳聚糖在体内有抗Hp作用，并与AM有协同作用，它与PPI和AM三者联用的Hp根除率高达91．7％，有望成为一抗Hp新药。壳聚糖可促进胃黏膜局部抗Hp　IgA和sIgA的产生，因此它在体内的抗Hp作用除了直接杀灭Hp外，其对机体免疫调节效应可能参与了抗菌机制。     

转录辅激活因子CBP在脂代谢中的作用

CREB结合蛋白(cAMP response element binding protein binding protein,CBP)是一种重要的转录辅激活因子,具有高度保守的序列,能够与300多种转录因子相结合,被认为是哺乳动物基因转录调控中的关键位点.CBP在转录活化过程中主要起乙酰转移酶、桥梁以及支架作用.随着对脂代谢研究的深入,发现很多参与脂代谢的核转录因子(如PPAR、CREB、C/EBPs及SREBPs等)在作用于相应靶基因时都需要CBP的参与,因此CBP可能作为脂代谢的关键调节点.     

广西金秀瑶族CSFlPO、TPOX和TH01的多态性

目的了解广西金秀瑶族CSF1PO、TPOX、TH01的群体遗传多态性,探讨该民族的变迁及为法医学鉴定提供数据。方法广西金秀瑶族无相关个体血样175例,用Chelex-100方法提取DNA,应用AmpFISTRIdentifilerTMkit荧光标记复合PCR扩增技术对175例血样提取样本DNA3个STR基因座进行扩增,用ABIPrism3100型遗传分析仪对扩增产物进行电泳,然后用GeneScanAnalysis3.7和Genetyper3.7软件对基因进行分析。结果在3个位点中共检测出19种等位基因,基因频率分布在0.0029～0.5514之间;44种基因型,其频率分布在0.0054～0.3657之间。经检验该3个位点的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律。广西金秀瑶族3个STR基因座的杂合度分布在0.5657～0.7257之间,个体识别力分布在0.7241～0.8567之间,累积个体识别力为0.9942,非父排除率在0.3658～0.5644之间,累积非父排除率0.8743,多态信息量分布在0.3042～0.7178;该群体与广西侗族、水族、苗族、毛南族等相邻的少数民族有较近的血缘关系,与广西壮族和汉族的关系相对较远。结论广西金秀瑶族该3个STR基因座分布有较高的多态性,可用于民族遗传学的研究和法医学鉴定。