应用荧光探针H2DCF-DA检测光照致细胞内活性氧产生的初步研究

目的应用荧光显微镜及新型荧光探针H2DCF-DA检测在光源照射过程中人脐静脉血管内皮细胞(ECV304)内活性氧的产生情况。方法将ECV304细胞接种于35mm培养皿中,24h后加入H2DCF-DA,使其终浓度为10μmol/L,孵育30min。利用荧光显微镜的激发光源作为照射光源,在采集荧光图像的同时完成光源照射,光源输出波长范围为460～490nm,功率密度约为100mW/cm2。连续采集DCF的荧光图,观察细胞内DCF荧光的变化情况,采用计算机图像处理和分析技术,求得细胞内不同照射时间点DCF平均荧光强度,进而得到平均荧光强度-时间曲线。另外,使用线粒体特异标记探针MitoFluorRed589与H2DCF-DA共同孵育细胞,分别采集同一细胞的DCF的荧光图和MitoFluorRed589的荧光图,并利用像素-荧光强度分析方法来确定DCF荧光在细胞内的分布位置。结果在光源照射的开始阶段,ECV304细胞内的DCF荧光强度迅速增加,在第10s时便上升至第2s时的2.2倍,但是随着照射时间逐渐延长,荧光强度增幅逐渐变小,到第60s时上升至第2s时的4.7倍。观察时间进一步延长,DCF的荧光强度的变化似乎进入平台期,继而开始出现下降。考察DCF荧光在ECV304细胞内的分布位置主要通过比较细胞内不同区域的I1/I2值,通过图像分析与计算得到线粒体区、细胞核区以及细胞质非线粒体区内I1/I2值分     

小儿早期睾丸卵黄囊瘤12例报告

目的：提高对小儿早期睾丸卵黄囊瘤的诊断与治疗水平。方法：回顾性分析12例小儿早期睾丸卵黄囊瘤的病例资料。结果：12例患者术前行阴囊B超示睾丸增大，内部回声不均匀，7例可见睾丸内积液改变；甲胎蛋白(AFP)值均明显升高。12例均行根治性睾丸切除术，术后行病理检查确诊。术前、术后均未行化疗，9例随诊5年未见复发，2002年就诊的3例目前未见复发症状。结论：小儿早期睾丸卵黄囊瘤可根据相关检查结果，结合病理检查确诊。治疗方法为行根治性睾丸切除，可不作化疗，预后较好。     

重症肌无力抗乙酰胆碱受体单链抗体基因的构建

[目的 ]构建重症肌无力抗乙酰胆碱受体主要免疫原区单链抗体A 7基因 .[方法 ]应用PCR技术及基因克隆技术分两步完成重链和轻链可变区基因的克隆 ,再对构建的单链抗体A 7基因进行序列测定检测其核苷酸序列 .[结果 ]构建的重组质粒经序列分析 ,重链可变区基因长度为 36 9bp ,轻链可变区基因长度为 32 1bp ,单链抗体基因长度为 735bp ;单链抗体A 7基因正确地插入在载体质粒pHEN 2开放读码框架内 .[结论 ]成功地构建重症肌无力抗乙酰胆碱受体主要免疫原区单链抗体A 7基因 ,为进一步制备基因工程抗体奠定了基础 .     

急性期中风中医诊断与颅脑CT扫描关系分析

分析325例急性期中风的病类、证名诊断与颅脑CT扫描所见的关系,认为中络、中经以缺血性改变为主,病灶小,病灶周围多清晰或仅见模糊,占位表现不明显或较轻;中腑、中脏以出血性改变为主,病灶大,病灶周围多见水肿或模糊不清,占位表现明显,两者对比差异极显著(P<0.01)。病类诊断与中风的病变部位、病位侧、病灶数目;证名诊断与颅脑CT扫描所见皆关系不大(P>0.05)。     

胃癌单克隆抗体-丝裂霉素C结合物的制备及其细胞毒特征

作者报道胃癌单克隆抗体MG11-丝裂霉素C(MMC)结合物的制备及其对肿瘤细胞的杀伤作用。首先用戊二酐处理MMC,于MMC上引入羧基,MMC衍生物与N羟基琥珀酰亚胺及2,2′-二环已基碳二亚胺反应,得到MMC活性酯,后者与抗体反应将MMC引入抗体中。经测定,每克分子抗体中引入约6～7克分子药物,结合物对人胃癌细胞KATⅢ具有较强的选择性杀伤作用,在0.56μg/ml水平(药物浓度)对肿瘤细胞杀伤牢达60％,优于游离药物(51％)及无关抗体结合物(9.3％),提示选用的胃癌单抗对MMC具有较好的导向作用。     

血清Ⅲ型前胶原对诊断肝纤维化的初步探讨

用￣（１２５）Ⅰ标记Ⅲ型前胶原（ＰＣⅢ）放射免疫法测定健康献血员３３例±ｓ，为８５．０±１７．５ｍｇ／Ｌ，急性黄疸型肝炎１１例为１４８±５０．１ｍｇ／Ｌ，慢性迁延性肝炎１４例为１３３±３１ｍｇ／Ｌ，慢性活动性肝炎２４例为１５７±５９μｇ／Ｌ，肝硬化１７例为１７８±８３．７μｇ／Ｌ，检测结果与健康献血员相比较，均有显著性差异（Ｐ＜０．０１），其中以慢性活动性肝炎、肝硬化的升高更为显著。提示ＰＣⅢ可作为诊断肝纤维化的血清学指标。     

上海城市社区老年人生殖保健需求分析

目的:了解上海城市社区老年人生殖保健需求的特点。方法:对20个居民区35例老年人、20例服务人员进行访谈;对116例老年人进行结构式问卷调查。结果:31.9％的老年人自诉患有生殖系统疾病,23.3％担心患有生殖系统疾病,53.4％对性生活无兴趣,46.6％没有性生活,48.4％性生活中遇到困难。83.2％的老年人在遇到生殖系统问题时首选到医院就诊。表示会参加专门为老年人提供的生殖系统健康检查、有兴趣与异性老人结伴活动,以及希望社区提供有关老年人生殖保健方面的宣传、咨询服务的老年男性比例明显高于女性,分别为68.2％:32％、40.9％:24％、48.5％:38％。结论;老年人当中存在着大量潜在的生殖保健需求,而目前的老年生殖保健需求层次还较低,重点仍是生殖系统疾病的治疗;老年男性希望获得生殖保健服务的愿望比老年女性更为强烈。     

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目的 探讨乳腺导管内乳头状瘤(intraductal papillomas，IP)癌变的临床表现、生物学行为、诊断、治疗及预后。方法 对1980年1月至2001年12月间7例IP癌变病人临床资料进行回顾性分析。结果 7例IP癌变占同期113例IP的5．19％，术前均未能确诊，5例术中冰冻考虑IP癌变。结论 IP有癌变潜能，其癌变者术前确诊困难，术中冰冻对诊断治疗意义重大，应重视术后随访。     

胰岛素样生长因子-Ⅰ对软骨细胞凋亡的抑制

目的:探讨胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)对软骨细胞增殖及白细胞介素-1(IL-1)诱导软骨细胞凋亡的影响,揭示其抗损伤作用机制,为关节软骨损伤治疗提供理论依据。方法:分离培养人胚胎关节软骨细胞,采用四氮甲基唑蓝(MTT)法测定不同含量软骨细胞增殖活性的变化,利用光镜、电镜、DNA电泳及流式细胞仪测定作为凋亡检测指标。结果:IGF-Ⅰ呈剂量依赖式促软骨细胞增殖,当IGF-Ⅰ含量达50μg/L时,促软骨细胞增殖作用达最大值。IL-1组光镜、电镜下可见典型的细胞凋亡形态学改变,琼脂糖凝胶电泳示特征性的DNA梯状条带,IGF-Ⅰ处理组未见明显凋亡征象。流式细胞仪检测发现,IGF-Ⅰ处理后软骨细胞凋亡率显著降低。结论:IGF-Ⅰ能促进软骨细胞增殖,对IL-1诱导的软骨细胞凋亡具有保护作用。