免疫-PCR法检测柯萨奇病毒B组抗原的实验研究

目的：建立免疫－PCR法,对分离培养和柯萨奇B组病毒（CoxB)毒株及临床可疑为CoxB感染的血清标本进行检测。方法：以间日疟原虫SSUrRNA基因为指示分子,采用生物系进行末端标记,利用酶联免疫吸附试验（ELISA）和PCR原理,建立免疫－PCR法,并对60份临床标本进行检测。结果：该方法具有较高敏感性和特异性,其敏感性是ELISA法的3000倍,也高出RT－PCR法10倍。结论：免疫－PCR法是检测CoxB抗原的敏感而特异的方法,为CoxB的临床早期快速鉴定和流行病学研究等提供了一种新的微量抗原检测手段。     

Effects of prolactin on HLA- DR and CD40 expressions by human thyrocytes

Objective To study the effects of prolactin (PRL) on HLA- DR and CD40 expressions by human thyrocytes, and to investigate the possible mechanisms for PRL to affect the de velopment of Graves’ disease (GD). Methods Thyrocytes in secondary culture, which were from GD thyroid glands and the tissu es adjacent to the lesions of multinodular goiter and adenoma (control group), w ere treated respectively with ovine PRL (oPRL), interferon- γ (IFN- γ), interl ukin- 4 (IL- 4) and oPRL plus IFN- γ (10 U/ml) or IL- 4 (5 ng/ml) for 7 days . HLA- DR and CD40 expressions on the thyrocytes were determined by immunofluor escent staining and flow cytometry. Results oPRL (12. 5 ng/ml-1000 ng/ml) had no significant direct effect on HLA- DR or C D40 expression. It did not significantly affect the stimulation of HLA- DR exp ressions on the two groups of thyrocyte treated with IFN- γ or on GD thyrocytes treated with IL- 4. oPRL could antagonize the stimulation of CD40 expressions by IFN- γ and the inhibition by IL- 4 on both groups of thyrocytes. The antago nizing effects were related to the concentrations of PRL. IFN- γ- stimulated p ercentages of CD40［+］ thyrocytes and delta mean fluorescence intensity (dMF) in both thyrocyte sources were significantly reduced in the presence of 200 ng/ml oPRL (both GD and Control: P<0. 01 and P<0. 05, respectively; Contro l: P<0. 05) and 1000 ng/ml oPRL (GD: P<0. 01; Control: P<0. 05). oPRL caused significant increasing in IL- 4- inhibited percentages of CD40［+］ ce lls from the two groups of thyrocytes at 12. 5 ng/ml and 1000 ng/ml and dMF fr om GD thyrocytes at 1000 ng/ml (P<0. 05). Conclusions PRL can exert indirect effects on CD40 expressions on thyrocytes by antagonizing the modulatory actions of IFN- γ and IL- 4 with dose- related effects. This m ay be one important mechanism for PRL to affect the development of GD.     

氧化低密度脂蛋白功能性调节人内皮细胞的生长调节致癌基因α

目的　探讨oxLDL对人内皮细胞的CXC亚家族趋化因子GROα的调节作用及生理意义。方法　超高速离心得LDL ,氧化后得oxLDL。逆转录PCR分析人内皮细胞系ECV30 4细胞GROαmRNA。GAPDH被用作PCR中正常改变的对照物。酶联免疫检测仪测定ECV30 4细胞表面连接及分泌到溶液中的GROα蛋白。静态细胞粘附试验测定ECV30 4细胞表面连接的GROα蛋白的生理意义。结果　正常ECV30 4细胞不表达GROαmRNA ;OxLDL显著调节其表达 ,诱导效应首先出现在处理后 1h ,最大在 2h ,在 4h时下降。相比较 ,LDL对其mRNA表达没有影响。正常ECV30 4细胞低水平表达细胞表面的GROα蛋白。OxLDL呈浓度依赖性、时间依赖性地上调其表面的GROα蛋白。相比较 ,LDL对其表面表达的GROα蛋白无调节作用。OxLDL对ECV30 4细胞分泌到细胞溶液中GROα蛋白很少有影响。 4 0 μg/mloxLDL处理ECV30 4细胞 2 4h ,造成显著的人单核细胞系U937细胞粘附到ECV30 4细胞数目的增加。用GROα抗体预处理oxLDL刺激的ECV30 4细胞 ,可显著减低U937细胞粘附到ECV30 4细胞的U937细胞数目 (大约 2 / 3)。结论　oxLDL可能功能性上调内皮细胞GROα的表达。     

肝移植后肝窦内皮细胞损伤的研究

目的 探讨肝移植后再灌注损伤和排斥反应时,肝窦内皮细胞的变化。方法 利用抗肝窦内皮细胞的单克隆抗体对大鼠肝移植后定期采取的肝组织标本染色。结果 对照组（LEW－LEW）于第4天在肝窦壁内可见ICAM－1的强染色,但是昆布氨酸、第Ⅷ因子相关抗原在实验基间均未见到。高度排斥反应组（ACI－LEW）移植后第1在开始发现ICAM－1的强染色。中度排斥反应组（BN－LEW）移植后第1天开始发现ICAM－1的强染色,移植后1个月开始肝窦壁出现第Ⅷ因子相关抗原。结论 说明慢性排斥反应引起的肝损伤,不仅是以肝动脉为中心的血管损伤,同时也损伤肝窦内皮细胞。     

水飞蓟素固体分散体中水飞蓟宾溶出速度的研究

[目的 ]研究载体和表面活性剂对水飞蓟素固体分散体中水飞蓟宾溶出速度的影响 .[方法 ]采用熔融法制备水飞蓟素固体分散体 ,观察固体分散体中水飞蓟宾在人工肠液中的累积溶出量变化 .[结果 ]水飞蓟素与聚乙二醇为 1∶9比例时固体分散体中水飞蓟宾的溶出速率最佳 ,其最大累积溶出率为6 4 2 7% ;表面活性剂十二烷基硫酸钠组固体分散体的累积溶出率为 6 4 48% .[结论 ]与原料药物相比 ,以聚乙二醇为载体的固体分散体提高了水飞蓟宾的溶出速率     

原发性肝癌经皮微波凝固治疗前后局部免疫活性细胞功能检测

目的：了解原发性肝癌经皮微波凝固治疗前、后局部免疫活性细胞功能变化。方法：C地38例病理诊断原发性肝癌,并接受超声导引下经皮微波凝固治疗的患者。分别治疗前及治疗后17d,超声导引下经皮用18G组织切割针于病灶及其周边肝组织取活检标本,取出的组织标本石蜡包埋,采用特异性单克隆抗体免疫组织化学染色,检测CD3^ 、CD56^ 、CD68^ 细胞及T淋巴细胞表面Fas配体;并在光镜下观察,用病理图像分析仪测量治疗前后、后阳性细胞直径、阳性细胞占单位面积百分比、T淋巴细胞Fas-L阳性表达率及治疗前后巨噬细胞内次级溶酶体变化。结果：治疗前肿瘤内仅有少量免疫细胞浸润,多数浸润的CD3^ 和CD56^ 细胞最大径小于10μm,CD68^ 细胞最大径小于18μm。治疗后病灶内浸润的CD3^ 、CD56^ 和CD68^ 细胞数量较治疗前明显增加,细胞体积明显增大（同治疗前相比CD3^ 细胞和CD56^ 细胞t和P值分别为3．48,－4．76和0．025,0．000,巨噬细胞t和P值分别为－2．46和0．028）。最大径大于10μm的CD3^ 和CD56^ 细胞分别由治疗前的10．4％和20．1％增至24．9％和30．2％,最大径大于18μm的CD68^ 细胞由10．2％增至33．4％。T淋巴细胞Fas-L阳性率由治疗前的7．2％增高至20．1％（P＜0．01,巨噬细胞内次级溶酶体和T淋巴细胞内细胞器明显增多。结论：原发性肝癌经皮微波凝固治疗提高局部浸润免疫细胞的功能。     

慢性阻塞性肺疾病患者血清中细胞间粘附分子-1、E-选择素含量变化及意义

目的：研究细胞间粘附分子-1（ICAM-1）及E-选择素与慢性阻塞性肺疾病（COPD）发病的关系。方法：采用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测30例DOPD急性加重期、缓解期的患者和20例正常对照者血清中的ICAM-1、E-选择素的水平,并将其与患者动脉血气中PO2、PCO2、肺功能FEV1%进行比较。结果：COPD患者中ICAM-1、E-选择素的水平明显高于正常对照组（P＜0.01),且急性加重期明显高于缓解期（P＜0.001),对19例急性加重期患者治疗前后对比分析具有显著差异（P＜0.001)。同时发现ICAM-1、E-选择素与PCO2呈正相关,与PO2及FEV1%呈负相关。结论：ICAM-1、E-选择素参与了COPD的发病,检测血清中的ICAM-1、E-选择素水平对判断COPD的病情轻重程度、治疗效果及预后具有重要的临床意义。     

脑白质疏松的病理与影像学关系的研究

目的：研究脑白质疏松确切的病理变化及其与影像学（CT／MRI）的关系。方法：将10年来我科收治的63例影像学表现为脑白质疏松的患者的临床及影像学资料进行总结,其中10例死后进行了病理检查。结果：脑室周围深部白质,半卵圆中心,放射冠部位的病理学表现为：（1）髓鞘结构紊乱,体积变小,数量减少;（2）轴索变性,萎缩和脱失,（3）白质内明显的小血管硬化和胶质细胞增生;（4）多发性腔隙性梗死灶。结论：病理证实的脱髓鞘改变,CT显示的脑室周围低密度性改变,MRI的T2加权像显示的双侧弥漫性高信号三者部位一致。     

Radiofrequency ablation of the connections between two atriums in dogs

Atrialpreferentialpathways,consistedofatrialcellsarrangedinlongitudinaldirectionandlocatedinspecialregions,havebeenrecognizedtoplayanimportantroleinsinusimpulsepropagationbetweentwoatriuminphysiologicalcondition[1].Recentstudiesshowedthattheinteratrialconduitalsocontributedtotheinitiationandmaintenanceofsomekindsofatrialarrhythmiabytravelingectopicimpulsesandreentriesbetweentwoatriums[2].Soitwassuggestedthattheblockageoftheconductiveroutesofatriumsmightintervenetheinitiationandmaintenanceofsom…     

透析器复用对补体及单个核细胞激活的影响

目的：了解透析器复用对补体和单个核细胞激活的影响。方法：比较透析器第四次复用与首次使用时,血浆补体终末复合物（SC5b-9）浓度及分离的单个核细胞（PBMC）在体外培养产生IL－1β、TNF-α和IL－6量的差异。结果：血仿膜透析器用过氧乙酸和福尔马林消毒后第四次复用时,血浆SC5b-9浓度变化幅度较首次使用明显降低;PBMC在LPS刺激下体培养产生IL－1β、TNF-α和IL－6的量与首次使用相比差异无显著性。结论：血仿膜透析器用过氧乙酸和福民林消毒复用,可在一定程度上降低其补体激活能力,但不影响PBMC产生细胞因子。